Il sangue. (un tessuto liquido)
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- Bartolomeo Mori
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1 Il sangue (un tessuto liquido)
2 Il sangue è un tessuto liquido circolante all interno di vasi (tempo di circolazione alcuni minuti; velocità di flusso: aorta 25cm/sec; capillari: 0.2 mm/sec); lunghezza complessiva dei vasi più di 2 volte la circonferenza della terra Un adulto contiene dai 4.5 ai 6 litri di sangue in rapporto al peso corporeo (circa 8% del peso corporeo) 8:100=x:70 X=5.6 l Più di 50 parametri possono essere misurati a scopo diagnostico in un campione di sangue
3 Il sangue e la linfa sono due tessuti connettivi liquidi
4 Al di fuori dei vasi il sangue coagula La coagulazione del sangue ha lo scopo di impedire emorragie in caso di rottura dei vasi
5 Funzioni del sangue Trasporto di sostanze nutritive dall intestino ai tessuti Trasporto di sostanze di rifiuto dai tessuti agli organi destinati ad eliminarle Trasporto di molecole segnale (ormoni) e ioni Trasporto di O 2 e CO 2 mediante eritrociti Trasporto di globuli bianchi Mantenimento della temperatura corporea e della pressione osmotica dei liquidi tissutali
6 Eelementi corpuscolati (ematocrito) Composizione Plasma (55%) Cellule o elementi corpuscolati (45%) globuli bianchi e piastrine <1% 55% plasma sangue reso non coagulabile (buffy coat) globuli rossi > 99% 45%
7 Plasma E la sostanza intercellulare liquida del sangue Dopo la coagulazione del sangue e la perdita del coagulo il plasma diventa siero plasma coagulazione siero
8 Se si lascia coagulare il sangue, si ottiene il siero
9 Composizione del plasma 7% 2% 91% Acqua Proteine Sali Proteine del sangue: Albumine, Globuline, Proteine della coagulazione, Proteine del complemento, Lipoproteine
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11 Gli elementi corpuscolati del sangue Globuli rossi Piastrine Globuli bianchi Colorazione Romanowski SEM
12 Lo striscio di sangue è il modo più semplice per identificare le cellule del sangue fissazione colorazione: Giemsa, May-Grunvald, Romanowski
13 GLOBULI ROSSI (emazie o eritrociti) Non sono vere cellule in quanto non hanno nucleo e organelli citoplasmatici (solo citoscheletro di membrana): possiedono però un plasmalemma ben strutturato Hanno una forma biconcava Possono essere paragonati a sacchetti di membrana deformabili riempiti di emoglobina Si formano nel midollo osseo e in circolo vivono circa 4 mesi
14 Dimensioni Variazioni delle dimensioni (anisocitosi): microciti o macrociti 7 m in diametro 1-3 m in spessore 7 m 1-3 m Una tipica microcitemia è la talassemia mediterranea
15 Eritrociti (TEM)
16 Numero 5 milioni/mm 3 o l nei maschi 4 milioni/mm 3 o l nelle femmine Circa in 1 litro di sangue (mille miliardi)
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18 Analizzatore ematologico computerizzato
19 Funzione dei globuli rossi Trasportano ossigeno dai polmoni ai tessuti e anidride carbonica dai tessuti ai polmoni
20 L emoglobina (Hb): PM è una proteina formata da 4 catene polipeptidiche (2 alfa e 2 beta) e 4 gruppi eme contenenti Fe; ogni GR contiene in media 250 milioni di molecole di emoglobina
21 Il trasporto della CO 2 nel sangue Il 23% viene legata all emoglobina dei GR (non all eme) Il 70% viene trasportata come ione bicarbonato (HCO 3- ) nel plasma Il 7% libera nel plasma banda 3 libera CA=anidrasi carbonica Il bicarbonato si forma ad opera dell enzima anidrasi carbonica (CA) presente nei GR [legato al plasmalemma (CA-IV) o alla proteina di membrana banda-3 (CA-II) nel versante citoplasmatico]
22 La forma biconcava del globulo rosso è fondamentale per la sua funzione Dipende dall organizzazione del citoscheletro della membrana plasmatica Pur mantenendo la forma biconcava i GR sono elastici
