Università degli Studi di Napoli Federico II
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- Ornella Franceschini
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1 Università degli Studi di Napoli Federico II
2 Una mela al giorno toglie il medico di torno!
3 Il concetto di salute oggi La salute è un completo stato di benessere fisico,mentale e sociale e non soltanto l assenza di malattia il mantenimento dello stato di ben-essere e bell-essere per piacere ed accettarsi
4 Non solo anni alla vita ma anche vita agli anni Aspettativa di vita Qualità della vita Ciascun uomo desidera vivere a lungo, ma nessun uomo desidera invecchiare J. Swift
5 Come prevenire una malattia? Farmaci Nutraceutica 40% MEDICINA D ATTESA 60% MEDICINA D INIZIATIVA
6 I nutraceutici: Potenziale spazio terapeutico Nutraceutico Sthephen De Felice Un alimento, o parte di esso, che dà effetti benefici alla salute inclusa la prevenzione e/o il trattamento di una malattia e che associa all alta digeribilità e alla ipoallergenicità, le proprietà curative di principi attivi naturali, di comprovata e riconosciuta efficacia: beyond diet, before drug
7 Da alimenti funzionali a nutraceutici
8 I nutraceutici: Potenziali ambiti terapeutici Malattie dell apparato gastrointestinale Malattie dismetaboliche e del sistema cardiovascolare Prevenzione obesità Prevenzione cardiopatie Prevenzione dislipidemie Prevenzione diabete Prevenzione stress ossidativo
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10 Mela Annurca Campana IGP
11 Mela Annurca Campana IGP
12 Target epidemiologico ALIMENTO MESSA A PUNTO DI NUOVI PRODOTTI: integratori, alimenti destinati a fini medici speciali o dispositivi medici Trial Clinico TECNOLOGIA FARMACEUTICA FRAZIONAMENTO BIOGUIDATO IDENTIFICAZIONE DEI COMPOSTI RITENUTI RESPONSABILI FORME DI DOSAGGIO STUDIO DEI MECCANISMI D AZIONE complesso e composti singoli ATTIVITA BIOLOGICO- FUNZIONALE STUDIO DEL PROFILO METABOLICO E IDENTIFICAZIONE DEI COMPOSTI RESPONSABILI HPLC-MSn/NMR MICROBIOLOGIA- FARMACOLOGIA- BIOLOGIA
13 Dulbecco s Modified Eagle s Medium (DMEM) con aggiunta di: 10% di siero bovino fetale 100 U/mL di penicillina 100 µg/ml di streptomicina a 37 C in un atmosfera umidificata al 5% di CO 2. 1 µg estratto polifenolico M. Pumila Miller cv Red Delicious M. Pumila Miller cv Pink Lady M. Pumila Miller cv Fuji M. Pumila Miller cv Golden Delicious
14 * Raiola at al.(2012) modificata Digestione Salivare Digestione Gastrica Digestione Intestinale I campioni di mela (20 g) mescolati con: - 6 ml di saliva artificiale e 290 mg di α-amilasi. ph soluzione 6,8 con HCl 0,1 N. La miscela è introdotta in un sacchetto di plastica con 40 ml di acqua, omogeneizzata in Stomacher 80 Microbiomaster per 3 min. Allestimento beuta con aggiunta di : 0,5 g di pepsina ( U) in HCl 0,1 N ph regolato a 2,0 con HCl 6 N miscela incubata a 37 C in agitatore orbitale Polymax 1040 (250 rpm) per 2 h. Determinazione del profilo polifenolico: digeriti analizzati mediante HPLC-DAD-MS ph aumentato a 6,5 con NaHCO3 0,5 N aggiunti 5 ml miscela : pancreatina (8,0 mg / ml) sali biliari (50,0 mg / ml) (1:1 v / v) disciolti in 20 ml H₂O incubato a 37 C in un agitatore orbitale (250 rpm) per 2 h
15 mg/100 g fw Procianidine Rutina Florizina Salivare Gastrica Intestinale Transepiteliale Salivare Gastrica Intestinale Transepiteliale Buccia Polpa
