Frodi nel settore della pesca. Giuseppe Arcangeli

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1 Frodi nel settore della pesca Giuseppe Arcangeli

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4 La sostituzione di specie La vendita di prodotto scongelato per fresco

5 REGOLAMENTO (CE) N. 104/2000 DEL CONSIGLIO del 17 dicembre 1999 relativo all'organizzazione comune dei mercati nel settore dei prodotti della pesca e dell'acquacoltura capo 2 : Informazione dei consumatori a) la denominazione commerciale della specie, b) il metodo di produzione (cattura in mare o nelle acque interne o allevamento), c) la zona di cattura.

6 REGOLAMENTO (CE) N. 2065/2001 DELLA COMMISSIONE del 22 ottobre 2001 che stabilisce le modalità d'applicazione del regolamento (CE) n. 104/2000 del Consiglio per quanto concerne l'informazione dei consumatori nel settore dei prodotti della pesca e dell'acquacoltura

7 Decreto del Ministero delle Politiche Agricole Alimentari e Forestali del 31 gennaio 2008 (G.U. n. 45 del 22 febbraio 2008) Denominazione in lingua italiana delle specie ittiche di interesse commerciale

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10 Denominazione in lingua italiana Genere e specie Famiglia Ordine Abramide Abramis brama (Linneo, 1758) CYPRINIDAE CYPRINIFORMES Alice indopacifica Stolephorus indicus (Van Hasselt, 1823) ENGRAULIDAE CLUPEIFORMES Aragosta atlantica Palinurus charlestoni (Forest e Postel, 1964) DECAPODA PALINURIDAE Aspio Aspius aspius (Linnaeus, 1758) CYPRINIDAE CYPRINIFORMES Berice rosso Centroberyx affinis ( Günther, 1859) BERYCIDAE BERYCIFORMES Bondella Coregonus macrophthalmus (Nusslin,1882) SALMONIDAE SALMONIFORMES Buccina Buccinum undatum (Linneo,1758) BUCCINIDAE NEOGASTEROPODA Calamaro occhigrandi Loligo ocula (Cohen, 1976) LOLIGINIDAE DECAPODA Canestrello bianco Flexopecten spp. PECTINIDAE OSTREOIDA Cappa del Pacifico Gari solida (Gray, 1828) GARIDAE VENEROIDA Cappalunga o Cannolicchio Ensis ensis (Linneo, 1758) SOLENIDAE VENEROIDA Cappalunga o Cannolicchio Ensis siliqua (Linneo, 1758) SOLENIDAE VENEROIDA Carango indopacifico Alepes djedaba (Forsskål, 1775) CARANGIDAE PERCIFORMES Cernia indopacifica Epinephelus retouti (Bleeker,1868) SERRANIDAE PERCIFORMES Cernia miniata Cephalopholis miniatus (Forsskål, 1775) SERRANIDAE PERCIFORMES Chiocciola di scogliera Littorina spp. LITTORINIDAE MESOGASTEROPODA Fieto argenteo Pampus argenteus (Euphrasen, 1788) STROMATEIDAE PERCIFORMES Gamberetto Palaemon adspersus (Rathke, 1837) PALAEMONIDAE DECAPODA Gambero bianco Pasiphaea rivado (Risso, 1816) PENAEIDAE DECAPODA Gambero rosso del Pacifico Heterocarpus affinis (Faxon, 1893) PANDALIDAE DECAPODA Gamberone malese Trachypenaeus malaiana (Balss, 1933) PENAEIDAE DECAPODA Granchio cinese Eriocheris sinensis (Milne Edwards, 1853) GRAPSIDAE BRACHYURA Granchio indopacifico Portunus trituberculatus (Miers, 1876) DECAPODA PORTUNIDAE Lingua Cynoglossus cynoglossus (Hamilton, 1822) CYNOGLOSSIDAE PLEURONECTIFORMES Lumachino Melarhaphe neritoides (Linneo, 1758) NASSARIIDAE NEOGASTEROPODAE Lumachino Nassarius reticulatus (Jeffreys, 1867) NASSARIIDAE NEOGASTEROPODAE Lumacone spinoso Cassidaria echinophora (Linneo, 1758) CASSIDAE CAENOGASTEROPODA Lutiano filamentoso Pristipomoides filamentosus (Valenciennes, 1830) LUTJANIDAE PERCIFORMES Mazzancolla del Pacifico Farfantapenaeus californiensis (Holmes, 1900) PENAEIDAE DECAPODA Mazzancolla tropicale Farfantepenaeus brevirostris (Kingsley, 1878) PENAEIDAE DECAPODA Mazzancolla tropicale Litopenaeus vannamei (Boone, 1931), ex Penaeus vannamei LITOPENAEIDAE DECAPODA Melù australe Micromesistius australis (Norman, 1937) GADIDAE GADIFORMES

