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1 Citogenetica e biologia molecolare dei tumori mammari: implicazioni cliniche la storia di HER2 V. Martin 28 giugno 2011 HER2: Human Epidermal Receptor HER2 e carcinoma mammario alias c-erb, ERBB2, HER- 2/neu recettore transmembrana di tipo tirosin-kinasico appartiene alla famiglia dei recettori EGF induce una cascata di segnali responsabili di crescita e proliferazione cellulare il gene che lo codifica mappa in 17q12 HER2 è deregolato in circa il 25% dei carcinomi mammari (HER2+) marcatore prognostico malattia aggressiva recidive precoci minore tempo di sopravvivenza libero da malattia marcatore predittivo HER2 è il bersaglio di un farmaco biologico HER2 e trastuzumab trastuzumab e carcinoma mammario alias Herceptin, Erceptina anticorpo ricombinante umanizzato agisce identificando HER2 e bloccandolo impedisce la dimerizzazione tra recettori inibisce la cascata di segnali a valle attiva il sistema immunitario si somministra per infusione in vena il trattamento è attuato in day hospital (sei infusioni) approvato nel 2000 per l uso in pazienti affette da carcinoma avanzato/metastatico HER2+ approvato nel 2006 per l uso in pazienti affette da tumori HER2+ in stadio precoce sia in monoterapia che in combinazione o dopo chemioterapia standard Vantaggi: riduce il rischio di recidive aumenta le percentuali di risposta aumenta la sopravvivenza libera da malattia migliora la sopravvivenza globale migliora la qualità della vita Effetti collaterali (minori quando usato in monoterapia): problemi cardiaci dolori in sede malattia astenia, anoressia cefalea

2 analisi di HER2 HER2 ANALISI DEL GENE ANALISI DELLA PROTEINA clone CB11 (Biosystems, Novocastra) HER2 HER2 VANTAGGI facile da eseguire veloce interpretazione veloce al microscopio correlazione con la morfologia costa poco buona correlazione con risposta a Herceptin SVANTAGGI numerosi anticorpi con sensibilità e specificità differenti risultato dipende da fattori preanalitici interpretazione soggettiva con zona grigia (score 2+) interpretazione!"# $%&' (#$)$*" &'+$+& #"!"# $,& numero di geni (segnali rossi) R = numero di cromosomi (segnali verdi) -"..$/

3 HER2 molto specifica VANTAGGI valutazione standardizzata valore soglia definito poco influenzata da fattori preanalitici buona correlazione con risposta a Herceptin SVANTAGGI non disponibile in tutti i laboratori tecnicamente difficile necessita di tempo valutazione con microscopio a fluorescenza cara -"..$/ correlazione gene-proteina selezione pazienti L amplificazione genica di HER2 è strettamente correlata all overespressione proteica 012 '01 3 ".5 4 -". / :;5&;5#/<5 /;//88;98 /=;9/& controllo di qualità - CQ CQ esterni UKNEQAS standardizzazione delle procedure standardizzazione dei criteri di lettura accuratezza e riproducibilità - colorazione e autovalutazione campione inviato dal NEQAS - colorazione e autovalutazione campione ICP - invio di entrambi i campioni e delle valutazioni al NEQAS - giudizio - linee cellulari (non sezioni istologiche!) - Il vetrino non viene rispedito al NEQAS x controllo metodo - viene assegnata una valutazione (punteggio da 1 a 3) sulla base del valore di R - es..

4 CQ interni - ICP dal costruzione mensile di array di tessuto correlazione e realizzazione TMA la nostra esperienza 8A BBC96 BB' 63! C33-".7 >C -". 3".589 >AD ".5 ; risultati HER2 risultati HER2 control series % % % % not amplified borderline amplified % 13 2% % non amplificato borderline amplificato

5 confronto - confronto - control series not amplified borderline amplified % 7 1% 7 1% % % 1 2% 8 13% 60 8% % % 51 7% % % % % 13 2% % control series not amplified borderline amplified % 7 1% 7 1% % % 1 2% 8 13% 60 8% % % 51 7% % % % % 13 2% % ".5-".EB>&F 868 EB0F!.$98"5G 886".5-".EF verifica delle discrepanze in diagnostica 2-". I"!I$"5."!8 J/89/ 2 768".5 96-".; diagnostic series not amplified borderline amplified % 23 11% 59 27% ;6/699 2C ".5 20/H/ ".5 28;6/ 689;6/ < -".! 28;6/ non amplificato borderline amplificato confronto in diagnosi confronto in diagnosi diagnostic series not amplified borderline amplified % 5 13% % % 18 13% 34 25% % % 23 11% 59 27% diagnostic series not amplified borderline amplified % 5 13% % % 18 13% 34 25% % % 23 11% 59 27% ;6/699 2/H/ ".5

6 evidenza importante selezione pazienti in TICINO " controllo diagnosi 8 score 0 1% score 1+ 13% 1 score 2+ 25% 25% score 3+ 98% 10!2F8 96; K 9; score 0 score 1+ score 2+ score 3+ controllo diagnosi -". / take home message L uso di controlli di qualità interni per l analisi di HER2 ha permesso di: selezionare con accuratezza e riproducibilità le pazienti disegnare un algoritmo ottimizzato sulla nostra realtà individuare nuove pazienti che possono beneficiare di trattamenti con trastuzumab

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