Linfomi non- Hodgkin pediatrici: Valore prognos7co della Mala9a Residua Minima

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1 Linfomi non- Hodgkin pediatrici: Valore prognos7co della Mala9a Residua Minima Lara Mussolin, Ph.D. Is2tuto di Ricerca Pediatrico Fondazione Ci;à della Speranza Clinica di Oncoematologia Pediatrica Università di Padova

2 Laboratorio Biologia Tumori Solidi (Resp. Prof. A. Rosolen) Clinica di Oncoematologia Pediatrica Dipartimento Salute Donna e Bambino - Università di Padova

3 Scopo La Mala9a Residua Minima può essere usata come marcatore di prognosi nei LNH pediatrici?

4 PubMed: MRM in Leucemia Linfoma oggi 2000 Anni 90

5 dopo 2 ciclo dopo 1 ciclo Esordio MALATTIA MINIMA DISSEMINATA Presenza di cellule neoplastiche in numero minimo (definito in base alla sensibilità dei metodi di studio disponibili) in tessuti a distanza dalla sede primitiva di malattia e per lo piu identificabili con il midollo osseo o il torrente circolatorio MALATTIA MINIMA RESIDUA Persistenza di un piccolo numero di cellule neoplastiche in un tessuto lontano da quello di origine (midollo osseo, sangue periferico), dopo l inizio della terapia che ha prodotto una parziale o completa regressione della malattia primitiva

6 Distribuzione dei LNH pediatrici in base al soho7po istologico ALCL 15% altri 7% Linfoma di Burkitt 48% Linfoma linfoblas7co T 30%

7 AIEOP ALCL 99 International protocol for the treatment of childhood anaplastic large cell lymphoma Rischio basso Stadio 1: completamente resecato Rischio standard NO interessamento cutaneo NO interessamento medias7nico NO interessamento viscerale Rischio alto Sì interessamento cutaneo Sì interessamento medias7nico Sì interessamento viscerale JCO, 2009; 27(6) p

8 ALK+ t(2;5) t(1;2) t(2;3) Inv2 t(2;17) t(2;x) t(2;22) Anomalie gene2che Nucleophosmine NPM Tropomyosin 3 TPM3 Trk Fusion Gene TFG ATIC (Pur H gene) ATIC Clathrin heavy chain CLTC Moesin MSN Anaplastic Lymphoma Kinase ALK ALK ALK ALK ALK ALK Non Muscular myosin heavy chain MYH9 ALK 95 % 5% 1% 1% 1% 1% 1%

9 Mala$a Minima Disseminata (1) 52 biopsie tumorali 90% 47/52 t(2;5) positivi in RT-PCR MMD 61% 25/41 t(2;5) positivi nel BM 15% 6/41 t(2;5) positivi nel BM mediante analisi morfologica su vetrino

10 (European Intergroup for Childlhood non-hodgkin Lymphomas)

11 Mala$a Minima Disseminata (2) 128 casi di ALCL BFM AIEOP

12 Test biologici MMD (RT-PCR) Titolo anticorpale anti-alk (ICC) Midollo osseo Sangue periferico plasma Diluizioni crescen7 del plasma (1/50, 1/250...)

13 Anticorpi anti-alk 47 ALCL: 89% positivi

14 AIEOP-BFM study Risultati Aprile Dicembre 2008: 128 pazienti con ALCL Pazienti arruolati nell ALCL-99 Pazienti studiati per MMD e anti-alk OS: 89% (2%) PFS: 73%(3%) p=0.36 p=0.21 OS: 85% (3%) PFS: 67%(4%) Malattia Minima Disseminata 59% positivi Titolo anticorpale anti-alk 96% positivi Mussolin et al, 2013

15 AIEOP-BFM study Analisi ROC Valore-soglia più predittivo di recidiva Titolo alto sensibilità Titolo basso 1-specificità Mussolin et al, 2013

16 AIEOP-BFM study Progression Free Survival Malattia Minima Disseminata Titolo anticorpale anti-alk MMD MDD negative negativi Antibody T.a. alto titer >750 Probability MMD MDD positivi positive Patients Events PFS% (SE%) p-value Probability Antibody T. a. titer basso <750 Patients Events PFS% (SE%) p-value MDD negative < Antibody titer < < MDD positive Antibody titer > Years from diagnosis No associazione χ 2 test P= 0.22 Years from diagnosis? Mussolin et al, 2013

17 Titolo anticorpale basso Titolo anticorpale alto MMD positiva HR? (High Risk) IR? (Intermdiate Risk) MMD negativa IR? (Intermediate Risk) LR? (Low Risk)

18 AIEOP-BFM study Overall Survival LR IR LR bir blr IR bhr P< Patients Events OS% (SE%) p-value HR bhr bir blr patients events pr 5y (s.e.) log-rango PFS BM+Titer LR (4) < IR (7) HR (9) Mussolin et al, 2013

19 Analisi uni e mul2variata Characteristic No. of Patients No. of Events 5-Years PFS % SE % Univariate P-value Multivariate P-value Hazard Ratio 95% CI Sex Female Male Median Age (years) > St Jude Stage I+II III+IV Median LDH UI/L > B Symptoms No Yes Skin (Histology) No Yes Pheripheral Lymph-node No Yes Mediastinum No Yes Visceral Involvement No Yes Bone No Yes BM Morphological Involvement No Yes CNS Involvement No Yes Common Type Histology No Yes CD3 Neg Pos Biological Risk Group blr+bir < < bhr Mussolin et al, 2013

