POTENTE. INTUITIVO. PERSONALIZZABILE. THE NEW STAR OF DEL BENCHTOP FLOW CYTOMETRY

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1 POTENTE. INTUITIVO. PERSONALIZZABILE. THE NEW STAR OF DEL BENCHTOP FLOW CYTOMETRY

2 ACEA Fondata nel 2002, ACEA Biosciences, Inc. sviluppa piattaforme di analisi cellulare all'avanguardia per la ricerca scientifica. Più di strumenti di analisi cellulare ACEA vengono utilizzati dai ricercatori di tutto il mondo per una vasta gamma di applicazioni dalla ricerca allo sviluppo di nuovi farmaci. ACEA ha lanciato il sistema xcelligence real-time e label-free nel 2008, e continua a sviluppare nuove tecnologie. ACEA fornisce un qualificato servizio clienti e supporto tecnico. NOVOCYTE Citofluorimetro dalle alte prestazioni, per tutti Il citofluorimetro NovoCyte soddisfa l'intera gamma delle esigenze legate alle analisi cellulari multiparametriche. ACEA offre ai ricercatori un citofluorimetro dalle alte prestazioni ad un costo contenuto grazie alla piattaforma NovoCyte. Il sistema NovoCyte è: Potente - Fino a 15 parametri rilevati con maggiore sensibilità e risoluzione. Intuitivo - Manutenzione dello strumento automatizzata e capacità di analisi avanzata dei dati per un migliore utilizzo. Personalizzabile - Da 1 a 3 opzioni laser, filtri intercambiabili, opzioni multiple di campionamento e formati di analisi flessibili. ALTE PERFORMANCE AD UN PREZZO ACCESSIBILE

3 CARATTERISTICHE PRINCIPALI STRUMENTI Voltaggio PMT ottimizzato & range di rilevamento dinamico a 24 bit Fornisce un range dinamico di 10 volte maggiore per la rilevazione e l'elaborazione offrendo una gamma più ampia degli altri citofluorimetri. L ampia gamma di intensità di segnale fluorescente e di scattering elimina la necessità di complicate e laboriosoe regolazioni della tensione di PMT. L'acquisizione dei dati è load-and-go. Canali di rilevamento di fluorescenza configurabili per una maggiore flessibilità La possibilità di aggiornare lo strumento aggiungendo laser di diverse lunghezze d'onda ne consente la personalizzazione. Filtri intercambiabili e specchi dicroici per ampliare i canali di fluorescenza aumentano le opzioni di rilevamento a disposizione degli utenti. 13 Canali Fluorescenti di detection: Opzioni Multi-Laser offrono flessibilità di scelta (405nm, 488 nm, 640nm) Personalizzare lo strumento per soddisfare le esigenze di rilevamento con opzioni laser blu, rosso e viola. Il sistema può essere aggiornato e i requisiti analitici potenziati senza bisogno di acquistare altri strumenti. Laser a stato solido garantiscono alta qualità e illuminazione ottica estremamente stabile. Sistema fluidico volumetrico per una maggiore precisione e facilità di manutenzione Conteggio assoluto diretto, senza bisogno di aggiunta di beads. Sensori di pressione accurati per monitorare lo stato del fluido in tempo reale, fornendo messaggi di allerta in caso di pressioni elevate e anormali (con possibile ostruzione del flusso) per mantenere lo strumento in uno stato ottimale, consentendo un acquisizione affidabile e precisa dei dati. Il lavaggio automatizzato della SIP (sonda di iniezione del campione) successivo all'acquisizione del campione minimizza il carryover del campione e aumenta la capacità di rilevare eventi rari. Design Ottico Innovativo & Signal Detection avanzata Fascio ottico shaping indipendente (patent pending) e sistema di raccolta della luce che massimizza l'efficienza di rilevamento del segnale, aumentando la sensibilità e la risoluzione per ogni canale di fluorescenza. L allineamento ottico fisso elimina la necessità di manutenzione e regolazione del sistema ottico quotidiana, fornendo funzionamento conveniente e stabilità a lungo termine. Scatter di eccelsa qualità per la rivelazione di piccole particelle e risoluzione di prima qualità Acquisizione dati ad alta velocità ( eventi al secondo). 1 2

