TETRACLOROETILENE Urinario in GC/MS spazio di testa Codice GC15010

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1 TETRACLOROETILENE Urinario in GC/MS spazio di testa Codice GC15010 BIOCHIMICA Il Tetracloroetilene, o percloroetilene, è un alogenuro organico. La sua struttura è assimilabile a quella di una molecola di etene i cui 4 atomi di idrogeno sono stati sostituiti da altrettanti atomi di cloro. A temperatura ambiente si presenta come un liquido incolore dall odore di cloro. E un composto nocivo per inalazione e pericoloso per l ambiente, non è infiammabile. Il tetracloroetilene viene utilizzato nelle lavanderie a secco come sgrassante, nell industria chimica e farmaceutica, nell uso domestico. L esposizione ad elevate concentrazioni di tetracloroetilene puo causare danni epatici e renali. La tossicità è legata al metabolismo via acidi mercapturici con formazione dell acido premercapturico triclorovinilcisteina ed attivazione a tiochetene via β-liasi. Il metodo proposto determina il tetracloroetilene iniettando in GC-MS/spazio di testa un aliquota di campione urinario precedentemente trattata in opportuno solvente. I livelli del tetracloroetilene vengono determinati su un campione urinario di inizio e fine turno. EUREKA srl LAB DIVISION VAT N Head Quarter: Via Enrico Fermi Chiaravalle (AN) ITALY Tel Fax Release N 002 Tetracloroetilene urinario in GC/MS-spazio di testa Marzo

2 CARATTERISTICHE DEL KIT Principio del metodo : Il presente metodo consente di determinare il tetracloroetilene urinario in GC/MS spazio di testa. Il tetracloroetilene viene prima diluito e poi viene direttamente iniettato in GC. Recupero del Metodo: 100% Sensibilità del Metodo: 0,5 µg/l in MS Range Dinamico del Metodo: µg/l in MS Valori di Riferimento: Contenuto della Confezione : < 100 µg/l soggetti esposti < 1,15 µg/l soggetti non esposti Tutti i reagenti sono pronti all uso e stabili 3 anni a Temperatura 20 C. Reagente A Soluzione Diluente, 1 x 50 ml Reagente B Soluzione test / Standard Chimico, 1 x 5 ml Dotazione strumentale minima richiesta : Strumento GC/MS Computer gestionale Dotazione opzionale : Autocampionatore Modalità di prelievo : Alla fine del turno lavorativo, raccogliere 10 ml di urine in una provetta idonea. Stabile 7 giorni a 4 C. Stabile circa 4 settimane a 20 C. 2

3 PROCEDURA PREANALITICA Preparazione della Soluzione Test a 32 µg/l Dispensare in una vial da 10ml: 1800 µl di Reagente A Soluzione Diluente 200 µl di Reagente B Soluzione Test Iniettare 1000 µl della soluzione nel gascromatografo GC ed attendere la stampa del cromatogramma. Verificare che il tempo di ritenzione della soluzione sia simile a quello riportato in figura 1. Se l esito è positivo si può procedere alla seduta analitica. Se cosi non fosse verificare la funzionalità del sistema analitico. PROCEDURA ANALITICA FASE 1: Preparazione della soluzione Standard di Calibrazione a 32 µg/l Dispensare in una provetta: 1800 µl di Urina 200 µl di Reagente B Standard Chimico IMPORTANTE: Tale soluzione Standard di Calibrazione va preparata di volta in volta Per verificare che l urina sia effettivamente esente da Tetracloroetilene, preparare un Bianco: 1800 µl di Urina 200 µl di H 2 O di grado HPLC Qualora il Bianco urina presentasse il picco del Tetracloroetilene, procedere all individuazione quantitativa per differenza tra le aree/altezze dei picchi del Tetracloroetilene presenti nell urina arricchita e nel bianco. I campioni vengono iniettati direttamente trasferendone 2 ml nelle vials per GC. Inserirle nel Campionatore Chiudere ermeticamente le vials Agitare al Vortex Preparare la lista di lavoro e avviare la serie secondo le specifiche del sistema Release N 002 Tetracloroetilene urinario in GC/MS-spazio di testa Marzo

4 TETRACLOROETILENE - Avvertenze REAGENTE B : SOLUZIONE TEST / STANDARD CHIMICO TETRACLOROETILENE 320 µg/l SETTAGGIO DEL GAS-CROMATOGRAFO : Colonna VF-5ms 30 m x 0,25 mm, 0,25 µm (condizionata) Temperatura iniettore 200 C Rapporto di Splittaggio: OFF; 4 ON Split 10 Iniezione a Split-Splitless con apertura dopo 0,10 min Temperatura 70 C x 2 minuti + 10 C/min fino a 160 C (corsa 11 minuti) Gas Elio 1 ml/min Temperatura siringa: 70 C Temperatura agitatore: 120 C (agitare e riscaldare x 2 minuti) SETTAGGIO DETECTOR DI MASSA (4000): Range di Massa Modo operativo in Impatto Elettronico (EI) Settaggio in SIM alle Masse Caratteristiche Temperatura della Massa: 180 C Filamento on: 1 minuto CONDIZIONAMENTO DELLA COLONNA VF-5 MS Seguire le prescrizioni del costruttore. Non condizionare la (le) colonna/e se attaccata al Detector di Massa. PULIZIA DELLA COLONNA Disconnettere il detector. Tenerla alla massima temperatura per il tempo consigliato. ( Vedi istruzioni del costruttore ) PARAMETRI COMPUTER GESTIONALE SECONDO LE SPECIFICHE DEL SOFTWARE GESTIONALE 4

5 TETRACLOROETILENE URINARIO (Cromatogrammi / Spettri di riferimento GC-MS / Spazio di Testa) kcounts 32 stand. cal. tetracloroetilene 0.3m g.sms 50: :300 1A 800 Area: 1.320e Counts min 100% Spectrum 1A BP: min, Scan: 225, 50:300, Ion: 396 us, RIC: , BC % % % Area: Counts min Area: Counts min Area: Counts min 0% minutes m/z Fig. 1 : Standard di Calibrazione Fig. 2 : Spettro di Massa di Standard di Calibrazione R.T. 2.7 TETRACLOROETILENE 32 µg/l IONE MOLECOLARE : 166 5

6 TETRACLOROETILENE URINARIO (Cromatogrammi / Spettri di riferimento GC-MS / Spazio di Testa) kcounts 33 camp.urinario tetracloroetilene 0.03m g.sms 50: : % Spectrum 1A BP: min, Scan: 224, 50:300, Ion: 4887 us, RIC: 77826, BC % A % Area: Counts min Area: Counts min Area: Counts min 25% 0% minutes m/z Fig. 3 : Campione urinario Fig. 4 : Spettro di Massa di Campione urinario R.T. 2.7 TETRACLOROETILENE 3 µg/l IONE MOLECOLARE : 166 6

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