20 Conclusioni ALCL 2013 ALCL 2012

21 dopo 1 ciclo dopo 2 ciclo Esordio

22 P MalaFa Residua Minima AIEOP + BFM: EFS (5 anni) 21% 67% 55% 81% 0.1 p: < anni MMD BM+PB nega7vi 0.81, SE=0.05 (N= 80, 13 even7) MMD pos., prima 2 c. neg 0.67, SE=0.09 (N= 27, 9 even7) MMD pos., prima 2 c. pos 0.21, SE=0.08 (N= 26, 20 even7) MMD pos., prima 2 c. n.n. 0.55, SE=0.08 (N= 46, 20 even7)

23 paper in submission

24 Distribuzione dei LNH pediatrici in base al soho7po istologico ALCL 15% altri 7% Linfoma di BurkiH 48% Linfoma linfoblas7co T 30%

25 Traslocazioni cromosomiche e Linfoma di Burki; GENI COINVOLTI t(8;14)(q24;q32) MYC- IgH 75-85% t(2;8)(p12;q24) t(8;22)(q24;q11) MYC- Igk MYC- Igl 15-25%

26 Long Distance- PCR (LD- PCR) t(8;14)(q24;q32). 3 exon 3 exon S µ C δ Cγ S α 3 J H E µ C µ Sγ C α MYC/04 JH Cµ/03 Cγ/02 Cα/01 BL Marker II Akasaka T, Blood 2006; Basso K, Am J Pathol 1999 Mussolin L, Leukemia 2003

27 Stra7ficazione in base al Gruppo di Rischio R1 resezione completa R2 resezione incompleta: stadio I, II: stadio III con LDH<500UI/l R3 resezione incompleta: stadio III con LDH compreso tra 500 e 1000 Ul/l stadio IV con LDH< 1000 UI/l e SNC nega7vo R4 resezione incompleta: stadio III con LDH >1000 Ul/l; stadio IV con LDH 1000 > UI/l e SNC nega7vo; SNC posi7vo

28

29 AIEOP LNH 97 (Gennaio Giugno 2008) Totale pazien7 con LB registra7 ed eleggibili = 277 Studia7 per t(8;14) = 134 (48%) Non studia7 per t(8;14) = 143 (52%) PFS: 88% (SE 3%) vs PFS: 93% (2%) p=0.08 Posi7vi per t(8;14) = 96/134 (72%) MMD = 26/84 (31%) 18% (15/84) Mussolin et al, 2011

30 MMD posi7vi: 26/84 Stra7ficazione in base al Gruppo di Rischio R1 resezione completa R2 resezione incompleta: stadio I, II: stadio III con LDH<500UI/l 4 22 R3 resezione incompleta: stadio III con LDH compreso tra 500 e 1000 Ul/l stadio IV con LDH< 1000 UI/l e SNC nega7vo R4 resezione incompleta: stadio III con LDH >1000 Ul/l; stadio IV con LDH 1000 > UI/l e SNC nega7vo; SNC posi7vo

31 Progression Free Survival 87% 67% 93% 68% Mussolin et al, 2011

32 Outcome: Valore prognos7co delle principali caraheris7che cliniche e biologiche

33 Indagini molecolari per MMD e MRM 78% t(8;14) positivi nella biopsia tumorale

34 19 BL pa7ents: 6/19 MDD posi7ve Frequenza Sensibilità VH-JH DH-JH VH-JH;DH-JH Vk-Kde intron-kde Vk-Kde; intron- Kde

35

36 AIEOP: centralizzazione dati

37 Distribuzione dei LNH pediatrici in base al soho7po istologico ALCL 15% altri 7% Linfoma di BurkiH 48% Linfoma linfoblas7co T 30%

38 Anomalie gene2che dei linfomi linfoblas2ci T 11% del(9p) 8% t(9;17) 19% 14q % altre

39 CD3 CD5 TdT MMD positiva in 71/99 casi (72%) Range: 0,01%- 32%

40 EFS in base al livello di MMD misurata in citofluorimetria Inferiore 5% Inferiore 1% 89% 91% 68% 52% P=0.009 P=0.03 Coustan- Smith, JCO 2009

41 MRM e nuovi protocolli chemioterapici ALCL: parametro per stra7ficare i pazien7 in gruppi di rischio Linfoma di BurkiH: studio ancillare analisi ad interim Linfoma linfoblas7co T:??

42 Ringraziamen7 Clinica di Oncoematologia Pediatrica Azienda Ospedaliera- Università di Padova Dir. Prof. Giuseppe Basso Elisa Carraro Federica Lovisa Marta Pillon Elisa Tosato Emanuele S.G. d Amore Prof. Angelo Rosolen Non- Hodgkin s Lymphoma- Berlin- Frankfurt- Muenster Center Liebig University Giessen Wilhem Woessmann Chris7ne Damm- Welk Mar7n Zimmermann Alfred Reiter Centri AIEOP Fondazione della Speranza

43 Grazie!

44 What about blood? T-LBL ALCL Coustan-Smith, JCO 2009 Damm-Welk, Blood 2007

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