16 Studio in vitro Interazione con proteine plasmatiche Soluzioni base: 20 mm HEPES (ph 7,5), 0,9% NaCl, 0,5 M NaHCO3 Soluzione di proteine plasmatiche costituita da: HAS, 42 mg/ml; HDL, 1450 mg/ml; LDL, 780 mg/ml, VLDL, 120 mg/ml. Polifenoli incubati con proteine plasmatiche per 30 min a 37 C. Campioni centrifugati a 25 C per 30 min a x g. Determinazione frazione polifenolica libera: surnatanti estratti con miscela acetonitrile-acqua (84:16; v/v) ed analizzati mediante HPLC
17 Interazione in vitro polifenoli proteine plasmatiche Binding > 92% HSA HDL LDL VLDL Procianidine 18.1 ± ± ± ± 0.3 Rutina 56.5 ± ± ± ± 0.1 Florizina 55.9 ± ± ± ± 0.5 HDL principale lipoproteina plasmatica che lega procianidine Brunet, et al. Human Apo A-I and rat transferrin are the principal plasma proteins that bind wine catechins. Journal ofagricultural and Food Chemistry, 50, (2002). trasporto colesterolo periferico al fegato Jonas F. Regulation of lecithin cholesterol acyl transferase activity. Progressin Lipid Research, 37, (1998). Procianidine evitano l ossidazione delle HDL
18 Composizione della frazione procianidinica di differenti cultivar di mele Annurca RD GS F GD Dimers 28.3 ± ± ± ± ± 0.7 Trimers 9.06 ± ± ± ± ± 0.9 Tetramers 3.83 ± ± ± ± ± 0.5 Pentamers 5.20 ± ± ± ± ± 0.2 Procyanidin polymers 17.5 ± ± ± ± ± 1.2 Total procyanidins ± ± ± ± ± 0.9 * Values are expressed as % ± SD; n = 5; results were significantly different at a level of P = RD: Red Delicious; GS: Granny smith; F: Fuji; GD: Golden Delicious.
19 Trial clinico: "Studio doppio-cieco verso placebo, cross-over, randomizzato, a gruppi paralleli, monocentrico, sull effetto di 5 varietà di MELE sull assetto lipidico" 250 soggetti sani - età colesterolo totale mg/dl suddivisi 5 gruppi/(28 uomini 22 donne) Annurca Red Delicious (RD) Granny smith (GS) Fuji (F) Golden Delicious (GD) 1 mela/200g die (due annurche/100gx2 die) x 30/60 giorni
20 Effetto delle mele sul colesterolo totale Treatment Pre-treatment Post-treatment Variation (%) Annurca ± ± Red Deliciuos ± ± Granny Smith ± ± Fuji ± ± Golden Delicious ± ± Subjects consumed either one apple/day (two Annurca apples/day), for 2 months. Value are means ± SD (n = 5). Results were significantly different at a level of P =
21 Effetto delle mele sui livelli di LDL Treatment Pre-treatment Post-treatment Variation (%) Annurca ± ± Red Delicious ± ± Granny Smith ± ± Fuji ± ± Golden Delicious ± ± Subjects consumed either one apple/day (two Annurca apples/day) for 2 months. Value are means ± SD (n = 5). Results were significantly different at a level of P =
22 Effetto delle mele sui livelli di HDL Treatment Pre-treatment Post-treatment Variation (%) Annurca 38.5 ± ± Red Delicious 37.9 ± ± Granny Smith 35.4 ± ± Fuji 36.7 ± ± Golden Delicious 34.2 ± ± Subjects consumed either one apple/day (two Annurca apples/day) for 2 months. Value are means ± SD (n = 5). Results were significantly different at a level of P =
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25 Applemets Trial clinico: "Studio doppio-cieco verso placebo, cross-over, randomizzato, a gruppi paralleli, monocentrico, sull effetto dell estratto polifenolico della mela Annurca sull assetto lipidico" 250 soggetti sani - età colesterolo totale mg/dl, razza bianca 116 Uomini (età 31-81) (TC: ; HDL-C: ; LDL-C: ) 134 Donne (età 30-83) (TC: ; HDL-C: ; LDL-C: ) 2 capsule (400 mg)/die per un periodo di 30/60 giorni UOMINI Colesterolo tot. HDL-C LDL-C t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 Media ponderata Variazione % DONNE Colesterolo tot. HDL-C LDL-C t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 Media ponderata Variazione % -24.6%
