Diagnostica Epatiti, percorso appropriato

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1 Elementi basilari di Medicina Trasfusionale e di Laboratorio Elementi basilari di Medicina Trasfusionale e di Laboratorio - Rimini 9 ottobre 2012 Diagnostica Epatiti, percorso appropriato le Epatiti Virali Simona Semprini U.O. Microbiologia Laboratorio Unico AVR

2 Epatite Processo infiammatorio a carico del fegato istologicamente caratterizzato da necrosi parenchimale ed infiltrazione flogistica. Cause: Infezioni ( batteri, protozoi, virus ) fenomeni autoimmuni cause tossiche ( alcool, farmaci ) etc Epatiti Virali Causate da virus primitivamente epatotropi

3 Caratteristiche dei virus epatitici HBV HCV HDV HEV Famiglia Picornaviridae Hepadnaviridae Flaviviridae satelliti Caliciviridae Dimensioni nm 42 nm nm 36 nm nm Envelope No Si Si No No Forma Icosaedrica Sferica Sferica Sferica Sferica Genoma ssrna dsdna ssrna Sierotipi/ Genotipi Fonte ssrna circolare ssrna 1 sierotipo 8 genotipi 6 genotipi 3 genotipi 3 genotipi Feci Sangue Fluidi corporei Sangue Fluidi corporei Sangue Fluidi corporei Feci

4 Quadri clinici Trasmissione Periodo d incubazione HAV HBV HCV HDV HEV Oro-fecale Sessuale Parenterale Sessuale Perinatale Parenterale Sessuale Perinatale Parenterale Sessuale Oro-fecale gg gg gg gg gg Epatite acuta SI SI SI (rara) SI SI Epatite cronica No SI SI SI No? HCC No SI SI SI No? Mortalità < 0.5% 1% - 2% 1-5% 4% Generale < 0.5% Gravide 20% Profilassi Vaccino/ Ig Vaccino/Ig No ( HBV ) Vaccino?

5 Epatite ACUTA danno improvviso con aumento significativo delle transaminasi ( dieci volte il limite superiore). Italia Laboratory Guidelines for Screening, Diagnosis and Monitoring of Hepatic Injury - NACB % Epatite A 24 % Epatite B 8 % Epatite C 1 % Epatite Delta 8 % altro

6 Epatite CRONICA ( in assenza di biopsia ): persistenza di ALT elevate per oltre 6 mesi dopo episodio acuto; riscontro di ALT elevate in più di un occasione per un periodo di oltre 6 mesi. Italia 63 % HCV 9 % HBV 1,5% HBV+HCV 26,5% altro Laboratory Guidelines for Screening, Diagnosis and Monitoring of Hepatic Injury - NACB 2000

7 Epatite A : marcatori IgM : presenti all insorgenza dei sintomi persistono per qualche mese IgG : presenti già nella fase acuta di malattia persistono per tutta la vita e sono protettive

8 Epatite B: il virus HBV (HBeAg) Mutazioni gene S e gene C

9 Epatite Acuta B: marcatori HBsAg : primo marcatore a comparire HBeAg : indice di attiva replicazione virale Anti-HBc IgM: presenti a titolo elevato nella fase acuta di malattia Anti-HBc IgG: già presenti nella fase acuta di malattia e persistono per tutta la vita

10 Epatite Acuta: richiesta su DNWEB

11 Evoluzione Epatite B: marcatori > 6 mesi Sieroconversione HBeAg/anti-HBe Sieroconversione HBsAg/anti-HBs

12 EPATITE B: diagnosi di epatite cronica Sospetta Epatite CRONICA da HBV HBs Ag Se positivo, primo riscontro il laboratorio ricerca HBeAg La positività di HBsAg è indice di infezione da HBV. Per confermare la diagnosi di Epatite B cronica occorre studiare l evoluzione del quadro sierologico

13 Epatite Cronica B: marcatori Acute (6 months) HBeAg Chronic (Years) HBsAg anti-hbe Titer Total anti- HBc Mutanti pre-core ( e minus): non sintetizzano HBeAg IgM anti-hbc Years Weeks after Exposure

