I markers biologici come fattori predittivi di efficacia terapeutica nei tumori solidi: l esperienza di Varese

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1 I markers biologici come fattori predittivi di efficacia terapeutica nei tumori solidi: l esperienza di Varese Daniela Furlan U.O. Anatomia Patologica, Ospedale di Circolo e Fondazione Macchi, Varese

2 Il nostro lavoro in Anatomia Patologica a Varese ALK HER-2 KRAS EGFR HER-2 BRAF Carcinoma mammario Carcinoma colon-retto NSCLC Carcinoma gastrico NSCLC melanoma

3 Test HER2 nel carcinoma della mammella L amplificazione e/o overespressione del gene HER-2 si osserva in circa il 20% dei cancri mammari e ha un valore prognostico negativo ha un elevato valore predittivo di risposta all anticorpo monoclonale Trastuzumab e all inibitore tirosin-chinasico di HER2 e EGFR, Lapatinib CEN HER 2 Ratio (R): n segnali rossi (gene) n segnali verdi (cen) Wolff AC et al., J Clin Oncol 2007; 25(1):

4 IIC 0/1+ no TERAPIA ANTI-HER2 2+ FISH 3+ TERAPIA ANTI-HER2 No AMPLIFICAZIONE GENICA no TERAPIA ANTI-HER2 AMPLIFICAZIONE GENICA TERAPIA ANTI-HER2

5 2011: 541 analisi immunoistochimiche 70% 21% 9% FISH 0/ Positività globale osservata per HER2: 16% Analisi FISH Atteso: 15-25% (Bilous et al, 2003)

6

7 Test HER2 nel carcinoma gastrico metastatico (dal 2010 ad oggi: 44 analisi IIC e FISH) 64% 36% mutati HER2 + wt HER2 - Marcata eterogeneità tumorale in carcinoma gastrico HER2 positivo

8 2008 L analisi di mutazione del gene KRAS nel carcinoma colorettale metastatico DNA tumorale

9 Test di mutazione KRAS a Varese N=708 analisi (Settembre 2008/ottobre 2012)

10 Test di mutazione KRAS a Varese: risultati N=708 analisi : Sequenziamento Sanger : Pirosequenziamento

11 Come possiamo controllare la la ricaduta qualità dei nostri test? 2010 KRAS European Quality Assurance Program Oncologia Busto Arsizio 2010 KRAS Quality Oncologia Gallarate 2012 KRAS Quality Oncologia Saronno AP Varese Oncologia S.Anna Como Oncologia Valduce Oncologia Gravedona Oncologia Varese v Progetto multicentrico di raccolta dei dati clinici dei pazienti a cui abbiamo fornito il test creando una rete tra le diverse U.O. di Oncologia

12 190 casi totali ( ) Recupero dati clinici VARESE: 118 KRAS WT KRAS mutati 41 trattati C/P 19 non trattati C/P 58 pz Recupero dati clinici altre U.O. oncologia: 72 pz (Saronno, S. Anna, Busto) KRAS WT KRAS mutati 24 trattati C/P 15 non trattati C/P 34 pz

13 2010 Test di mutazione EGFR a Varese N=323 analisi (marzo 2010/ottobre 2012) (306 analisi da campioni istologici, 17 analisi da campioni citologici)

14 L analisi presso la nostra U.O. Utilizzo dei kit con pirosequenziatore: EGFR TKI response (sensitivity) Mutazioni EGFR rilevate: Esone 18: G719C, G719S/D Esone 19: E746-A750 Esone 21: L858R, L861Q EGFR TKI response (resistance) Mutazioni EGFR rilevate: Esone 19: D761Y, D761G Esone 20: T790M, S768I, V769L, G771ins, ASV ins

15 L analisi di mutazione del gene EGFR Casi consecutivi (N=323) marzo 2010/ottobre 2012 Studio retrospettivo Pazienti (N=53) Età (mediana) 68 Sesso M 34 (64) F 19 (36) Abitudine al fumo no 16 (30) pregressa 13 (24) si 24 (46) Istotipo Adenocarcinoma 46 Non 7 adenocarcinoma Stadio IIIB 3 (6) IV 50 (94) Trattamento TKI Erlotinib 48 (91) Gefitinib 5 (9) Risposta CR/PR 14 (30) SD 12 (26) PD 20 (44)

16 ANALISI CON PYROSEQUENCING (N=53) Wt Mut Mutazioni EGFR: associazioni positive Sesso femminile (p=0.06) No abitudine al fumo (p=0.006) Risposta clinica al trattamento con TKI (p=0.001) Prognosi migliore (OS e DFS)

17 EGFR status e risposta clinica a TKI Sopravvivenza globale 1 Risposta 6 Malattie Stabili 17 Progressioni EGFR WT RR:4% TC:29% EGFR MUTATI 12 Risposte 6 Malattie stabili 3 Progressioni % allele mutato RR:57% TC:86% mediana: 58% Range: 25%-100% Mediana: 39% Range: 22%-56% Mediana: 30% Range: 14%-52%

18 Pyrosequencing versus analisi FISH Tumori mutati (n=20) 7 amplificazioni EGFR Tumori wt (n=16) 1 amplificazione EGFR caso Tipo mutazione % allele mutato amplificazione EGFR 1 E746-A750 del 100 ampl 2 E746-A750 del 90 ampl 3 E746-A750 del 85 ampl 4 E746-A750 del 69 ampl 5 L861Q 56 ampl 6 L858R/E746-A750 del 26/26 ampl 7 L858R 23 ampl

19 2011 L analisi dei riarrangiamenti del gene ALK nel NSCLC

20 Test dei riarrangiamenti del gene ALK a Varese (settembre 2011/novembre 2012: 50 richieste) N=45 analisi (41 istologici, 4 citologici) 2012 External quality assessment scheme for NSCLC

21 2012 Test di mutazione BRAF a Varese 63 carcinomi colorettali 15 melanomi 8 sospette Lynch 2 carcinomi papillari tiroide 2 leucemie a cellule capellute

22 melanoma HER-2 KRAS EGFR BRAF NSCLC Il futuro. Nuove tecnologie ALK HER-2 Carcinoma mammario Carcinoma colonretto NSCLC Carcinoma gastrico

23 Grazie!

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