ISTRUZIONE OPERATIVA CAMPIONAMENTO DEGLI EMOCOMPONENTI PER I CONTROLLI DI QUALITA REDAZIONE, RESPONSABILE I.O., VERIFICA, APPROVAZIONE
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1 REDAZIONE, RESPONSABILE I.O., VERIFICA, APPROVAZIONE REDAZIONE APPROVAZIONE Claudia Ferocino TSLB; Dr.ssa Giuseppina Portararo Dirigente Biologo EMISSIONE Dott.ssa Francesca Tanzi Responsabile Qualità Servizio Immunoematologia e STATO DELLE REVISIONI REV. N. SEZIONI REVISIONATE MOTIVAZIONE DELLA REVISIONE DATA 0 Prima stesura 31/01/ Tutte Aggiornamento 09/04/2015 ELENCO ALLEGATI ALL. N. Codice DESCRIZIONE ALLEGATO REV. N. Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 1 di 7
2 SOMMARIO REDAZIONE, RESPONSABILE I.O., VERIFICA, APPROVAZIONE... 1 ISTRUZIONE OPERATIVA... 1 CAMPIONAMENTO EMAZIE-PLASMA-PIASTRINE PER L'ESECUZIONE DEI CQ SCOPO/OBIETTIVO CAMPO DI APPLICAZIONE LUOGO DI APPLICAZIONE RIFERIMENTI NORMATIVI E DOCUMENTALI ABBREVIAZIONI, DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA MODALITA' OPERATIVE EMAZIE CONCENTRATE CON RIMOZIONE DI BUFFY-COAT IN SAG-MANNITOLO CONCENTRATI PIASTRINICI DA POOL DI BUFFY-COAT E DA AFERESI: Concentrati Piastrinici da Pool di b.c Registrazione dati CQ di piastrinoaferesi e Pool di buffy-coat Concentrati Piastrinici da Aferesi DETERMINAZIONE DEL FVIIIC NEL PLASMA FRESCO CONGELATO CONTROLLO DI STERILITA'..8 Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 2 di 7
3 1. SCOPO/OBIETTIVO Lo scopo del campionamento è di uniformare e pianificare le modalità operative per l'esecuzione dei controlli di qualità 2. CAMPO DI APPLICAZIONE Il campionamento è applicabile agli emocomponenti che devono essere sottoposti al controllo di qualita 3. LUOGO DI APPLICAZIONE OSPEDALE /DIPARTIMENTO/U.O./SERVIZIO AZIENDA OSPEDALIERO-UNIVERSITARIA DI PARMA DIP. DIAGNOSTICO IMMUNOEMATOLOGIA E MEDICINA TRASFUSIONALE LAVORAZIONE EMOCOMPONENTI (stanza 007) 4. RIFERIMENTI NORMATIVI E DOCUMENTALI Autore Titolo Data D.M Protocolli per l accertamento della idoneità del donatore di sangue e di emocomponenti 3 marzo 2005 D.M Caratteristiche e modalità per la donazione del sangue e di emocomponenti 3 marzo 2005 R(95)15 Preparazione, uso e garanzia di qualità degli emocomponenti 12/10/1995 European Directorate for the Guide to the preparation, use and qualità assurance of blood components quality of medicines and R(95)15 Healt Care of the council of Europe SIMTI Standard di medicina trasfusionale 2^ Ed. Giugno 2010 SIMTI Raccomandazioni SIMTI sul corretto utilizzo degli emocomponenti e dei plasmaderivati Settembre 2008 Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 3 di 7
4 5. ABBREVIAZIONI, DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA ABBREVIAZIONI TSLB Tecnico Sanitario di Laboratorio Biomedico CQ Controllo Qualità BC Buffy Coat DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA K2 EDTA Dipotassium Ethylenediaminetetracetato Ht Ematocrito Hb Emoglobina Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 4 di 7
5 6 MODALITA' OPERATIVE 6.1 EMAZIE CONCENTRATE CON RIMOZIONE DI BUFFY-COAT IN SAG-MANNITOLO Si applica a concentrati eritrocitari privi di buffy coat in Sag-M Connettere sterilmente una sacca transfer da 300 ml con la sacca di eritrociti da campionare mediante apparecchio TSCD ; trasferire una piccola aliquota e saldare nel punto di connessione; il campionamento va effettuato dalla sacca transfer, previo stripping ripetuto del tubo utilizzato per il prelievo in modo da miscelarne il contenuto ; tagliare con le forbici l estremita ed eliminare la prima parte del liquido fuoriuscito, quindi riempire adeguatamente una provetta per emocromo con K2EDTA. La