11 Miro Echelus myrus (Linneo, 1758) OPHICHTHIDAE ANGUILLIFORMES Murice comune Bolinus brandaris o Murex brandaris (Linneo, 1758) MURICIDAE NEOGASTEROPODAE Murice del Pacifico Trophon spp. MURICIDAE NEOGASTEROPODA Nasello atlantico o Merluzzo atlantico Patagonotothen ramsay (Regan, 1913) NOTOTHENIIDAE PERCIFORMES Palombo Mustelus canis (Mitchill, 1815) TRIAKIDAE CARCHARHINIFORMES Passera del pacifico Hippoglossoides elassodon (Jordan e Gilbert, 1880) PLEURONECTIDAE PLEURONECTIFORMES Ombrina atlantica Cynoscion guatucupa (Cuvier, 1830) SCIAENIDAE PERCIFORMES Pesci spatola Polyodontidae spp. POLYODONTIDAE ACIPENSERIFORMES Rana pescatrice atlantica Lophius gastrophisus (Miranda-Ribeiro, 1915) LOPHIIDAE LOPHIIFORMES Razza stellata Amblyraja radiata (Donovan, 1808) RAJIDAE RAJIFORMES Scrofanotto Scorphaena notata (Rafisesque, 1810) SCORPAENIDAE SCORPAENIFORMES Scrofanotto Scorpena ustolata (Lowe, 1841) SCORPAENIDAE SCORPAENIFORMES Seppia pizzuta Sepia orbignyana (Férussac, 1826) SEPIIDAE TEUTHOIDEA Smeriglio del Pacifico Lamna ditropis (Hubbs e Follett, 1947) LAMNIDAE SQUALIFORMES Sogliola adriatica Pegusa impar (Bennett, 1831) SOLEIDAE PLEURONECTIFORMES Sogliola egiziana Solea aegyptiaca (Chabanaud, 1927) SOLEIDAE PLEURONECTIFORMES Sogliola indopacifica Paraplagusia bilineata (Bloch, 1787) CYNOGLOSSINAE PLEURONECTIFORMES Squalo portoghese Centroscymnus coelolepis (Barbosa du Bocage e Brito DALATIIDAE SQUALIFORMES Capello, 1864) Tordo nero Labrus merula (Linneo, 1758) LABRIDAE PERCIFORMES Tordo pavone Symphodus tinca (Linneo, 1758) LABRIDAE PERCIFORMES Totano volante Ommastrephes bartramii (Lesueur, 1821) OMMASTREPHIDAE DECAPODA Totano volante Todaropsis eblanae, (Ball, 1841) OMMASTREPHIDAE DECAPODA Trigone viola Pteroplatytrygon violacea (Last e Compagno, 1999) DASYATIDAE RAJIFORMES Vongola cilena Mulinia edulis (King, 1931) MACTRIDAE VENEROIDA

12 Fao-Picture Seafood mag.- Picture

13 Le frodi con implicazioni COMMERCIALI Cod..e simili

14 Molva (ling) Baccalà (cod)

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17 Regolamento (CE) n. 1332/2005 ELASMOBRANCHII (Squali e razze) Rhincodon typus - Squalo balena Carcharodon carcharias - Squalo bianco Cetorhinus maximus - Squalo elefante

18 Le frodi con implicazioni sanitarie Fao -Pictures

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20 COMPLESSO UROFORO (estremità colonna vertebrale) Courtesy Dr. C. Pellegrino A: Pesce palla; B: Gallinella; C: Rana pescatrice I.P.: ossa ipurali; P.A.: paraipurale; E.P.: epiurale; N.S.: neurospina; E.S.: ematospina; C: centro vertebrale.

21 Maggio USA

22 FDA News FOR IMMEDIATE RELEASE P07-91 May 24, 2007 Media Inquiries: Consumer Inquiries: 888-INFO-FDA FDA Warning on Mislabeled Monkfish Fish Believed to be Puffer Fish; Contains Deadly Toxin The Food and Drug Administration (FDA) is warning consumers not to buy or eat imported fish labeled as monkfish, which actually may be puffer fish, containing a potentially deadly toxin called tetrodotoxin. Eating puffer fish that contain this potent toxin can result in serious illness or death. Tetrodotoxin is not destroyed by common food preparation or storage, such as cooking or freezing. Monkfish do not contain tetrodotoxin. The product was imported and distributed by Hong Chang Corp., Santa Fe Springs, Calif.

