UNIVERSITA DEGLI STUDI DI TORINO FACOLTA DI MEDICINA VETERINARIA DIPARTIMENTO DI PRODUZIONI ANIMALI, EPIDEMIOLOGIA ED ECOLOGIA

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1 UNIVERSITA DEGLI STUDI DI TORINO FACOLTA DI MEDICINA VETERINARIA DIPARTIMENTO DI PRODUZIONI ANIMALI, EPIDEMIOLOGIA ED ECOLOGIA Relazione sull indagine : Epidemiologia della leishmaniosi in Valle d Aosta Ferroglio Ezio, Gastaldo Silvia, Veysendaz Enrica

2 Risultati dell indagine sui vettori I risultati ottenuti durante le estati del ci hanno spinto a continuare i nostri studi negli anni successivi al fine di approfondire le conoscenze su un argomento completamente nuovo per la Valle d Aosta. Durante la primavera del 2002, abbiamo intrapreso il monitoraggio dei flebotomi, analizzando 6 stazioni fisse con cadenza settimanale, a partire dalla fine del mese di maggio fino agli inizi di ottobre. Queste stazioni sono poste tutte entro un raggio di 10 chilometri da Aosta, luogo considerato migliore dal punto di vista climatico per lo sviluppo dei flebotomi. In questo modo abbiamo potuto valutare la dinamica stagionale dei flebotomi. Nei mesi di luglio e agosto, inoltre, nel 2002 abbiamo nuovamente effettuato un indagine a tappeto su vasta parte del territorio valdostano, per meglio valutare la distribuzione dei flebotomi. In ogni stazione di cattura sono state poste tra le 10 e le 20 sticky traps, a seconda del numero di barbacane presenti; nelle stazioni fisse, il numero è stato sempre di 15 trappole per ognuna. Le trappole oleate, una volta ritirate, vengono trasportate in laboratorio all interno di sacchetti di plastica contrassegnati col numero o la sigla della stazione corrispondente. In seguito, ogni sticky trap viene esaminata per svelare la presenza di flebotomi. Alla fine di maggio 2003 abbiamo ripreso il monitoraggio settimanale di 6 stazioni fisse per analizzare la dinamica stagionale dei flebotomi e nei mesi di luglio e agosto abbiamo continuato l indagine diffusa sul territorio, esplorando per lo più le zone che avevamo tralasciato negli anni precedenti, di modo da poter valutare più accuratamente l estensione del loro areale. Nelle stazioni fisse di monitoraggio della dinamica abbiamo rinvenuto 48 esemplari maschi di Phlebotomus perniciosus e 18 femmine; 1180 maschi di Sergentomyia minuta e 890 femmine; nessun esemplare di Phlebotmus neglectus. Il numero di flebotomi cresce progressivamente dalla prima settimana di giugno, fino a raggiungere il picco di massima densità nella seconda metà di luglio, quindi

3 leggermente in ritardo rispetto all anno precedente; in seguito il numero di flebotomi decresce, fino ad esaurirsi nella prima settimana di settembre. Nelle seguenti tabelle riportiamo tutti i dati relativi alle catture dei flebotomi. Tab.1. STAZIONI POSITIVE A P. PERNICIOSUS NEL 2001 Sigla Luogo Data Nº flebotomi C4 Sarre-Montan 17/06/ C2 Reg. Talapé 24/06/ C5 Sarre- Arensod 24/06/ C3 V. Betulle-AO 01/07/ C2 Reg. Talapé 10/07/ C4 Sarre-Montan 10/07/ C5 Sarre- Arensod 10/07/ C6 V. Trèves-AO 10/07/ C2 Reg. Talapé 17/07/ C5 Sarre- Arensod 17/07/ F3 St. Christophe 17/07/ G1 Gressan 23/07/ G2 Aymavilles 23/07/ G3 Jovencan/Aym. 23/07/ G5 Villeneuve 23/07/ G7 St. Pierre 23/07/ G8 St. Pierre 23/07/ G10 St. Pierre 2 23/07/ G15 Porossan-Roppoz 23/07/ H1 Reg. Talapé alta 23/07/ C2 Reg. Talapé 09/08/ C2 Reg. Talapé 19/08/ L2 Montjovet 24/08/ C2 Reg. Talapé 29/08/ C2 Reg. Talapé 18/09/2001 1