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24 Il mantenimento dei valori normali del numero del GRs e della concentrazione di Hb si basa sull equilibrio dinamico tra loro produzione e distruzione I GRs sono prodotti nel midollo osseo (eritropoiesi) ed eliminati (emolisi) nella milza e nel fegato
25 Emolisi (eritrocataresi) I GR vivono in media 120 giorni I GR invecchiati perdono elasticità del plasmalemma e vengono eliminati nella milza Altri cambiamenti di proteine (Banda3) e oligosaccaridi (NANA) del plasmalemma vengono riconosciuti dai macrofagi del fegato (cellule di Kupffer) che eliminano i GR macrofago invecchiamento
26 ANEMIE Diminuzione della concentrazione di Hb nel sangue (meno di 125 mg/ml uomo e 115 mg/ml donna): 1. diminuita produzione di Hb e/o GRs; 2. aumentata emolisi dei GRs Aumentata emolisi dei GR (anemie emolitiche) Malaria P.falciparum
27 ERITROCITI ECHINOCITI Difetti del citoscheletro di membrana POICHILOCITI
28 Difetti del citoscheletro di membrana
29 via dei pentosi ENZIMOPATIE Quando G6PD è scarso non bisogna mangiare fave FAVISMO G6PD NADPH è fondamentale per eliminare i perossidi emolisi per stess ossidativo
30 Emoglobinopatie: anemia falciforme, è dovuta a una mutazione puntiforme nel gene della catena beta dell Hb (DNA: adenina sostituita dalla timina) che causa sostituzione del glutammato in valina
31 Sickle hemoglobin exists as isolated units in the red cells when they have oxygen bound. When sickle hemoglobin releases oxygen in the peripheral tissues, however, the molecules tend to stick together and form long chains or polymers. These rigid polymers distort the cell and cause it to bend out of shape.
32 I gruppi sanguigni La presenza di zuccheri (oligosaccaridi) diversi sulla membrana dei GR è responsabile dei gruppi sanguigni: A, B, AB e O
33 Nei GR alcuni oligosaccaridi della mp determinano i gruppi sanguigni A, B, AB e O GRUPPO O GRUPPO A GRUPPO B
34 GLOBULI BIANCHI o leucociti 7-10x10 3 / l (maschi), 4-6x10 3 / l (femmine) Due classi: granulociti (neutrofili, eosinofili, basofili) e agranulociti (linfociti, monociti)
35 percentuale Formula leucocitaria (adulto) Never let monkey eat bananas
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37 Le funzioni di tutti i leucociti nelle risposte immunitarie comportano interazioni reciproche e coinvolgono di norma macrofagi e mastociti Eosinofili Linfociti Macrofagi Mastociti Basofili Neutrofili
38 I leucociti migrano nei tessuti connettivi passando attraverso la parete dei capillari o più frequentemente delle venule postcapillari (diapedesi)
39 Molecole coinvolte nell adesione e nella diapedesi di un leucocita diapedesi Adesione
40 Neutrofili 50-70% dei globuli bianchi si formano nel midollo osseo e vivono circa 6 ore nel sangue e 1-3 gg nei tessuti forma: tonda diametro: 9-15 m nucleo polilobato (3-5 lobi) granuli nel citoplasma poco colorabili
41 bacchetta di tamburo (cromatina sessuale del cromosoma X inattivo) Neutrofili al MO
42 Neutrofilo al TEM granuli secondari (granuli specifici) lattoferrina gelatinasi Lisosomi (MPO) lisoszima fagocitina fosfatasi alcalina catalasi granuli terziari granuli primari (azzurrofili) (10-20%) granuli primari (azzurrofili) granuli specifici granuli secondari (80%) granuli terziari (5-10%)
43 Funzioni Uccidono i batteri: 1. fagocitando è distruggendo il fagocitato mediante il contenuto dei granuli (effetto kamikaze ) 2. effetto spiderman
44 Fagocitosi
45 Respiratory burst Esplosione respiratoria nel citoplasma del neutrofilo Cl - granuli II gelatinasi lattoferrina granuli III 1 O 2 Distruzione di un batterio fagocitato: produzione di O 2, superossidi (H 2 O 2 ) e acidi (ipocloroso e ipoclorito), contenuto dei granuli II e III