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24 Pesce balestra (trigger fish)

25 FAUNA LESSEPSIANA DATI CIESM Alepes djedaba (1927) Apogon nigripinnis (1947) Apogon queketti (2006) Asterina burtoni (1966) Atherinomorus lacunosus (1902) Callionymus filamentosus (1953) Crenidens crenidens (1970) Cynoglossus sinusarabici (1953) Dussumieria acuta (1953) Epinephelus coioides (1969) Epinephelus malabaricus (1969) Etrumeus teres (1963) Fistularia commersonii Fulvia fragilis Ferosagitta galerita (2003) Hemiramphus far (1927) Herklotsichthys punctatus (1976) Himantura uarnak (1955) Hippocampus fuscus (2002) Hyporhamphus affinis (1967) Hypselodoris infucata Lagocephalus sceleratus (2005) Lagocephalus spadiceus (1953) Lagocephalus suezensis (1977) Leiognathus klunzingeri (1931) Leonnates persicus Liza carinata (1971) Lutjanus argentimaculatus (1977) Monishia ochetica (1927) Muraenesox cinereus (1982) Nemipterus randalli (2006) Oxyurichthys papuensis (1983) Pampus argenteus (1896) Papilloculiceps longiceps (1990) Paraexocoetus mento (1935) Pelates quadrilineatus (1970) Pempheris vanicolensis (1979) Petroscirtes ancylodon (1989) Platycephalus indicus (1953) Plotosus lineatus (2002)

26 Lagocephalus spadiceus (Pesce coniglio) Origine: Indopacifico > Mar Rosso (dati CIESM)

27 Sphoeroides pachygaster (Pesce palla) Origine: Indopacifico > Mar Rosso (dati CIESM)

28 Lagocephalus sceleratus Città di Suez: 8 decessi nel 2004 (Zaki e Mossa, 2005) Fishbase-picture

29 Fishbase map Lagocephalus sceleratus > SUEZ channel

30 Courtesy dr. Maurizio Mambelli ASL Forlì

31 Courtesy dr. Maurizio Mambelli ASL Forlì

32 Fishbase picture Ruvettus pretiosus

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35 Salpa

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37 Sigano

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39 Pesce serra invece di branzino istamina!

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41 La diagnostica di laboratorio

42 Isoelectrofocusing (IEF) _ + + pi: 5.2 pi: 9.0 ddp

43 XIPHIAS GLADIUS

44 PCR-based techniques La reazione a catena della polimerasi consente di isolare e moltiplicare frammenti di DNA dei quali si conosca la sequenza delle sue porzioni iniziali e terminali Utilizza un enzima termostabile (Taq polimerasi) in grado di elongare un oligonucleotide di innesco di nucleotidi (primer) Ripetizione di cicli costituiti ognuno da tre fasi: 1 Denaturazione 2 Appaiamento dei primers 3 Elongazione Le fasi del ciclo sono scandite dalla variazione di temperatura del sistema operata in termociclatori Immagine PCR Reazione esponenziale Alla fine della reazione si avranno milioni di copie della sequenza target di partenza

45 Esempio: metodica in uso presso l IZSVe per l identificazione di Xiphias gladius Questa metodica prevede l utilizzo di due coppie di primers: XP1 specifica per X. gladius produce una banda di 211bp CONTROL 12S universale produce una banda di 183 bp

46 Esempio: metodica di PCR real-time con sonde Taqman in uso all IZSVe per identificazione della famiglia dei Gadidi Coppia di primers specifici per un tratto del cyt B di 75 bp della famiglia Gadidae Sonda Taqman di 29 bp marcata al 5 5 con Hex (fluoroforo)) e al 3 3 con TAMRA (quencher) Cicli soglia superiori a 32 vengono considerati negativi Gadus Theragra chalcogramma Merluccidi

47 Sequenziamento Ci consente di determinare la sequenza dei nostri amplificati Massimo dell informazione possibile Viene utilizzata correntemente dal nostro istituto in fase di allestimento di test di identificazione e per conferma in casi dubbi Metodo di elezione per valutazioni di tipo filogenetico Esistono varie metodiche di sequenziamento La più utilizzata è quella che sfrutta la chimica dei terminatori dideossi con separazione tramite elettroforesi capillare in sistemi automatizzati ( bp) Questo metodo è laborioso, costoso e operato in apparati molto costosi