4 CARATTERISTICHE CHIAVE DEL SOFTWARE E xperiment Analysis Design L Experiment Manager fornisce una visione schematica del processo di analisi del campione. Questo permette di accedere alle impostazioni del citofluorimetro, della matrice di compensazione, della generazione di report e dell'analisi dei dati. Campioni multipli possono essere analizzati con le stesse impostazioni grazie ad una semplice funzione di drag-and-drop del template. Acquisizione pre e post compensazione Risultati di compensazione istantanei possono essere raggiunti semplicemente regolando la scala di compensazione, consentendo così una compensazione rapida e precisa ed eliminando noiose prove e aggiustamenti d errore regolazioni dei coefficienti della matrice di compensazione. Scaling Bar Prima della compensazione Dopo la compensazione Quick Compensation Plot Funzioni d Analisi dei dati Automatizzate & Versatili Il potente software NovoExpress permette un efficiente acquisizione dei dati,analisi e produzione di report. Il software fornisce modelli di analisi flessibili e strumenti di plottaggio, offrendo una maggiore efficienza di analisi dei dati. Import & Export rapido di file di dati I file FCS (Citometria a flusso Standard) 3.0 possono essere importati per l'analisi con NovoExpress. I dati possono anche essere esportati come file FCS 3.0 per ulteriori analisi in un software di terze parti, o come file CSV (Comma Separated Value) per l'analisi in programmi come Microsoft Excel. La pompa di precisione volumetrica del NovoCyte consente una conta assoluta diretta senza la necessità di biglie di conteggio di riferimento. Un clic permette di calcolare la concentrazione del campione. 3 4

5 NOVOCYTE ASSICURA PRESTAZIONI ECCEZIONALI Alta sensibilità e rilevamento ad alta risoluzione L alta efficienza di raccolta della luce assicura un rilevamento affidabile di particelle sub-micron e segnali dim. Utilizzando un design ottico innovativo per la raccolta della luce PMT e di alta qualità, i segnali di fluorescenza vengono rilevati in modo efficiente con un rapporto segnale-rumore eccezionalmente alto, garantendo una elevata sensibilità di rilevazione per campioni positivi deboli e piccole particelle. Bangs Laboratories standard NIST dimensione delle particelle tracciabile Alta Risoluzione della fluorescenza del segnale migliora la precisione della rilevazione Design avanzato ottica e fluido del sistema, componenti di qualità premier, e gli algoritmi di elaborazione del segnale innovative garantiscono collettivamente estrazione accurata dei parametri di rilevazione con sempre bassa variazione. Il potente rilevamento del segnale, l alta capacità d'analisi dei dati, e un software dall interfaccia intuitiva garantiscono una produzione di dati veloce, economica e accurata ed un analisi affidabile. Immunofenotipizzazione L immunofenotipizzazione identifica rapidamente i tipi di cellule candidati, sotto-classi e funzioni. Il citofluorimetro NovoCyte può essere utilizzato per il multi-parametro linfociti conteggio subpopolazione e la fenotipizzazione, la differenziazione T helper dei linfociti e studio funzionale, nuova identificazione sub-popolazione, malattia specifica identificazione sub-popolazione, e la rilevazione marcatore superficie cellulare. T sottoinsiemi Analysis Spherotech 8-peak Rainbow Beads T / B / NK Fenotipizzazione Conteggio assoluto diretto basato sul volume, senza necessità di Beads Con una pompa a siringa ad elevata precisione è possibile controllare il volume del campione iniettato e minimizzare la perdita di cellule. NovoCyte permette un conteggio preciso e diretto delle cellule senza la necessità di sfere di conteggio. Linfociti analisi sub-popolazione: Sangue periferico umano normale è stato macchiato con T subset (CD3 / CD4 / CD8 / CD45) o T / B / NK cocktail con globuli rossi lisati con la soluzione di lisi RBC (/ CD19 / CD / CD45 CD3).