46 Effetto Kamikaze: rilascio dei granuli (degranulazione) e morte di un neutrofilo con formazione del pus In , Friedrich Miescher first isolated DNA from pus and called this substance nuclein which was rich in phosphorus but lacked sulfur
47 Effetto spiderman il NET (Neutrophil Extracellular Trap) è stimolato dai ROS in particolare H 2 O 2 prodotto dai batteri; i batteri vengono uccisi dall esocitosi dei granuli NON SEMPRE FAGOCITOSI NET Neutrofilo Può avvenire con morte del neutrofilo (cromatina+proteine dei granuli) o lasciare la cellula intatta (DNA mitocondriale+ proteine dei granuli)
48 Eosinofili 1-6% dei globuli bianchi si formano nel midollo osseo e vivono circa 18 ore nel sangue e 8-12 gg nei tessuti forma: tonda diametro: m nucleo bilobato granuli nel citoplasma colorabili con coloranti acidi
49 Eosinofili al MO
50 Eosinofilo al TEM Major basic protein (PRG2 o MBP): a potent enzyme against helminths and is toxic towards bacteria and mammalian cells in vitro. causes the release of histamine from mast cells and basophils, activates neutrophils and alveolar macrophages is mplicated in epithelial cell damage, and bronchospasm in asthma. Perossidasi Proteina maggiore basica Fosfatasi acida granuli specifici lisosomi granuli primari
51 Gli eosinofili possono essere attivati da una varietà di stimoli nell ambito di processi infiammatori: interleuchine (IL-3, IL-5), citochine (CSF), recettori Toll-like, recettorixige.
52 Eosinofili: funzioni Svolgono molte delle loro funzioni nei tessuti connettivi: Uccisione parassiti (soprattutto elminti o vermi intestinali) Fagocitosi complessi antigene-anticorpo Partecipano alle allergie (possiedono recettori xige) rilasciando numerose molecole con cui modulano l attività di mastociti (spengono processi infiammatori) Possono agire da APC
53 EOSINOFILO Complessi antigene/ anticorpo M Mastocita
54 Basofili 0.1-1% dei globuli bianchi si formano nel midollo osseo e vivono ore o giorni nel sangue (più a lungo degli altri granulociti) forma: tonda diametro: m nucleo bilobato pochi granuli nel citoplasma colorabili con coloranti basici
55 Basofilo al MO
56 Basofilo al TEM granuli primari lisosomi Istamina Eparina granuli specifici
57 Funzioni dei basofili Intervengono nelle infiammazioni rilasciando istamina e eparina e prostaglandine Partecipano alle allergie
58 I basofili possono essere attivati da una varietà di stimolazioni: interleuchine (IL5, IL6), citochine (SCF), IgE. IL3 IL5 S CF I basofili attivati esprimono marcatori (CD63, CD203c, CD300a, P- p38) che sono utilizzati nei tests allergici
59 Eosinofilo Basofilo Mastocito Eosinofili, basofili e mastociti interagiscono e collaborano tra loro durante allergie e infiammazioni
60 Monociti 2-8% dei globuli bianchi si formano nel midollo osseo forma: tonda diametro: m nucleo reniforme differenziano in vari tipi di macrofagi
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62 Linfociti del sangue 20-30% dei globuli bianchi In base alle dimensioni si dividono in piccoli (90%, diametro 6-8 m, grande nucleo tondo eterocromatico e scarso citoplasma) e grandi (10%, diametro 9-15 m) In base alle funzioni si classificano in linfociti B, T e NK (+ NKT)
63 I linfociti T e B sono morfologicamente indistinguibili, ma possono essere identificati con tests funzionali ( i linfociti B producono anticorpi, i T no) o anticorpi specifici. I linfociti B sono circa il 10-15% del linfociti del sangue; T sono l 80-90%; NK sono 5-20% Linfociti T e B (cerchiati) del sangue
64 Linfocita al TEM lipidi