48 Pyrosequencing E`una tecnica di sequenziamento per sintesi che sfrutta una cascata enzimatica perfettamante sincronizzata Permette di sequenziare in modo accurato frammenti di DNA lunghi fino bp Consente di determinare la similarità delle sequenze ottenute con quelle presenti in un data-base locale Metodo veloce, con costi per campione limitati e operato in un apparato di costo ragionevole

49 Metodi per differenziare pesce fresco e pesce decongelato e loro utilizzo ai fini del controllo ufficiale Elena Teneggi, Luca Fasolato, Emanuele Cencetti, Franco Mutinelli

50 Esame Sensoriale Aspetto esteriore METODI PER IDENTIFICARE IL PRODOTTO DECONGELATO Esame organolettico Esami di Laboratorio (Fisiologici; Chimici; Fisici) Istologia (emolisi; alterazione fibre muscolari) Attività enzimatica (cellulari e mitocondriali) Metodi impedenzometrici (Fish Tester; Torrymeter) Metodi spettroscopici (NIRs; Fluorescenza)

51 Metodiche in prova Metodi rapidi di screening Spettroscopia a Fluorescenza nell Ultravioletto Spettroscopia nel vicino infrarosso (NIRs; near infrared reflectance spectroscopy) Metodo di Conferma Analisi istologica del tessuto muscolare

52 TECNICA ISTOLOGICA La prova istologica su tessuto muscolare permette di osservare nel tessuto sottoposto a congelamento caratteristiche lesioni istologiche (es. vacuoli) determinate dalla formazione dei cristalli di ghiaccio nell interno delle fibre muscolari : Alterazioni a spazi cistici all interno delle fibre Presenza di materiale amorfo eosinofilico Colorazione con ematossilina/eosina, una delle più comuni in laboratorio: l'ematossilina, basica, colora il nucleo in blu, l'eosina, acida, colora il citoplasma in rosa.

53 Fresco Congelato Congelato Congelato Branzino

54 Fresco Congelato Congelato Congelato Nasello

55 TECNICA NIRS La tecnica NIRS ( Near Infrared Reflectance Spectroscopy) viene oggi suggerita quale metodica rapida ed economica per: Caratterizzazione della qualità e freschezza Determinazione del valore nutrizionale Ausilio alla Tracciabilità e Autenticazione di prodotto Essa sfrutta la capacità dei composti organici di interagire con la radiazione luminosa (capacità di assorbire, trasmettere e riflettere la radiazione elettromagnetica) del vicino infrarosso e di correlarla a specifici parametri chimici, reologici e sensoriali.

56 Media degli spettri NIRs 2.5 orata fresco congelato absorbance wavelenghts

57 Spettroscopia a fluorescenza La tecnica spettroscopica a fluorescenza nell ultravioletto è stata brevettata principalmente per: Determinazione della tenerezza della carne Caratterizzazione della freschezza del pesce Ausilio alla Tracciabilità e Autenticazione di prodotto E un metodo non invasivo che fornisce informazioni sulle molecole fluorescenti (Fluorofori es. Triptofano, aminoacidi aromatici, acidi nucleici), presenti nei campioni biologici, la cui potenzialità discriminante, nel caso in esame, è stata attribuita allo spettro di fluorescenza del NADH (nicotinamide adenindinucleotide).

58 Istologia VANTAGGI E SVANTAGGI VANTAGGI Metodica consolidata Largamente applicabile a molti laboratori Alterazioni evidenti SVANTAGGI Tempi Sostanze tossiche Addestramento operatore Valutare eventuali differenze di specie

59 VANTAGGI E SVANTAGGI Tecniche Spettroscopiche VANTAGGI Tempi rapidi Poca o nessuna preparazione del campione Brevetti trasportabili Le performance aumentano all aumentare di N SVANTAGGI Elaborazione e studio dei dati Costo della strumentazione da laboratorio Necessitano di curve standard (alto numero di campioni standard) Valutare eventuali differenze di specie

60 CONCLUSIONI Mettere a punto un sistema sensibile (in grado di identificare con sicurezza i campioni positivi) e specifico In grado di escludere con sicurezza i campioni negativi Valutare l utilizzo di tecniche di screening in abbinato a tecniche di conferma, specie su campioni reputati dubbi.

61 GRAZIE! Fao-Picture