6 NOVOCYTE ASSICURA PRESTAZIONI ECCEZIONALI (CONTINUA) 10-Color Analysis of T Cell Subpopulations Comprendere la funzione e l'interazione dei componenti molecolari e cellulari del sistema immunitario richiede un'analisi multiparametrica. Il citofluorimetro NovoCyte, con il suo innovativo design di rilevamento ottico, può rilevare simultaneamente fino a 15 parametri in un singolo esperimento, consentendo l'identificazione e lo studio dettagliato delle sottopopolazioni di cellule in campioni di sangue. Antibody Specificity Format Laser (Excitation) FL Channel on NovoCyte Filter (Emission) CD25 BV nm VL1 445/45 CD3 BV nm VL2 530/30 CCR7 BV nm VL5 675/30 CD45RA BV nm VL6 780/60 CD4 FITC 488nm BL1 530/30 CD127 PE 488nm BL2 585/40 Tabella 1. Expanded Detection Channel Capabilities con il sistema a tre laser: La tabella riporta un esempio di combinazione di anticorpi a 10 colori possibile utilizzando il sistema a 3 laser che include 4 coloriper il laser 405nm, 4 per il laser 488nm, e 2 per il 640nm. CD8 PerCP 488nm BL4 675/30 CD45RO PE-Cy7 488nm BL5 780/60 CD62L APC 640nm RL1 675/30 CD45 APC-Cy7 640nm RL2 780/60 F E Sol Analisi del ciclo cellulare Le normali cellule somatiche umane sono diploidi e contengono una quantità costante di DNA. Durante la progressione del ciclo cellulare, la sintesi del DNA produce un raddoppio del contenuto di DNA totale, seguito dal ripristino del contenuto di DNA normale dopo la mitosi. Con il citofluorimetro NovoCyte si può effettuare una dettagliata analisi del ciclo cellulare per comprendere la differenziazione delle cellule tumorali, la trasformazione delle cellule e l'interazione cellule-compound. A B C D CD4+ cell subpopulations analysis: Normal human whole blood was stained with a cocktail of 10 mabs (see Table 1). Cells were analyzed on ACEA NovoCyteTM 3000 (Cat# ). In this figure, CD4+ T lymphocytes (lower right quadrant of Plot C) were further analyzed. CD4+ Treg cells express high levels of CD25 and low levels of CD127 (Plot D). The CD45RO - RA+ (upper left quadrant of Plot E) population generally represents naïve/effector CD4+ T cells, which can be further divided into naïve T and effector T cells based upon different levels of CD62L and CCR7 expression (Plot F). CD45RO+RA - cells are mainly activated T cells and memory T cells (lower right quadrant of Plot E). The memory T cells can be further divided into central memory T cells and effector memory T cells by analyzing expression levels of CD62L and CCR7 (Plot G). A549 cell cycle analysis with PI: After treatment with 10 ìm MG132 or 500ìM 5-FU for 16 hours, A549 cells were analyzed for cell cycle distribution with the ACEA Novocyte flow cytometer. With the NovoExpress built-in cell cycle analysis module, the plot shows cells in G0/G1 phase (green), S phase (yellow), and G2/M phase (blue). Compared to normal untreated cells, MG132 treated cells were arrested at G2/M phase, while 5-FU treated cells were arrested at G0/G1 phase. 7 8

7 FL Canale Violet BrilliantTM 421 DAPI AmCyan Qdot 605 Qdot 655 Qdot 800 Fluorescein FITC Alexa Fluor 488 GFP PI PE PE-CyTM 5 PE-Alexa Fluor 610 PE-Texas Red PerCP 7-AAD PE-CyTM 7 APC Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 700 APC-CyTM 7 CV MFI SEMPLICITÀ D'USO MIGLIORATA Convenienza di Operazioni & Manutenzione Grazie al monitoraggio dello stato fluidico in tempo reale dei sensori di pressione, la possibilità di ostruzioni è notevolmente ridotta, consentendo l'acquisizione dei dati affidabile e precisa. L automatizzazione della pulizia e della decontaminazione semplifica la manutenzione di routine. Un semplice click avvia il processo automatizzato di pulizia e di decontaminazione e rimuove efficacemente i residui di campioni dal percorso della fluidica, facendo risparmiare tempo prezioso agli utenti che non devono preoccuparsi di routinarie operazioni di pulizia e decontaminazione manuale. SOSTEGNO ALLA VOSTRA RICERCA Supporto Tecnico Il nostro team di supporto tecnico è a disposizione per fornire assistenza sul campo o telefonica. Composto da esperti altamente qualificati in citofluorimetria, il nostro team saprà rispondere alle domande relative al NovoCyte e alle applicazione di supporto. ACEA assicura il successo nella vostra ricerca fornendo competenze tecniche e le conoscenze per mantenere l'alto livello di prestazioni del sistema NovoCyteTM. Il nostro team tecnico offre un servizio affidabile per mantenere produttività, precisione e alte prestazioni per tutto il ciclo di vita dello strumento. Full Warranty e Extended Warranty includono: Un kit annuale dimanutenzione del sistema della fluidica Aggiornamenti del software rilasciati nel corso della durata della garanzia Visite di controllo illimitate durante la durata del contratto Risposta garantita sul posto entro le 48 ore dalla richiesta del servizio di emergenza Assistenza telefonica illimitata per lo strumento senza costi aggiuntivi Garanzia Il test QC automatizzato fornisce informazioni sulle prestazioni dello strumento giorno per giorno. L analisi richiede solo un paio di minuti, garantendo all utente maggior tranquillità ESEMPI DI FLUORESCENZE COMPATIBILI Controllo di qualità integrato I grafici Levey-Jennings consentono la visualizzazione nel tempo dei valori QC giornlieri. Campionatore automatico opzionale per High-Throughput. Pacific BlueTM 405nm Pacific ArancioneTM 488nm 640nm Analisi multipla Campioni Il campionatore modulare è compatibile con provette singole (fino a 24) e con piastre da 24/96 pozzetti, consentendo una modalità di caricamento versatili e una maggiore produttività / / / / / / 6 0 * Contatta Prodotti Gianni per l'elenco completo 9 10

