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1 Biologia riproduttiva e genetica di Lepre bianca nell arco alpino occidentale Elisa Masseroni (Istituto Oikos)

2 Distribuzione globale Distribuzione artico-alpina alpina Disgiunzione dell areale

3 Distribuzione italiana (Pavan e Mazzoldi, 1983) Sulle Alpi: Lepus timidus varronis

4 Raccolta dati storici Sulle alpi svizzere è stato condotto uno studio biennale su attività ed utilizzo dello spazio. (Gamboni,, 1997) Rapporto tecnico del gruppo Albatros e dell Universit Università degli Studi di Pavia nel Parco Naturale Adamello Brenta. (Barbieri, 1998) Da dati indiretti si deduce un decremento generalizzato sull intero arco alpino.

5 Conservazione corretta gestione! Importanza approfondimento Aspetti inerenti la genetica Parametri demografici (riproduttivi!)

6 Genetica - Raccolta dati esistenti ITALIA - Studi su popolazioni trentine - Non sono emerse situazioni di ridotta variabilità genetica, ma marcate differenze tra popolazioni (accoppiamenti preferenziali tra consanguinei <-< frammentazione + N ridotto?). Presenza di ibridi; fenomeno geograficamente diffuso ma apparentemente raro; (introgressione bidirezionale!) Necessario confronto con altre aree. (Pecchioli et al., 2006)

7 Genetica - Raccolta dati esistenti EUROPA Da studi su popolazioni scandinave sono emersi fenomeni di interfecondità,, con produzione di ibridi, tra lepre alpina e lepre comune (Lepus( europaeus) (Thulin & Tagelström,, 2002) Da studi effettuati in Spagna sono emersi fenomeni di interfecondità,, con la produzione di ibridi, tra la lepre alpina e la lepre comune (Lepus( europaeus) (Alves et al., 2003)

8 Ibridazione Lepre bianca Lepre comune

9 Ibridazione Distribuzione altitudinale abbattimenti N lepri abbattute Lepeur Leptim Quota (m s.l.m.) Possibile concausa del lento declino della specie sulle Alpi Italiane!

10 Obiettivi - Genetica Investigare la struttura genetica e la relativa distribuzione geografica della lepre bianca sull intero arco alpino Evidenziare possibili cause del declino, per valutare eventuali fenomeni di frammentazione legati ai cambiamenti climatici e fornire indicazioni utili per la gestione e la conservazione

11 Metodi - Genetica Analisi del DNA degli individui di Lepre bianca -e e lepre comune- abbattuti nell ambito dell attivit attività venatoria, provenienti da differenti aree geografiche dell arco alpino Il DNA può essere estratto in maniera molto affidabile da campioni di PELLE e MUSCOLO, facilmente prelevabili dai professionisti incaricati del controllo dei capi abbattuti, ma anche dai cacciatori stessi.

12 Metodi -Protocollo prelievo tessuto- Prelevare un campione tissutale della dimensione di circa 1 cm 2. Materiale: - Provette sterili con etanolo al 90% - Bisturi mono-uso - Pinzette sterili (o Amuchina) - Etichette - Scheda di accompagnamento E opportuno che, appena prima dell inizio della stagione venatoria, venga organizzato un incontro con la componente venatoria per spiegare le finalità del progetto, le modalità di raccolta, e distribuire un kit contenente tutto il necessario per il prelievo dei campioni

13 Parametri demografici DIFFICOLTA RACCOLTA DATI DIRETTI IMPIEGO METODI INDIRETTI!

14 Parametri riproduttivi - metodi di indagine Conteggio cicatrici uterine Informazioni anatomiche: utero bipartito, placenta emocoriale,, stretta associazione tra i tessuti materni e fetali, strappo dell endometrio endometrio durante il parto con locale sanguinamento (cicatrici). Nel processo di guarigione dell endometrio endometrio è implicato un gran numero di macrofagi,, ricchi di emosiderina. Cicatrici: visibili grazie alla presenza dei macrofagi, discriminabili per età in base alla migrazione degli stessi Intera stagione riproduttiva (prima prima di inizio anestro: : periodo venatorio) Metodologia di analisi uteri congelati in acqua colorazione di Salewski (Bray,, 2003)

15 Prelievo Metodi -Protocollo prelievo uteri- -da effettuare al termine della stagione riproduttiva (autunno), ore dopo la morte del soggetto- Incisione ventre Rimozione apparato digerente (intestino, stomaco, fegato) Prelievo ovaie e utero bicorne Inserimento dell apparato riproduttore in un boccetto con apposita etichetta Ricopertura con acqua Congelamento boccetto

16 Metodi -Protocollo prelievo uteri- Materiale: - Barattoli di plastica - vetro - Bisturi mono-uso - Acqua - Etichette - Scheda di accompagnamento E opportuno che, appena prima dell inizio della stagione venatoria, venga organizzato un incontro con la componente venatoria per spiegare le finalità del progetto, le modalità di raccolta, e distribuire un kit contenente tutto il necessario per il prelievo dei campioni

17 Metodi -Protocollo prelievo uteri- Prelievo utero

18 Parametri riproduttivi - metodi di indagine Valutazione cicatrici uterine Ogni cicatrice viene classificata sulla base di 7 variabili Dimensione della lesione (cratere) Profondità del cratere Colore del cratere Colorazione bordi Abbondanza dei macrofagi Colorazione dei macrofagi Colorazione della depressione antimesometriale In base alle caratteristiche ogni cicatrice è stata classificata in 6 categorie d etd età,, sulla base della lunghezza della gestazione caratteristica della specie (E1-E6). E6).

19 Parametri riproduttivi Area di studio e campioni raccolti Campione: lepri bianche e lepri comuni abbattute in provincia di Sondrio negli anni (N=111) Uteri_raccolti Uteri _analizzati Immessi L. timidus (100%) 0 L. europaeus (93%) 16 (22%) Informazioni abbattimento data quota biometrie (peso) cristallino (età) -curva dei pesi di Walhold 1965-

20 Determinazione dell etàetà Tubercolo di Stroh Peso del cristallino

21 Metodi -Protocollo prelievo occhi- Prelievo occhi

22 Metodi -Protocollo prelievo occhi- Prelevare gli occhi senza rompere il bulbo e metterli nel barattolo, coperti da formalina. Materiale: - Barattoli di plastica (ermetici!) con formalina - Cucchiaino - Etichette - Scheda di accompagnamento E opportuno che, appena prima dell inizio della stagione venatoria, venga organizzato un incontro con la componente venatoria per spiegare le finalità del progetto, le modalità di raccolta, e distribuire un kit contenente tutto il necessario per il prelievo dei campioni

23 grazie! Rilascio del primo individuo catturato il (foto di Francesco Bisi)