provetta va identificata indicando il numero di donazione ed utilizzata per : l'esecuzione dell'esame emocromocitometrico effettuare la misurazione dell Hb extra globulare (emolisi) presente nel sovranatante; va pertanto centrifugata a 3500 rpm per 5 min. il sovranatante separato in un'altra provetta e ricentrifugato a 3500 rpm per 5 min., viene poi raccolto in una provetta dove sara' possibile attribuire il grado di emolisi dal confronto con il comparatore di colore fornito dalla ditta Kedrion. La misurazione della concentrazione di emoglobina totale ed Ht viene effettuata con normale analizzatore ematologico di laboratorio (conta globuli RUBY-ABBOTT). L emoglobina va espressa in g/l e l ematocrito in percentuale (%). Per le emazie irradiate/ filtrate e lavate eseguire la stessa procedura. Per le emazie filtrate pre-storage eseguire la stessa procedura, come sopra, prelevando inoltre dalla stessa provetta 100 µl per effettuare la conta dei leucociti con il citofluorimetro BD FACS CALIBUR. 6.2 CONCENTRATI PIASTRINICI DA POOL DI BUFFY-COAT E DA AFERESI: Concentrati Piastrinici da Pool di B.C. : Al termine della separazione e filtrazione: estrarre l'aria mantenere il segmento collegato al filtro il più lungo possibile saldare lasciare riposare almeno 1 ora pesare la sacca di C.P. impostando la bilancia elettronica con tara 45 strippare il segmento (almeno 5 volte) ed eseguire la tecnica di miscelazione saldare il segmento contenente il concentrato piastrinico tagliare con le forbici l estremita ed eliminare la prima parte del liquido fuoriuscito, quindi riempire adeguatamente una provetta per emocromo La provetta va identificata indicando il numero del C.P. e utilizzata per la misurazione della concentrazione piastrinica totale. Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 5 di 7
6 La misurazione della conta piastrinica viene effettuata con normale analizzatore ematologico di laboratorio (contaglobuli RUBY-ABBOTT). Formula per il Calcolo del Contenuto Piastrinico: volume (ml) = peso netto (gr) 1,03 (fattore di conversione per le piastrine) Contenuto piastrinico x / unità = volume (ml) x conta piastrinica x 10 3 µl Ottenuto il valore del contenuto piastrinico si procede all inserimento dei risultati nel modo seguente: Registrazione dati CQ di Piastrinoaferesi e Pool di buffy-coat Accedere al computer presente nel Settore Emocomponenti con Utente e Password personali: 1. Aprire la cartella TRASFUSIONALE sul desktop 2. Accedere al file Excel FDL CONTA PLT 2015 (il FDL è stato preventivamente impostato con le formule necessarie che diano come risultato il contenuto piastrinico delle unità) 3. Posizionarsi nel foglio elettronico di interesse: CP POOL o CP DA AFERESI 4. Inserire i dati richiesti: o Data di preparazione o N del Pool o Aferesi o Volume in gr (spostandosi con TAB aggiorna il volume in ml) o Conta Piastrinica x 10 3 µl ottenuta dopo l emocromo (spostandosi con TAB aggiorna il contenuto piastrinico x /unità) La domenica, le provette di campionamento dei C.P. da Pool di buffy-coat, vanno poste su un ripiano dell incubatore orizzontale, in agitazione continua, e utilizzate il lunedì mattina per la conta piastrinica. Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 6 di 7
