UTILIZZO IN ROUTINE DEL SISTEMA sedimax (A.Menarini Diagnostics) PER LO SCREENING DEI CAMPIONI DI URINA PER URINOCOLTURA. Dr.ssa Maria M.

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1 UTILIZZO IN ROUTINE DEL SISTEMA sedimax (A.Menarini Diagnostics) PER LO SCREENING DEI CAMPIONI DI URINA PER URINOCOLTURA Dr.ssa Maria M. Lleò Per valutare la significatività della carica microbica nelle urine è necessario tener presente le caratteristiche e le condizioni di salute del soggetto/paziente Per la diagnosi delle infezioni urinarie é conveniente utilizzare un sistema di screening che possa essere personalizzato per specifici soggetti e per pazienti a rischio 1

2 PRIMO STUDIO : sono stati selezionati 600 campioni di urina valutati come negativi dal Sedimax sulla base del numero di batteri e leucociti, risultati inferiori alla soglia pre-impostata e sottoposti a: osservazione delle immagini del sedimento fornite da Sedimax valutazione della carica batterica con il metodo colturale standard Cut-off impostati per i campioni positivi: Batteri 65 e < 160 e leucociti 11 or Batteri 170 or leucociti 120 or lieviti >1 100 campioni presentano cariche batteriche uguali o superiori a UFC/ml, di cui: 76% con cariche x10 4 UFC/ml 23% con cariche x10 5 UFC/ml 50% urine con flora mista 2

3 Pseudomonas S. aureus Enterococcus Klebsiella Proteus SAG E. coli Lieviti Flora mista Distribuzione dei 76 campioni con carica x Pseudomonas S. aureus Enterococcus Proteus E. coli Flora mista Distribuzione dei 23 campioni con carica x Altri Ematologia Rianimazione Ginecologia Geriatria Nefrologia Medicine Trapianti Esterni (ambulatorio) Reparti di provenienza ESTERNI (ambulatoriali) TRAPIANTI (soprattutto T. renali) NEFROLOGIA RIANIMAZIONE 3

4 EMATOLOGIA batteri 65 or leucociti 30 or lieviti > 0 NEFROLOGIA e UROLOGIA batteri 50 or leucociti 20 or lieviti > 0 RIANIMAZIONE batteri 50 or leucociti 20 or lieviti > 0 TRAPIANTI RENALI, FEGATO, MIDOLLO batteri 35 or leucociti 20 or lieviti > 0 SECONDO STUDIO : Successivamente alla modifica dei valori soglia sono stati esaminati 129 campioni positivi provenienti dai reparti di Rianimazione, Ematologia, Trapianti e Nefrologia Il 30% dei campioni (39 campioni) sono stati confermati come realmente positivi con cariche batteriche significative all esame colturale. Il 64% di questi campioni veramente positivi presentavano una carica batterica significativa di infezione (25 campioni recuperati ) 4

5 La valutazione delle performance dello strumento viene attualmente condotta in quattro centri, Verona, Rovigo, Legnago e Trento. L obiettivo è valutare la performance del sistema utilizzando protocolli comuni e valori soglia condivisi e diversificati, in riferimento ai particolari tipi di pazienti Ogni centro esamina campioni di urina provenienti da diversi tipi di pazienti (esterni, ospedalizzati, donne in gravidanza, immuno compromessi e trapiantati ) Ogni campione di urina viene analizzato: 1) con l apparecchio Aution Max per quanto riguarda i valori di esterasi e nitriti 2) con lo strumento Sedimax per l analisi di immagine ed il conteggio del numero di globuli rossi, globuli bianchi, batteri e lieviti nel sedimento Aliquote di 10 µl di urina di ogni campione vengono inoculate in terreno Agar cromogeno, Agar sangue e, se segnalati i miceti, agar Sabouraud. Le piastre contenenti i terreni di coltura inoculati vengono incubate a 37 C per 24 ore. La carica batterica (in UFC/ml) viene calcolata/valutata e confrontata con il risultato fornito da Sedimax. Per tutti i campioni risultati negativi con Sedimax ma positivi all esame colturale, vengono fotografate le piastre contenenti le colonie batteriche e archiviate insieme alle immagini del sedimento raccolte con sedimax. Tutti i dati sui campioni esaminati vengono inseriti in uno specifico database. 5

6 Semina manuale SediMAX AutionMAX S e r i e Data Paziente 1 06/02/2 LA N. Accett Sess o Età Reparto Piastra Carica Risultato WBC(pp /μl) M 60 Cardiologia B.Trento AS+CR OM WBC(HP F/pp) BAC(pp/μ L) BAC(pp/ HPF) RBC(pp/ μl) RBC(pp/HPYST(pp/μ F) L) YST(pp/ HPF) Cell.epit eliali(pp/ μl) Cell.epit eliali(pp /HPF) Esterasi NIT NS NEG. 0,46 0,10 43,1 9, ,86 0,20 NEG. UC Gravi da 2 06/02/2 BI F 16 Chir.Ped. B.Roma CROM. NS POS. (dubbio) 2,64 0,60 170,28 38,70 0,46 0, ,56 2,40 NEG. 3 06/02/2 4 06/02/2 5 06/02/2 FA VM BM M 61 Anest.Ter.I nt.neuro. CROM. NS POS. 9,24 2,10 54,58 12,40 29,9 6, NEG. Urocat. F 75 F 81 Nefro. Med. Dermato. B.Trento AS+CR OM CROM. NS (poche colonie Enterococc hi+staphil o.) 1*10⁵ UFC Flora mista NEG. 2,64 0,60 28,18 6,40 15,84 3, ,46 0,10 NEG. POS. 19,34 4, ,32 270,30 0,86 0, ,02 2, Leu/ul 2+ Dati paziente Semina manuale sedimax Aution Max Data Piastra Risultato Esterasi Paziente Carica WBC (pp/μl) NIT N. Accett. WBC (pp/hpf) Sesso Età Reparto UC Gravida BAC (pp/μl) BAC (pp/hpf) RBC (pp/μl) RBC (pp/hpf) YST (pp/μl) YST (pp/hpf) Cell.epiteliali (pp/μl) Cell.epiteliali (pp/hpf) 6

7 DAI RISULTATI OTTENUTI NEL NOSTRO STUDIO PRELIMINARE SI PUO CONCLUDERE CHE : SEDIMAX E UNO STRUMENTO DI SCREENING DELLE URINE PER LA DIAGNOSI DI INFEZIONE URINARIA CHE AUTOMATICAMENTE ELIMINA I CAMPIONI NEGATIVI SENZA SOTTOPORLI ALL ESAME COLTURALE CONSENTE DI VISUALIZZARE IL SEDIMENTO URINARIO PER VALUTARECLA PRESENZA DEI DIVERSI TIPI CELLULARI INTRODUCENDO VALORI SOGLIA DIVERSIFICATI PUO ESSERE PERSONALIZZATO PER I DIVERSI TIPI DI PAZIENTI/REPARTI L OBIETTIVO DEL PROGETTO MULTICENTRICO E DI STANDARDIZZARE I PROTOCOLLI OPERATIVI E INDIVIDUARE VALORI CONDIVISI DI CUT-OFF DIFFERENZIATI PER I CAMPIONI PROVENIENTI DA DIVERSI REPARTI Dott.ssa Justina Bonetti (TLB) Mariella Ceriani Nicoletta Medaini 7