4 C5 Sarre- Arensod 18/09/ Tab. 2- STAZIONI POSITIVE AI FLEBOTOMI DEL 2002 Luogo Data S. minuta P. perniciosus P. neglectus Avise 13/07/02 1 F 1 M 0 St. Pierre,Bachod 13/07/02 9 M, 4 F 20 M 0 La Salle,Echarlod 13/07/ F 0 La Salle, Derby 13/07/ Introd 13/07/ Valsavaranche 13/07/ Val di Rhemes 13/07/ Arvier 13/07/ Arvier, La 13/07/ Ravoire Etroubles 14/07/ Gignod,capoluog 14/07/ o Gignod, Cré 14/07/ Montjovet 19/07/ M Montjovet, Brun 19/07/ Verrès 19/07/ Donnas 19/07/ Arnad 19/07/ Bard 19/07/ Issogne 19/07/ St. Vincent 19/07/ Valtournanche 19/07/ Antey-St-André 19/07/ Pont-St-Martin 19/07/

5 Pont-St-Martin, 19/07/ La Madeleine Moron 30/07/ Moron dessus 30/07/ Sallirod 30/07/ Valmignana 30/07/ Grand-Rhun 30/07/ Amay 30/07/ Brusson 30/07/ Challand S. A. 30/07/ Challand S. V 30/07/ Verrès, collina 05/08/ Morgex 05/08/ Pré-St-Didier 05/08/ PréS. D. La 05/08/ Vachérie Villeneuve 05/08/ Vileneuve, 05/08/ Rafting Porossan, Arsin 09/08/ Closellinaz 09/08/ Valpelline,centro 09/08/ Valpelline SS 09/08/ Roisan 09/08/ Roisan, Chateau 09/08/ Variney 09/08/ Nus 17/08/02 2 F 0 0 Fenis 17/08/02 1 F 0 0 St. Christophe 17/08/02 1 F 0 0 St. Vincent C7 09/07/ F 0 St. Vincent C7 15/07/ M, 1 F 0

6 St. Vincent C7 22/07/ M 0 St. Vincent C7 01/08/ Tab.3. RISULTATI GLOBALI STAZIONI MONITORATE PER FLEBOTOMI NEGLI ANNI Sigla Luogo Risultato A1 Arpuilles Neg A10 Fènis Pos A11 Fènis Pos A12 Nus Pos A13 Nus Pos A14 Nus Pos A15 Roisan Neg A7 St.Marcel Neg A8 St.Marcel Neg A9 St.Marcel Neg B1 montjovet Neg B10 Hone Neg B11 Arnad Neg B12 ChallandSV Neg B15 Pontey Neg B16 Pontey Pos B17 Aymavilles Neg B18 Pondel Neg B19 Aymavilles Neg B2 Pont-St-Martin Neg B20 Gignod Neg B21 Gignod Pos B22 Variney Neg B23 Variney Neg B3 Fontainemore Neg B4 Fontainemore Neg B5 Gaby Neg B6 GresssoneSJ Neg B7 Perloz Neg B8 Donnas Neg B9 Bard Neg C 7 AO C7 (St. Vincent) Pos D1 St.Pierre Neg E2 Charvensod Pos E3 Charvensod Neg F1 Gignod,Fr.Cré Pos F2 Gignod,Capoluogo Neg

