QUANTA Chek Celiac Panel

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1 QUANTA Chek Celiac Panel Finalità d uso Il Pannello Celiac QUANTA Chek TM è utilizzato per il controllo della qualità delle procedure per la ricerca degli autoanticorpi IFA ed ELISA. Ciascun siero funge sia da controllo del pattern che da controllo della sensibilità titolabile. Il pattern e l intensità della colorazione per ciascun siero sono stati calibrati analizzandoli su tre partite di vetrini Endomisio della INOVA Diagnostics e tre partite di vetrini h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e della INOVA Diagnostics. Descrizione dei sieri del pannello Otto contenenti 0,15 ml di siero umano non diluito conservato con azoturo di sodio allo 0,09%. Siero Numero di partita Pattern Siero A del pannello Celiaca A Endomisio e h-ttg IgA Siero B del pannello Celiaca B Endomisio, h-ttg IgA, e Siero C del pannello Celiaca C Endomisio, h-ttg IgA, e Siero D del pannello Celiaca D Endomisio, h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e Siero E del pannello Celiaca E Endomisio, h-ttg IgA e Gliadin IgG II Siero F del pannello Celiaca F Endomisio, h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e Siero G del pannello Celiaca G Endomisio, h-ttg IgG,e h-ttg IgA Siero H del pannello Celiaca H Negativ Avvertimenti e precauzioni Materiale di provenienza umana: trattare come potenzialmente infettivo. Il siero utilizzato nella preparazione di questo prodotto è stato testato con metodi approvati dall ente statunitense preposto al controllo degli alimenti e dei farmaci (Food and Drug Administration, FDA) ed è risultato non reattivo per la presenza di antigeni di superficie dell Epatite B (HBsAg), di anticorpi del virus dell immunodeficienza umana (HIV) ed al virus dell Epatite C (HCV). Nessun metodo per test conosciuto offre l assoluta certezza che siano assenti i virus dell Epatite B, l HIV, l HCV o altri agenti infettivi. Maneggiare i sieri del pannello e tutti i campioni dei pazienti in base al Secondo livello della Biosicurezza come raccomandato nel manuale dei Centri per il Controllo delle Malattie/Istituti Sanitari Nazionali statunitensi (Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual) intitolato Biosicurezza nei laboratori microbiologici e biomedici Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories: Centers for Disease Control/National Institutes of Health, Fifth Edition, ATTENZIONE: il siero del pannello contiene azoturo di sodio allo 0,09%. L azoturo di sodio può reagire con il piombo ed il rame delle condutture idrauliche e formare degli azoturi metallici altamente esplosivi. Allo smaltimento fare scorrere un grande volume di acqua per evitare il depositarsi di azoturi. ISTRUZIONI PER L USO Controllo Pattern di colorazione IFA 1. I sieri del pannello sono forniti non diluiti. Devono essere trattati ed analizzati come campioni di pazienti. 2. Analizzare i sieri del pannello come se fossero sieri di pazienti seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo dell INOVA. 3. Determinare il pattern ed il livello di intensità della colorazione di ciascun siero utilizzando i seguenti criteri: 4+ Fluorescenza verde chiaro brillante 3+ Fluorescenza verde chiara accesa 2+ Fluorescenza positiva chiaramente distinguibile 1+ La più bassa fluorescenza specifica che permette di differenziare chiaramente una struttura cellulare dalla fluorescenza di fondo. Controllo IFA della sensibilità del siero 1. Dopo aver preparato una diluizione 1:5 del pannello sierico in salina tamponata con fosfato (PBS), continuare a preparare diluizioni doppie seriali fino ad una diluizione di almeno 1: Analizzare le diluizioni seguendo le istruzioni contenute nel foglietto illustrativo del kit INOVA. 3. Determinare il titolo estremo di ogni siero del pannello. Il titolo estremo è la diluizione maggiore del siero che mostra un intensità di colorazione pari a 1+. Questo pannello sierico può essere utilizzato come parte delle procedure del controllo della qualità per le analisi alla immunofluorescenza su substrati Endomisio. Osservare l intensità di colorazione per ciascun siero. Il titolo estremo è determinato dalla diluizione con un intensità di colorazione di 1+. Una sensibilità accettabile per la propria analisi può essere verificata ottenendo lo stesso estremo (+ una diluizione doppia) come mostrato nella sezione contenente le specifiche del controllo della qualità. 1