26 Δ% TC Riduzione Colesterolo Totale Variazione (%) TC dopo 30/60 giorni pazienti (n = 250) Valore medio = %
27 Δ% LDL-C Riduzione Colesterolo LDL Variazione (%) LDL-C dopo 30/60 giorni pazienti (n = 250) Valore medio = %
28 Δ% HDL Incremento Colesterolo HDL 110 Variazione (%) HDL-C dopo 30/60 giorni pazienti (n = 250) Valore medio = %
29 Table 6 Colesterolo Totale Effects of Annurca supplement (AMS) on plasma cholesterol, glucose and triglyceride metabolism in men subgroup according to TC. Men Δ (%) Men Δ (%) Men Δ (%) TC (mg/dl) HDL-C (mg/dl) LDL-C (mg/dl) Glucose (mg/dl) t ± ± ± 12.5 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 4.2 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 12.7 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 14.1 t ± ± ± t ± ± ± Triglycerides (mg/dl) t ± ± ± 11.1 t ± ± ± t ± ± ± Subjects were administered with 2 AMS capsules/day for 2 months. Value are means ± SD (n = 5). Results were significantly different at a level of P =
30 Table 7 Età partecipanti allo studio Effects of Annurca supplement (AMS) on plasma cholesterol, glucose and triglyceride metabolism in men subgroup according to age. Men Δ (%) Men Δ (%) Men Δ (%) TC (mg/dl) HDL-C (mg/dl) LDL-C (mg/dl) Glucose (mg/dl) t ± ± ± 13.1 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 5.3 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 13.8 t ± ± ± t ± ± ± t ± ± ± 11.9 t ± ± ± t ± ± ± Triglycerides (mg/dl) t ± ± ± 10.3 t ± ± ± t ± ± ± Subjects were administered with 2 AMS capsules/day for 2 months. Value are means ± SD (n = 5). Results were significantly different at a level of P =
31 Estratto polifenolico di "Melannurca Campana IGP" Trial clinico: "Studio doppio-cieco verso placebo, cross-over, randomizzato, a gruppi paralleli, monocentrico, sull effetto dell estratto polifenolico della mela Annurca sull assetto lipidico" Tossicità epatica/renale AST (GOT) (U/L) ALT (GPT) (U/L) γ-gtp (U/L) ALP (U/L) t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 Media ponderata Variazione % LDH (U/L) Albumina (g/dl) Bilirubina Tot. (mg/dl) Creatinina (mg/dl) t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 t 0 t 30 t 60 Media ponderata Variazione % ,76
32 Δ (mg/dl) Profilo lipidico di pazienti trattati con Atorvastatina o con Nutraceutico Atorvastatina NUT TC LDL-C -10 HDL-C Mela Annurca
33 Sviluppi Futuri
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37 Effetti Concomitanti..
38 Effetto di AppleMets Hair sulla crescita dei capelli Effetto del trattamento per via sistemica Dopo 30 gg con 2caps/die
39 Effetto del trattamento per via sistemica dopo 60 gg con 2caps/die
40 Effetto di AppleMets Hair sulla crescita dei capelli Inizio trattamento 2 cps/die Dopo 30 gg 2 cps/die Dopo 60 gg 2 cps/die Dopo 120 gg 2 cps/die Effetto del trattamento per via sistemica
41 AppleMets hair
42 il mantenimento dello stato di ben-essere e bell-essere per piacere ed accettarsi
43 Grazie per l attenzione
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