7 F3 St.Christophe,Fr.Senin Pos F4 Quart,fr.villair Neg G1 Gressan,campo sportivo Pos G10 St.Pierre,Fr.Bachod Pos G11 Variney,piscina Neg G12 variney,ss vs.valpelline Neg G13 Roisan,fr.Moulin Neg G14 Porossan,Fr.Chapelle Neg G15 Porossan,fr.Roppoz Pos G3 Aymavilles,hot. rendezvous Pos G4 Aymavilles,Village Neg Fournier G5 villeneuve,str.vs.aymaville Pos s G7 St,Pierre,pompieri Pos G8 St.Pierre,str.vs.St.nicolas Pos G9 St.Pierre,Fr.Combaz Pos H1 Reg.Talapé alta-vigne Pos H2 Reg.Vignoles Neg J 1 Prè-St-didier Neg J 2 Palleussieux Neg J 3 Morgex-Villair Neg J 4 Morgex_thovex Neg J 5 Arvier Neg L1 Champdepraz Neg L2 montjovet Pos L3 Issogne Neg L4 Arnad Neg L5 Arnad Neg N1 Donnas,capoluogo Neg N2 Donnas,Fr.Clapey Neg N3 Pont-St-Martin Neg O 10 Arvier Neg O 11 Arvier - La Ravoire Neg O 12 Etroubles Neg O 2 Avise Pos O 5 La Salle (Derby) Neg O 6 La Salle Echarlod Pos O 7 Introd Neg O 8 Valsavaranche Neg O 9 Val di Rhemes (imbocco) Neg P 1 Pont St Martin Neg P 10 St Vincent Neg P 11 Valtournanche Fr. Moulin Neg P 12 Antey St. Andrè Neg P 13 Antey St. Andrè Fr. Neg

8 Covaloup P 14 Chatillon capoluogo Neg P 2 Pont St Martin La Neg Madeleine P 3 Donnas Neg P 4 Verrès Neg P 5 Bard Neg P 6 Issogne Neg P 7 Arnad Neg P 8 Montjovet Pos P 9 Montjovet Neg Q 1 Moron Neg Q 10 Verrès collina Neg Q 11 Morgex Neg Q 12 Prè-St. Didier Neg Q 13 Prè-St. Didier La Vacherie Neg Q 14 Villeneuve Neg Q 15 Villeneuve (Rafting) Neg Q 2 Moron sopra Neg Q 3 Sallirod Neg Q 4 Valmignana Neg Q 5 Grand - Rhun Neg Q 6 Amay Neg Q 7 Brusson Neg Q 8 Challand St. Anselme Neg Q 9 Challand St. Victor Neg R 1 Porossan Arsin Neg R 2 Clossellinaz Neg R 4 Valpelline (municipio) Neg R 5 Valpelline (statale) Neg R 6 Roisan Chef-Lieu Neg R 7 Roisan Fr.Chateau Neg S 1 Nus Neg S 2 Fenis Neg S 3 St. Cristhope Neg (dinamica) Tot. 123 Specie % staz. Positive S. minuta 9,70% P. 25,20% perniciosus P. neglectus 0,80% P. mascittii 0 P. ariasi 0

9 Oltre al controllo di stazioni a tappeto sul territorio, a partire dall estate 2001 è stato eseguito un monitoraggio settimanale nei mesi da maggio a ottobre di 6 stazioni di cattura fisse, site entro un raggio di circa 10 km dal fulcro epidemiologico, rappresentato dal comune di Sarre. In questo modo abbiamo esaminato la dinamica stagionale di Phlebotomus perniciosus: Tab.4- MONITORAGGIO STAZIONI FISSE 2002 STAZIO NE DATA MASCHI FEMMINE S. min P. p. P. n. S. m. P. p. P. n. C1 20/05/ /05/ /06/ /06/ /06/ /06/ /07/ /07/ /07/ /07/ /08/ /08/ /08/ /08/ /09/ /09/ /09/ /09/ /10/ /10/ C2 20/05/ /05/ /06/ /06/ /06/ /06/ /07/ /07/ /07/ /07/ /08/ /08/

10 18/08/ /08/ /09/ /09/ /09/ /09/ /10/ /10/ C3 20/05/ /05/ /06/ /06/ /06/ /06/ /07/ /07/ /07/ /07/ /08/ /08/ /08/ /08/ /09/ /09/ /09/ /09/ /10/ /10/ C4 20/05/ /05/ /06/ /06/ /06/ /06/ /07/ /07/ /07/ /07/ /08/ /08/ /08/ /08/ /09/ /09/

