Dott.ssa V.Marrè Laboratorio Analisi ASL4 Chiavarese. 23 maggio 2015

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Romeo Gianni
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1 Il laboratorio fra Panel e Ricombinanti Dott.ssa V.Marrè Laboratorio Analisi ASL4 Chiavarese Rinite allergica MA non solo : dalla sindrome Orale Allergica all Anafilassi 23 maggio

2 Diagnostica allergologica Anamnesi Esame Obiettivo SPT o dosaggio IgEs verso fonti allergeniche in toto 2

3 La diagnostica molecolare (CRD) Permette di evidenziare le sensibilizzazioni verso le singole componenti cioè le molecole che costituiscono la fonte allergenica. è una diagnostica di terzo livello si colloca come approfondimento di quanto rilevato con i Prick e il RAST non mette in luce nuove sensibilizzazioni ma chiarisce il significato clinico di quanto già emerso nelle fase diagnostiche precedenti fornendo informazioni prognostiche 3

è una diagnostica di terzo livello si colloca come approfondimento di quanto rilevato con i Prick e il RAST

4 Fonte allergenica Indica il contenitore materiale degli allergeni, ad es. : la parietaria, l uovo, sono fonti allergeniche, Gli estratti allergenici comunemente impiegati perla diagnostica in vivo e in vitro, provengono da fonti allergeniche e contengono sia gli allergeni responsabili della sensibilizzazione che altre sostanze e proteine Gli allergeni sono proteine, glicoproteine o apteni coniugati a carrier, con peso molecolare tra 5 e 150 kda, e punto isoelettrico compreso tra

e in vitro, provengono da fonti allergeniche e contengono sia gli allergeni responsabili della sensibilizzazione che altre

5 EPITOPI Gli Epitopi sono la porzione di allergene effettivamente riconosciuta e legata da un anticorpo specifico. Gli Epitopi possono essere lineari o conformazionali lineari : aminoacidi in sequenza, contigui e presenti sulla struttura primaria dell allergene, solitamente termo- e gastro- resistenti conformazionali : aminoacidi non in sequenza, non contigui, distanti tra loro ma che a causa del ripiegamento della catena proteica possono diventare contigui, solitamente termo- e gastro- labili 5

primaria dell allergene, solitamente termo- e gastro- resistenti conformazionali : aminoacidi non in sequenza, non contigui,

6 Dalla Fonte allergenica alle molecole Genuine Panallergeni 6

7 ALLERGENI GENUINI PANALLERGENI veri marcatori di una determinata fonte (es. Ole e 1 è la proteina marcatrice dell allergia al polline dell olivo e delle altre Oleaceae) proteine condivise da fonti allergeniche anche tassono- micamente tra loro non correlate, responsabili di apparenti polisensibilizzazioni ai test eseguiti con estratti 7

Oleaceae) proteine condivise da fonti allergeniche anche tassono- micamente tra loro

8 IUIS Nomenclatura WHO Phl p 1 Genere Specie Cronologia 8

9 9

10 I panallergeni inalanti sono : Profiline CBP (Calcium binding protein o Polcalcine) Crossreactive Carbohydrate Determinants (CCD) 10

11 Componenti Molecolari - Graminacee Phleum pratense CROSS REATTIVE SPECIFICHE Phl p1 Phl p5 Indicazioni per ITS Phl p12 PROFILINA Pollini, alimenti Phl p2 Alberi, graminacee, erbe, frutta di origine vegetale, noci, spezie, latice Phl p4 Phl p6 Phl p11 Phl p7 CBP Pollini alberi, graminacee, erbe 11

alimenti Phl p2 Alberi, graminacee, erbe, frutta di origine vegetale,

12 Allergia Molecolare - Parietaria Parietaria 83 % Par j 2 Par j 3 PROFILINA Genuine Par j 4 CBP Pollini, alberi, erbe, 12

13 La diagnostica molecolare (CRD) Miglioramento nel profilo diagnostico Maggiori informazioni sulle poli-sensibilizzazioni (distinzione tra co-sensibilizzazione e co-riconoscimento) Ruolo decisionale nell ambito della ITS 13

14 CO-SENSIBILIZZAZIONE: Polisensibilizzazione presenza di IgE dirette verso epitopi distinti e unici presenti in fonti allergeniche diverse (molecole allergeniche genuine) CO-RICONOSCIMENTO (cross-reattività): presenza di IgE verso molecole omologhe presenti in fonti allergeniche diverse (panallergeni) 14

allergeniche genuine) CO-RICONOSCIMENTO (cross-reattività): presenza di IgE

15 Selezione dei pazienti da avviare alla ITS Birch Timothy Mugwort 15

16 ..o di cross-reattività? Mugwort Birch Timothy 16

17 Componenti genuine Phl p 1 Phl p 5 Art v 1 Indicazione per ITS Bet v 1 17

18 Componenti cross-reative Phl p 1 Phl p 5 Profilin Polcalcin Phl p 12 Phl p 7 Art v 1 Art v 4 Art v 5 Bet v 1 Bet v 2 Bet v 4 18

