HDR. network. Sperimentazione su estratto di Aloe Arborescens ottenuto con metodo HDR
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- Franca Cosentino
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1 ntwork primntazion su stratto di Alo Arborscns ottnuto con mtodo HDR
2 Introduzion L piant i loro stratti sono apprzzati pr il loro spcifico aroma, pr l proprità nutracutich traputich, com l'attività antimicrobica, antiprolifrativa, antiinfiammatoria, immunostimolant antiossidant (Grathad, 23). L'Alo Arborscns Millr, appartnnt al gnr Alo (Famiglia Liliaca), è una dll principali varità di Alo usata in tutto il mondo. Essa è commrcialmnt coltivata nl ud Amrica (Brasil Uruguay), ud Africa in alcuni Pasi asiatici. L'stratto di Alo Arborscns condivid alcun proprità traputich con la bn nota studiata Alo Vra d è comunmnt utilizzata in applicazioni mdich pr il trattamnto di ustioni, frit pr aiutar l'acclrazion dl procsso di guarigion dlla pll. Rcnti studi hanno dimostrato ch l'alo Arborscns ha un'attività immunostimolant sugli animali (Infasclli t al., 21 primntazion HDR lina Vtrinaria), d ha inoltr attività bnfich, proprità fitotrapich d antitumorali (Lissoni t al., 29). È noto ch l proprità antitumorali dll'alo Arborscns non dipndono solo dal suo fftto immunomodulant, ma anch da una inibizion dirtta dlla prolifrazion dll cllul tumorali (Bdini t al., 29). Gli fftti immunostimolanti sono dovuti ad acmannano, mntr gli fftti antiprolifrativi sono stati attribuiti agli antrachinoni (Lissoni t al., 29). L' Alo arborscns è anch noto pr il suo fftto nl trattamnto dll ustioni la capacità di aumntar la guarigion dll f r i t. I n o l t r, è s t a t o d i m o s t r a t o d i s s r u t i l p r ridurr la crscita microbica uccidr una vasta gamma di virus funghi, fornndo in tal modo un sostgno straordinario pr il tratto gastrointstinal, mmbran mucos, tssuto connttivo (A. Falctti). Pr dtrminar gli fftti traputici dll'alo Arborscns, è stato fatto un considrvol numro di indagini clinich, tuttavia, pochi studi hanno affrontato gli fftti biologici di Alo a livllo molcolar. L'obittivo dl prsnt studio è qullo di analizzar la risposta cllular al trattamnto con stratto di Alo Arborscns HDR attravrso un approccio biochimico cllular pr supportar la sua applicazion com agnt traputico.
3 L stratto di Alo Arborscns con mtodo di strazion HDR rallnta la prolifrazion dll cllul cancros in coltura. Dall tabll è possibil notar, com in tutti i tipi di cllul trattat, la prolifrazion è fortmnt rallntata. Nl caso spcifico dll cllul di carcinoma squamoso A431 si ha una riduzion HaCaT A431 CaCo2 MDA-MB231 chratinociti spontanamnt immortalizzati carcinoma squamoso adnocarcinoma pitlial colo-rttal cancro dl sno mtastatico
4 Analisi dl ciclo cllular in cllul di carcinoma mammario mtastatico Il ciclo cllular dll MDA-MB231, cllul di carcinoma mammario mtastatico, vin intrrotto in fas G2 com dimostrato dall sgunti tabll: Cllul pitliali dlla ghiandola mammaria MDA-MB231 Wstrn blot Cllul pitliali dlla ghiandola mammaria 6 Alo p21waf T o hrs 5 cyclin D1 4 3 sub- actin MDA-MB MDA cntr MDA Analisi al citofluorimtro Accumulo di cllul in fas G2 Inibizion dl rintro nl ciclo Picco sub-diploid.