7 Quindi procedere alla stampa delle etichette nel seguente modo: STAMPA ETICHETTE A fine preparazione stampare le etichette da apporre sulle sacche: 1. Accedere al computer, posto in prossimità dei locali tecnici 2. Aprire il file sul desktop CONTENUTO PLT 3. Selezionare la voce STAMPA 4. Si visualizza un anteprima dell etichetta finale dove riportare nelle diverse voci: INSERIRE ID SACCA: il numero dell unità INSERIRE VALORE: il Contenuto Plt x /unità PESO NETTO: il peso netto in gr Stampa Concentrati Piastrinici da Aferesi : La sacca da AFERESI proveniente dalla sala prelievi è così costituita: sacca madre di raccolta e sacche satelliti collegate da un filtro in linea. Aprire il circuito e filtrare Lasciare riposare per almeno 1 ora Togliere l aria dal circuito Saldare il budello di connessione senza il filtro Pesare la sacca di aferesi con tara 45 Riempire la sacca bag per il campionamento, previa agitazione dell emocomponente, con pochi ml di C.P. Identificare una provetta da emocromo riportando il n dell unità Riempire la provetta con il C.P. Eseguire l'esame emocromocitometrico per ottenere la conta piastrinica. Procedere all inserimento dei dati vedi Rif. Registrazione dati CQ di Piastrinoaferesi e Pool di buffy-coat Per la stampa delle etichette da apporre sulle sacche vedi Rif. STAMPA ETICHETTE Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 7 di 7
8 6.3 DETERMINAZIONE DEL FVIIIC E DOSAGGIO DELLE PROTEINE TOTALI NEL PLASMA FRESCO DA SEPARAZIONE DI SANGUE INTERO E DA AFERESI All unità di plasma fresco appena prodotta connettere sterilmente una sacca transfer da 300 ml 1. Prelevare da quest'ultima 3 aliquote (~ 6 ml) in idonee provette ( N 2 tappo trasparente fornite dal laboratorio di ematochimica per il FVIIIC e N 1 tappo rosso da siero per le proteine totali) 2. Eseguire su una provetta tappo trasparente l'esame emocromocitometrico e in seguito inviarla all U.O. di Diagnostica Ematochimica (Sett. Coagulazione) per la determinazione del FVIIIc a T0, secondo proprie metodiche accompagnata da scheda debitamente compilata. 3. congelare la seconda provetta tappo trasparente con la stessa procedura con cui si congelano le unità di plasma; la provetta congelata viene conservata nel medesimo congelatore ove vengono normalmente conservate le unità di plasma sia esse destinate all'utilizzo clinico che all'industria (Cong. L o Z) 4. Inviare all U.O. di Diagnostica Ematochimica (Sett. Chimica Clinica) la provetta tappo rosso per il dosaggio delle proteine totali, accompagnata da scheda debitamente compilata 5. Dopo 6 mesi di conservazione, la seconda provetta tappo trasparente ancora congelata viene inviata al Laboratorio di Coagulazione per la determinazione del FVIIIC a T6, secondo proprie metodiche accompagnata da scheda debitamente compilata. 6.4 CONTROLLI DI STERILITA' Ogni sacca selezionata per i test di sterilità deve essere accompagnata da una scheda multicolor debitamente compilata, indicando: DATA DEL PRELIEVO REPARTO CODICE REPARTO COGNOME: N DONAZIONE NOME DEL RICHIEDENTE ORA DEL PRELIEVO MOTIVAZIONE DELLA PRESCRIZIONE: CONTROLLO DI STERILITA MATERIALE: SANGUE o CONC. PIASTRINICO BATTERIOLOGIA: GENERICA BATTERI e BATTERI ANAEROBI MICOLOGIA: GENERICA MICETI Sacca e scheda vanno messe in un contenitore idoneo di tipo rigido e inviate presso il DIPARTIMENTO DI PATOLOGIA E MEDICINA DI LABORATORIO U.O. di MICROBIOLOGIA. Le sacche inviate a questo scopo se non sono gia state eliminate per i seguenti motivi: sanitari (solo transaminasi e /o emocromo) tecnici (quantita insufficiente e/o eccessiva, residuo pediatrico) controllo qualita (CTC = controllo tampone cutaneo positivo) Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 8 di 7
9 VANNO movimentate informaticamente nel modo seguente: MOVIMENTAZIONE ELIMINAZIONE Selezionare CONTROLLO Bippare il barcode dell'unità In STATO SACCA immettere il CODICE ELIMINAZIONE: 39 (CONTROLLO STERILITA ) cliccare su ELIMINAZIONE E CONFERMA Data 09/04/2015 Rev. 1 Pag. 9 di 7
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