8 Strumento (include Workstation e NovoExpress Software) Modello Configurazione Laser Descrizione Codice ACEA NovoCyte TM 1000 Laser blu (488 nm) 3 colori, FSC, SSC ACEA NovoCyte TM 2000 Laser Blu / rosso (488/640 nm) 4 colori, FSC, SSC ACEA NovoCyte TM 2060 Laser Blu / rosso (488/640 nm) 6 colori, FSC, SSC ACEA NovoCyte TM 3000 Laser Blu / rosso / viola (488/640/405 nm) 13 colori, FSC, SSC Configurazione Laser Procedura di allineamento ottico Spazialmente fasci separati con macchie ellittiche 10 x 80 pm Fisso, nessun allineamento dell'operatore richiesto Accessori, Reagenti e kit Cella di flusso 170 x 290 pm cella di flusso quarzo rettangolare FSC / SSC Risoluzione FSC: 12:05; SSC: 12:02 Descrizione Codice Dimensione cella 0,2-50 pm ACEA NovoSamplerTM Fluorescenza soglia di sensibilità FITC <75 MESF; PE <50 MESF NovoCyteTM QC Particles (2ml; 50 tests) Fluorescenza Risoluzione <3% CV CEN Filtri Sample Acquisition Tasso Volumetrica conta assoluta precisione Sample Portata Guaina Portata Utente intercambiabile eventi / secondo <5% PL / min 6.5 ml / min Volume aspirazione del campione pl Fluid Capacità Container 3 L fodero, 3 L rifiuti, 500 pulizia ml, 500 ml di decontaminazione Riporto <0,1% Fluidics Manutenzione Parametri Dynamic Range Compensazione Output file di dati Sistema operativo Computer Automatizzata startup, la pulizia, la decontaminazione e lo spegnimento Altezza e Area per FSC, SSC e tutti i canali fluorescenti, Larghezza e Tempo 24 bit; 7.2 decenni scala logaritmica; nessuna necessità di regolazione della tensione PMT Pieno matrice inter-beam, durante o dopo l'acquisizione FCS 3.0; CSV; Rapporti batch Microsoft Windows 7 Professional (64 bit) Software ACEA NovoExpress Garanzie addizionali NovoCyteTM 1-Year Fluidic System Maintenance Kit NovoCyteTM 6-Month Fluidic System Maintenance Kit NovoFlowTM Sheath Fluid (1X; 10L) NovoFlowTM Sheath Fluid (6X; 10L) NovoCleanTM Solution (1X; 500mL) NovoCleanTM Solution (5X; 500mL) NovoRinseTM Solution (1X; 500mL) NovoRinseTM Solution (5X; 500mL) Manual Sample Loading Tubo 12 x 75 mm One-Year Extended Service Warranty for NovoCyteTM One-Laser System Automatic Sample Loading Optional - compatibile con 12 x 75 mm tubo, 1,5 e 2 ml tubi, 24 pozzetti e 96 pozzetti micropiastre Strumento Dimensioni (L x P x H) Strumento Peso Requisiti di alimentazione Requisiti Ambiente 23.6 x 17.7 x 15.4 in (60 x 45 x 39 cm) 86 (39 kg) 100/115/230 VAC, Hz Temperatura: C; Umidità relativa: 80% massima Descrizione 875B B B B B B603 Codice Two-Year Extended Service Warranty for NovoCyteTM One-Laser System One-Year Extended Service Warranty for NovoCyteTM Two-Laser System Two-Year Extended Service Warranty for NovoCyteTM Two-Laser System One-Year Extended Service Warranty for NovoCyteTM Three-Laser System Due anni di garanzia Servizio estesa per System NovoCyteTM Three-Laser