14 Monitoraggio Epatite Cronica B

15 Polimerase Chain Reaction quantitativa real-time

16 Monitoraggio Epatite Cronica B: DNWEB Malattie Infettive, Medicina I, Medicina II, Diabetologia, Gastroenterologia

17 Monitoraggio Epatite Cronica B: DNWEB Modulo

18 Modulo raccolta dati

19 HBsAg Quantitativo levels Probabilità di controllo immunologico sostenuto HBsAg HBsAg HBV-DNA HBsAg Baseline Week 12 Week 24 Week 48 time

20 Valutazione dello Stato Immunitario Epatite A Epatite B

21 Epatite B: quadri sierologici

22 Epatite B: quadri sierologici Epatite in fase di risoluzione Infezione occulta da HBV Replicazione persistente di HBV cccdna negli epatociti infetti Anti-HBc isolato Aspecificità del test

23 Titer Epatite Acuta C: marcatori Symptoms +/- HCV RNA HCV Ab Rilevabili mediamente a 12 settimane dall infezione ALT X Normal Modulo Years Months Time after Exposure

24 Epatite Cronica C: marcatori

25 Epatite Cronica: diagnosi differenziale X X

26 Ricerca anticorpi anti-hcv 1. Test di SCREENING: ELISA, MEIA, CIA, CMIA Per ogni metodica commerciale si possono individuare specifici valori di S/CO in grado di predire la positività nel 95% dei casi ( Guidelines for Laboratory Testing and Risult Reporting of Antibody to Hepatitis C Virus - CDC )

27 Ricerca anticorpi anti-hcv 2. Test di CONFERMA: Immunoblot, RIBA Controllo livello III C 100 C 33 C 22 NS5 hsod Controllo livello I Positivo Indeterminato Negativo

28 Ricerca anticorpi anti-hcv in AVR Anti-HCV ADVIA Centaur Negativo? NO SI REFERTO REFERTO Anti-HCV ORTHO Vitros RIBA NO S/CO > 8.0? SI REFERTO

29 Ripetizione Test Sierologico?

30 Epatite Cronica C: test molecolari Metodica REAL-TIME

31 Genotipi HCV 1a, 1b, 1c 2a, 2b, 2c, 2d 3a,3b, 3c, 3d, 3e, 3f, 3g 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g 5a 6a, 6b Genotipi diversi rispondono diversamente alla terapia

32 Monitoraggio Epatite Cronica C: DNWEB Richiedere una sola volta Modulo

33 Screening per HCV

34 Epatite Delta HDVAg HBsAg RNA

35 Titer Epatite DELTA ad evoluzione favorevole Symptoms ALT Elevated IgM anti-hdv anti-hbs HDV RNA HBsAg IgG anti-hdv Time after Exposure

36 Titer Epatite Cronica DELTA: marcatori Jaundice Symptoms ALT IgG anti-hdv HBsAg HDV RNA X X IgM anti-hdv Time after Exposure

37 Distribuzione Geografica dell Epatite E Hepatitis Source: CDC IgM

38 Epatite E: marcatori sierologici IgM: presenti all insorgere dei sintomi persistono per 3-4 mesi IgG: presenti all insorgere dei sintomi persistenza?

39 Epatite E: richiesta su DNWEB

40 Marcatori in Gravidanza Bollettino Ufficiale della Regione Emilia-Romagna Parte Seconda n Allegato n.3 Bollettino Ufficiale della Regione Emilia-Romagna Parte Seconda n Allegato n.3 X X X

41 Sierologia - Biologia Molecolare AVR Dott.ssa Patrizia Billi pbilli@ausl-cesena.emr.it Dott.ssa Mara Della Strada Dott.ssa Patrizia Farabegoli Dott.ssa Simona Semprini mdstrada@ausl-cesena.emr.it pfarabegoli@ausl-cesena.emr.it ssemprini@ausl-cesena.emr.it Sara Bertozzi Bonetti Barbara Ceccarelli Manuela Coltraro Mario Dolci Katia Garoia Patrizia Guiducci Barbara Marchini Lorella Mazzotti Daniela Persano Rosario Romano Vilma Sternini Carmen Vulcano Cinzia Arlotti Barbara Dalmo Berdondini Lisa