5 Analisi dl ciclo cllular in adnocarcinoma pitlial colo-rttal Il ciclo cllular dll Caco-2, cllul adnocarcinoma pitlial colo-rttal, vin intrrotto in fas com dimostrato dall sgunti tabll: Cllul pitliali intstinali Caco-2 Wstrn blot Cllul pitliali intstinali T o hrs Alo p21waf Caco-2 cntr Caco-2 sub- cyclin D1 actin CaCo-2 Analisi al citofluorimtro Accumulo di cllul in fas Inibizion dl rintro nl ciclo Incrmnto dl picco subdiploid
6 Analisi dl ciclo cllular in cllul di carcinoma squamoso dlla vulva Il ciclo cllular dll A431, cllul di carcinoma squamoso dlla vulva, vin intrrotto in fas G2 com dimostrato dall sgunti tabll: A431 to sub- Alo p21waf cyclin D1 T o hrs A431 cntr A431 actin A 431 Accumulo di cllul in fas G2 Inibizion dl rintro nl ciclo Incrmnto dl picco sub-diploid
7 L cllul di carcinoma squamoso dlla pll sono ipr-snsibili all stratto di Alo Arborscns HDR CC22 CC ls 3 c2 # 1 r b m u n l C 45, 4, to PI CC22 control alo ls 4 c # 2 5 r b m u n l C 8, 7, to CC11 PI control alo Blocco in fas Inibizion dl rintro nl ciclo Incrmnto sostanzial dl picco subdiploid 35, 6, 3, 25, 2, 15, 1, 5,, scc 22 cntrl scc 22 sub- 5, 4, 3, 2, 1,, scc11 cntrl scc11 sub-
8 L cllul di carcinoma squamoso dlla pll sono carattrizzat dalla ipr-sprssion dl fattor pro-prolifrativo ÿnp63ÿ. Tal fattor non si sprim in sguito al trattamnto con alo arborscns. WGA DAPI Mrg NT Alo 24hrs Alo 48hrs F T ÿnp63ÿ hrs - + alo 1% v/v Kratin 1 p21waf actin CC11
9 Coclusioni I risultati prsntati in qusto studio indicano un chiaro fftto ANTIPROLIFERATIVO dll' stratto di Alo Arborscns ottnuto con mtodo HDR su divrsi tipi di cllul tumorali un fftto prodiffrnziativo sia su chratinociti umani primari ch immortalizzati. In sintsi l fftto prodiffrnziativo, prmtt all cllul san di continuar a prolifrar, contmporanamnt inibisc la prolifrazion dll cllul cancros. Da un punto di vista dll'applicazion mdicinal, il nostro studio supporta l'uso di stratto di Alo Arborscns com argomnto pr il trattamnto di malatti iprprolifrativ dlla pll dl carcinoma squamoso. Estratto dlla sprimntazion ffttuata da: Blanda Di Luccia, 1 Nicola Manzo, 1 Maria Vivo, 1 Eugnio Galano, 2 Angla Amorsano, 2 Elvira Crscnzi, 4 Alssandra Pollic, 1* Raffalla Tudisco, 3 Fdrico Infasclli, 3 and Viola Calabrò, 1 1- Dipartimnto di Biologia truttural Funzional, Univrsità di Napoli Fdrico II, Napls, Italy 2- Dipartimnto di Chimica Organica Biochimica, Univrsità di Napoli Fdrico II, Napls, Italy 3- Dipartimnto di cinz Zootcnich Ispzion dgli Alimnti, Univrsità di Napoli Fdrico II, Napls, Italy 4- Istituto di Endocrinologia d Oncologia primntal, CNR, via. Pansini, 58131, Napls, Italy primntazion pubblicata sulla rivista scintifica PHYTOTHERAPY REEARCH, 213.
R k = I k +Q k. Q k = D k-1 - D k
1 AMMORTAMENTO AMMORTAMENTO Dbito inizial D 0 si volv (al tasso fisso t) D k = D k-1 (1+t) R k [D k dbito (rsiduo) al tmpo k, R k pagamnto al tmpo k ] Condizioni [D n =0 : stinzion dl dbito in n priodi
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