11 21/09/ /09/ /10/ /10/ C5 20/05/ /05/ /06/ /06/ /06/ /06/ /07/ /07/ /07/ /07/ /08/ /08/ /08/ /08/ /09/ /09/ /09/ /09/ /10/ /10/ Legenda: C1= Reg. Champailler, Aosta; C2= Reg. Talapé, Aosta C3= Via delle Betulle, Aosta; C4= Sarre, Fraz. Poinsod C5= Aymavilles, vigneti. C6= Via Trèves, Aosta (Questa stazione non è rappresentata in questa Tabella, poiché è risultata positiva soltanto in due momenti: il 27/06 e il 15/07). P.p.= Phlebotomus perniciosus P.n.= Phlebotomus neglectus

12 Grafico1.Dinamica stagionale di P.perniciosus, estate (N flebotomi per mq di cartine trappole) Phlebotomus/mq 3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 18/05/ /06/ /06/ /07/ /08/2001 Data 26/08/ /09/ /10/2001 Grafico 2.Dinamica stagionale di P.perniciosus, estate 2002 (N flebotomi per mq di cartine trappole) flebotomi/mq 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 20/05/02 06/06/02 20/06/02 02/07/02 15/07/02 01/08/02 18/08/02 04/09/02 21/09/02 04/10/02 Data

13 Fig. 1 Distribuzione delle stazioni di cattura

14 Fig. 2. Distribuzione dei flebotomi in valle d Aosta (confronto tra i dati attuali e quelli degli anni 60). Stazioni negative ai flebotomi dell indagine degli anni 60. Stazioni negative ai flebotomi nell indagine svolta tra il 2000 e il Stazioni positive a Phlebotomus perniciosus negli anni tra il 2000 e il Carta del rischio Il gruppo di lavoro sulla leishmaniosi del Settore Parassitologia e Malattie Parassitarie del Dipartimento, in base ai dati ottenuti da 599 stazioni di cattura ha realizzato un modello, basato sui valori di quota ed irraggiamento, che ha permesso di realizzare una carta tematica che individua le aree a maggiore vocazionalità per la presenza di flebotomi. Tale modello, pur non essendo previsto nella convenzione, è stato applicato in fase sperimentale, e sarebbe opportuno approfondire il tema, alla valle d Aosta ed il risultato è riportato nella Figura 3.

15 Fig. 3 - Carta del rischio. Risultati dell indagine sui cani Nel periodo tra gennaio e luglio degli anni 2001, 2002 e 2003 è stato effettuato un monitoraggio sierologico a tappeto sul territorio valdostano che ha effetivamente svelato la presenza di cani sierologicamente positivi, anche sicuramente mai usciti dalla regione, cosa che suggerisce senza errore la possibilità di svolgimento dell intero ciclo dela malattia in questa zona. Nelle tabelle di seguito si riportano i dati relativi alle indagini sierologiche. Tab.5. DATI RIASSUNTIVI INDAGINE SIEROLOGICA STAGIONI

16 COMUNE N TOT. SIERI SIERI POSITIVI AUTOCTONI SIRI POSITIVI ETEROCTONI SIERI NEGATIVI ANTEY AOSTA 48 2 (1:40) 2 (1 1:80;1 1:320) 44 ARNAD 22 1 (1:40) 0 21 ARPUILLES ARVIER AYAS AYMAVILLES BRISSOGNE BRUSSON CHALLAND S.V CHALLAND S.A CHAMBAVE CHAMPDEPRAZ CHAMPOLUC CHARVENSOD 34 1 (1:40) 0 33 CHATILLON 57 3 (1:40) 0 54 COURMAYEUR DONNAS EMARESE EXCENEX FENIS FONTAINEMORE GIGNOD GRESSAN 22 1 (1:40) 0 21 GRESSONEY 18 1 (1:40) 0 17 ISSIME 12 3 (1:40) 0 9 ISSOGNE JOVENCAN 11 1 (1:40) 0 10 LILLIANES MONTJOVET NUS 19 2 (1:40) 1 (1:40) 16 OZEIN 2 1 (1:40) 0 1 PERLOZ 8 1 (1:40) 0 7 POLLEIN 26 2 (1:40) 0 24 PONT ST (1:40) 0 21 MARTIN PONTEY 21 3 (1:40) 1 (1:40) 17 POROSSAN QUART