2 Il titolo di siero effettivamente riscontrato nel proprio laboratorio può variare di più o meno una diluizione doppia per via di differenze relativamente a tecnica, interpretazione dei dati o microscopio utilizzati. Nel caso in cui i propri risultati dovessero variare di due o più diluizioni doppie, pregasi rivolgersi al nostro Reparto di assistenza tecnica chiamando il numero (U.S. & Canada Only): , (Outside the U.S.): NOTA: le specifiche del controllo della qualità elencate in basso sono state ottenute utilizzando substrati, reagenti ed apparecchiature INOVA Diagnostics. I titoli ottenuti possono variare da laboratorio a laboratorio in base ai substrati, ai reagenti, al microscopio, alla fonte di luce, all età della lampadina e all ingrandimento utilizzati per stabilire il titolo estremo. Controllo del siero Celiaca 1. I sieri del pannello sono forniti non diluiti. Devono essere trattati ed analizzati come campioni di pazienti. 2. Analizzare i sieri del pannello come se fossero sieri di pazienti seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo delle h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e/o. 3. Determinare la reattività di ciascun siero, positiva o negativa, e compararla con la reattività ottenuta con il ELISA della INOVA Diagnostics. Questo pannello sierico può essere utilizzato come parte della procedura del controllo della qualità per gli h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e/o. Determinare il valore delle unità per ciascun siero del pannello seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo del kit h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG IIe/o. Utilizzare questi valori in conformità con il foglietto illustrativo per determinare se il campione è positivo o negativo per gli autoanticorpi h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e/o. Una sensibilità accettabile per la propria analisi può essere verificata ottenendo la stessa interpretazione (positiva o negativa) come mostrato nella sezione contenente le specifiche del controllo della qualità. NOTA: le specifiche del controllo della qualità elencate in basso sono state ottenute utilizzando reagenti, procedure ed apparecchiature h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e/o della INOVA Diagnostics. I risultati possono variare da laboratorio a laboratorio in base al produttore del kit h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e/o, alla temperatura del laboratorio, alle tecniche ed al lettore di piastra microwell utilizzati. Specifiche del controllo della qualità Ciascun siero di questo pannello è stato analizzato con due partite di Endomisio e tre partite di h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e (QUANTA Lite ). Queste analisi sono state eseguite nei laboratori del Controllo della Qualità della INOVA Diagnostics utilizzando reagenti INOVA e conformemente a quanto riportato nei foglietti illustrativi INOVA. Per l analisi IFA è stato utilizzato un microscopio con lampadina alogena da 100 watt ed un ingrandimento di 400x. Per l analisi ELISA è stato utilizzato un lettore di piastra microwell regolato a 450 nm con riferimento a 620 nm. Siero A del pannello Celiaca/N, di partita A : : :160 Pattern: Endomisio e h-ttg IgA Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Siero B del pannello Celiaca/N. di partita B : : :80 2

3 Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Siero C del pannello Celiaca/N. di partita C : : :80 Gliadin I g A II Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Siero D del pannello Celiaca/N. di partita D : : :160 Pattern: Endomisio, h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Siero E del pannello Celiaca/N. di partita E : : :40 Gliadin IgG II Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Positivo Negativo Positivo Negativo Positivo Negativo 3

4 Siero F del pannello Celiaca/N. di partita F : : :40 Pattern: Endomisio, h-ttg IgG, h-ttg IgA, Gliadin IgG II e Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Siero G del pannello Celiaca/N. di partita G : : :20 Pattern: Endomisio, h-ttg IgG e h-ttg IgA Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Siero H del pannello Celiaca/N. di partita H Negativo Negativo Negativo Pattern: Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo 4

5 Fornitore: INOVA Diagnostics, Inc Old Grove Road San Diego, CA United States of America Technical Service (U.S. & Canada Only) : Technical Service (Outside the U.S.) : support@inovadx.com Rappresentante Autorizzato: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D St. Ingbert, Germany Tel.: Fax.: ITA March 2013 Revision 12 5