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66 Concetti base sui linfociti B e T I linfociti B e T costituiscono le cellule più importanti dell immunità acquisita I linfociti si formano e maturano negli organi linfoidi primari (midollo osseo: si formano i linfociti B e T e maturano i linfociti B; timo: maturano i linfociti T) I linfociti risiedono e vengono attivati negli organi linfoidi secondari (linfonodi, milza, tonsille, placche di Peyer) I linfociti circolano nel sangue
67 organo linfoide secondario vaso sanguigno o linfatico circolazione di un linfocita I linfociti del sangue si formano nel midollo osseo; i linfociti T maturano nel timo (organi linfoidi primari); la maggior parte dei linfociti risiede negli organi linfoidi secondari (linfonodi, milza, tonsille, MALT) e circola (specie i T) nel corpo attraverso il sangue e la linfa
68 PIASTRINE o trombociti (thrombos=grumo) Non sono delle vere cellule, in quanto non hanno nucleo; sono frammenti di citoplasma con pochi organelli Numero: 1-4x10 5 / l Durata di vita circa 1 settimana Scoperte nel 1800 da Giulio Bizzozzero
69 cromomero singola piastrina ialomero
70 Forma e Dimensioni Discoidale quando circolano, sferica con prolungamenti quando formano il tappo emostatico Dimensione 2-3 m
71 Lisosomi (granuli lambda) granuli densi o delta (cromomero) granuli alfa
72 Organelli di una piastrina Fascio di microtubuli Sistema canalicolare REL Mitocondri Glicogeno Granuli rivestiti da membrana derivano dal plasmalemma e servono all esocitosi dei granuli alfa e delta GRANULI Granuli alfa (IGF-1, PDGF, TGFbeta, vwf, FN, PAF, TxA2, fattore di coagulazione V) Granuli delta (granuli o corpi densi; ADP, ATP, Ca2+, serotonina) Granuli lambda (lisosomi)
73 Granuli densi Granuli densi (delta) REL Lisosomi (lambda) REL Granuli glicogeno Microtubuli Sistema canalicolare
74 Funzione Intervengono nei processi di riparazione delle lesioni della parete dei vasi e nella coagulazione del sangue. 1. formano tappo emostatico, 2. rilasciano contenuto granuli, 3. espongono sulla loro membrana molecole necessarie all attivazione di fattori di coagulazione del plasma (es. trombina). trombina Tappo piastrinico+coagulo= trombo
75 1. Adesione al collageno (integrina alfa2beta1, glicoproteina GPVI e complesso recettoriale Ib/IX/V+vWF) PAF TxA2 COX-1 PG-H2 TxA2 2. Esocitosi granuli alfa e delta (fattore V, TxA2, ADP, PAF[induce la sintesi di TxA2 e ADP]: TxA2+ADP inducono recettore IIa/IIIb o integrina alfaiiib-beta3 (potente fattore di aggregazione delle piastrine mediante fibrinogeno) Recettore IIB/IIIA fosfolipidi ADP Fattore V filamenti di fibrina 3. Esposizione fosfolipidi di membrana a carica negativa e recettore trombina (necessari alla via intrinseca e all attivazione della trombina) 4. Aggregazione delle piastrine e formazione del trombo
76 Adesione ed aggregazione delle piastrine
77 13 molecole o fattori di coagulazione piastrine (fattore V: è anche presente nel sangue)
78 (Fattore III) Ca ++ fosfolipidi VIII (Fattore IV) via comune piastrine (Fattore VI) La coagulazione può iniziare in due modi: via intrinseca (tutti i fattori partecipanti sono presenti nel sangue), la coagulazione comincia con il contatto del fattore XII con superfici cariche negativamente (per es. il vetro). via estrinseca la tromboplastina o fattore tissutale (TF) viene resa disponibile al fattore VII circolante. Le due vie convergono nella via comune: attivazione del fattore X, trombina, fibrina. (Fattore I) (Fattore II) Rimozione del coagulo
79 Un aggregato di piastrine (trombo) si può formare anche in circolo indipendentemente dalla rottura di un vaso per ragioni fisiologiche o patologiche (placca ateromatosa), normalmente questo viene rimosso dal plasminogeno senza provocare danno
80 Antiaggreganti e anticoagulanti piastrinici fosfolipidi 1 PG-H2
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