19 La Diagnostica Molecolare nell Allergia Alimentare Valutazione del rischio di gravità della reazione Spiegazione delle cross reattività sulla base della positività ai panallergeni Capacità di stabilire le norme di prevenzione 19

Spiegazione delle cross reattività sulla base della

20 I panallergeni alimentari sono : Profiline (Bet v2 omologhe) PR10 (Bet v1 omologhe) LTP (Lipid Transfer Protein) SSD (Seed Storage Protein) CCD (Cross-reactive Carbohydrate Determinants) 20

21 Risk assessment 21

22 Stabilità delle proteine Proteine Labili Proteine Stabili Reazioni locali Reazioni sistemiche 22

p4 Asero R J Allergy Clin Immunol 2003;112:427-32, Asero R, Int Arch

23 Componenti Molecolari Origine vegetale Frutta fresca Pesca Mela Kiwi Sedano PR 10 Pru p1 Mal d1 Act d8 Api g1 LTP Pru p3 Mal d3 Profilina Pru p4 Asero R J Allergy Clin Immunol 2003;112:427-32, Asero R, Int Arch Allergy Immunol 2005;138:1-11, Sicherer S, J Allergy Clin Immunol 2001;108:

24 Componenti Molecolari Origine vegetale Frutta secca Nocciola Arachide Noce brasiliana Noce Anacardo PR 10 Cor a1 Ara h8 LTP Cor a8 Ara h9 Jug r3 Proteine di deposito Cor a9 Cor a14 Ara h1 Ara h2 Ara h3 Ber e1 Jug r1 X-reattività con nocciolo americano Ana o3 X-reattività con pistacchio Anderson K. Allergy 2007;62: , Flinterman A.E. J Allergy Clin Immunol. 2008;121: , Flinterman A.E. Curr Opin Allergy Clin Immunol 2008;8:261-5, Pastorello E.A.. J Allergy Clin Immunol 2002;109:563-70, Schocker F. J Allergy Clin Immunol 2004;113:

25 GASTROPANEL 25

26 Dispepsia La prevalenza della dispepsia è del 20-40% nella popolazione aperta La dispepsia non è un sintomo specifico La diagnosi corretta non è possibile basandosi solo sui sintomi La gastroscopia con biopsia è ad oggi l unico iter diagnostico 26

27 Il test GastroPanel è nato per rispondere all esigenza di disporre di un esame semplice e non invasivo che sostituisse la gastroscopia. Nel GastroPanel vengono determinate, in un campione di sangue, le concentrazioni di quattro marcatori biologici: pepsinogeno I (PGI), pepsinogeno II (PGII), gastrina-17b (G17b) anticorpi anti-helicobacter pylori. 27

28 GastroPanel Examination Pepsinogen I or Pepsinogen I /II - biomarkers of corpus (oxyntic mucosa) Gastrin biomarker of antrum (antral G cells) H.pylori antibodies - biomarker of gastritis Pylorus Esophagus Corpus Antrum 28

29 fondo corpo antro Il Pepsinogeno I è il precursore dell' enzima pepsina; è prodotto dalle cellule della zona "alta" dello stomaco). Esiste una correlazione tra la perdita di queste cellule provocata dall'atrofia gastrica e il livello di pepsinogeno I Il Pepsinogeno II è prodotto dall'intero stomaco e dal duodeno. Il rapporto tra PGI e PGII permette di stabilire la zona dello stomaco affetta dalla patologia. 29

30 fondo corpo antro La GASTRINA è un ormone prodotto dalle cellule della parte bassa dello stomaco e la sua liberazione è regolata da un meccanismo a feed-back negativo rispetto ai livelli del ph gastrico e dei pepsinogeni 30

31 31

32 L'INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI La valutazione dei risultati viene eseguita mediante un software appositamente messo a punto per la valutazione dei dati. Il GastroSoft fornisce una diagnosi di possibile infezione da Helicobacter Pylori e di gastrite atrofica; inoltre, determina i fattori di rischio per una degenerazione neoplastica, o per l'ulcera peptica. 32

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35 Utilizzo gastropanel L utilizzo della sierologia rappresenta un mezzo per l appropriatezza prescrittiva dell EGDS? Possiamo screenare i pazienti ad alto rischio di G.C.A. mediante la sierologia? I pepsinogeni sierici rappresentano un indice del tipo grado e stadio delle gastriti? I pepsinogeni hanno un valore prognostico nello sviluppo del cancro gastrico? È possibile tramite la sierologia identificare quali anziani gastroproteggere dall assunzione di farmaci gastrolesivi? la sierologia è utilizzabile nella diagnostica della malattia da reflusso gastroesofageo (MRGE)? 35

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40 Grazie per l attenzione 40

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