17 RHEMES S.G ROISAN SARRE (14 1:40;2 1:160;2 6 (2 1:40;1 1:80; :640;1 1:1280) 1:640;2 1:1280) ST. CHRISTOPHE ST. DENIS 11 1 (1:40) 0 10 ST. MARCEL ST. NICOLAS ST. PIERRE ST. VINCENT 71 6 (1:40) 2 (1:40) 63 TALAPE TORGNON 4 1 (1:40) 0 3 USSEL VALGRISENCHE VALSAVARENC HE VALTURNANCH 4 1 (1:40) 0 3 E VERRAYES VERRES VERTUY VIEYES-AY VILLENEUVE Ignoto TOTALE (47 1:40; 2 1:160; 11 (6 1:40; 2 1:80; :640; 1 1:1280) 1:320;1 1:640; 2 1:1280) Nel 2003 sono stati testati 657 cani, e le positività sierologiche sono state 11, di cui 10 nel comune di Sarre, che sembra essere per il momento l unico vero focolaio della malattia. Tab.6. INDAGINE SIEROLOGICA STAGIONE Comuni N cani N cani pos. e titolo anticorpale testati St.Vincent-St.Marcel-Nus 72 0 Pont-St-Martin Donnas 29 0 Lillianes 10 0 Sarre 125 5(1:40);3(>1280); 2(1:160);1(1:640) Gressan-Charvensod- 75 0

18 St.Christophe Chatillon-Montjovet Champdepraz Pollein-Brissogne-Fénis 20 0 Canile Ao-Porossan 125 1(1:320) Verrayes-Nus 15 0 Challand-St.V/St.A Verrès-Issogne-Arnad 69 0 St.Pierre-St.Nicolas Valsavaranche Quart-St.Christophe 28 0 Carta di rischio Conclusioni Alla luce dei risultati che abbiamo ottenuto, riteniamo che la Valle d Aosta non possa più considerarsi un luogo esente dal rischio di Leishmaniosi. Consigliamo che anche in questa regione vengano adottate le misure di prevenzione diffuse dove la malattia è endemica, nel tentativo di evitarne la diffusione su larga scala. Le misure applicabili per la profilassi della Leishmaniosi consistono essenzialmente nella lotta ai flebotomi. Infatti, poiché non esistono vaccini in commercio, non è possibile intervenire efficacemente sul risanamento dell ospite vertebrato di Leishmania (uomo-cane).

19 La lotta ai flebotomi prevede due tipi di intervento: il primo consiste nell utilizzo di misure di protezione contro le punture degli insetti; il secondo, meno facile da attuare, ha lo scopo di ridurre la densità dei flebotomi tramite l uso di insetticidi ad azione residua negli ambienti domestici. I proprietari di cani, soprattutto nelle zone dove la Leishmaniosi è endemica, possono proteggere i loro animali applicando alle finestre delle zanzariere a maglie molto fitte, anche impregnate di prodotti insetticidi. Inoltre, i cani dovrebbero essere tenuti al chiuso durante le ore notturne; nel caso questo non fosse possibile, sarebbe almeno auspicabile l uso di repellenti applicati direttamente sul pelo dell animale (formulazioni spray o spot-on) o di appositi collari reperibli in commercio. In Valle d Aosta, per raggiungere un buon livello di protezione è sufficiente adottare queste precauzioni dalla fine di maggio a metà settembre; in questo modo, come si evince dai dati che abbiamo ottenuto in questi anni di studi, si copre tutta la stagione dei flebotomi. Infine, la colonizzazione della Valle d Aosta da parte dei flebotomi lascia intendere che nella nostra regione si siano verificati negli ultimi trent anni dei mutamenti climatici di una certa importanza. Sarebbe molto interessante approfondire le condizioni che regolano la presenza/densità dei flebotomi al fine di realizzare una carta predittiva del rischio per la presenza del vettore della Leishmaniosi in un ambiente per lui così atipico. Grugliasco, 15 Gennaio 2004 Dr. Ferroglio Ezio