9 TUTTO QUELLO CHE TI SERVE PER CITOFLUORIMETRIA.

10 ENTER A NEW DIMENSION OF SINGLE-CELL ANALYSIS Questo sistema innovativo Affymetrix ebioscience permette di studiare l mrna e proteine con un analisi citofluorimetrica a livello della singola cellula. Il test permette di profilare RNA ed espressione proteica all interno di singole cellule abbattendo il limite tipico della citofluorimetria: rimanere a livello anticorpale della superficie delle cellule. I progetti di ricerca di immunologi, ricercatori che lavorano sulle staminali, oncologi e non solo possono tranne un enorme vantaggio dal PrimeFlow TM. Questo nuovo metodo di analisi impiega una tecnica di fluorescent in situ hybridization (FISH) brevettata, che consente il rilevamento simultaneo fino a un massimo di tre trascritti di RNA in una singola cellula utilizzando un citofluorimetro standard. Il rilevamento dell RNA può essere abbinato all uso di anticorpi coniugati utilizzati a livello della superficie cellulare o intracellulare per una migliore comprensione delle dinamiche. Il test utilizza gli stessi principi del ViewRNA Affymetrix (ex Panomics), prodotto collaudato e ampiamente citato in letteratura, progettato per l'analisi microscopica di RNA in cellule e tessuti. PrimeFlowTM combina oligonucleotidi specifici marcati con segnale ramificato (bdna) per rilevare con precisione l'espressione genica a livello di singola cellula. L espressione di RNA abbinata alla rilevazione della proteina genera dati multi parametrici in popolazioni cellulari eterogenee e offre informazioni dettagliate a livello della singola cellula. Al contrario, microarray e sequenziamento sono in grado di fornire dati completi di espressione genica a livello globale del campione, senza poter rivelare effetti a livello di specifici sottoinsiemi cellulari. Utilizzando il PrimeFlow RNA Assay, invece, possono essere analizzati i livelli di espressione e trascrizione relativi a cellule specifiche o a sottoinsiemi di cellule, valutando nel tempo la regolazione della trascrizione e l'espressione delle proteine.

11 Tali informazioni uniche e preziose possono rispondere a domande in precedenza senza risposta e avere implicazioni importanti in svariati campi della ricerca. Con PrimeFlow RNA Assay è possibile: Osservare l eterogeneità dell'espressione genica a livello di singola cellula Confrontare la cinetica di RNA e proteina nella stessa cellula Rilevare RNA non codificante in sottoinsiemi cellulari Valutare RNA virale in cellule infettate Analizzare i livelli di espressione di mrna laddove ci sia carenza di anticorpi commerciali Quantificare contemporaneamente fino a 24 proteine in un campione 15μl Selezionare il proprio pannello multiplex scegliendo tra oltre 150 diverse proteine Analizzare su qualsiasi citofluorimetro Disponibile per uomo, topo e ratto Reagenti premiscelati disponibili per i pannelli multiplex I Bead-based Multiplex Immunoassays di Abcam sono progettati per la misurazione quantitativa simultanea di fino a 24 proteine, in un campione da 15 ìl, in un unico pozzetto o vial. Questi test hanno un flusso di lavoro semplice, il lavaggio può essere effettuato con qualsiasi washer e il campione analizzato su qualsiasi citofluorimetro con laser blu (488nm) in grado di rilevare FS, SS, PE e PECy5 (e/o PECy7). I saggi usano 24 diversi set di beads, codificate da due dimensioni e 12 intensità di fluorescenza. L'analisi dei dati è semplice grazie al software raccomandato (FCAP ArrayTM ) o ad altri pacchetti software simili. Disponibili test per oltre 150 proteine human, 50 mouse e 30 rat. I saggi sono compatibili con campioni di cellule surnatanti, siero, plasma, lisati cellulari o tissutali e altri fluidi corporei. Typical Assay Performance Sensitivity (limit of detection) - < 4 pg/ml Quantitation range: o Lower limit - <10 pg/ml o Upper limit - >2,000 pg/ml Standard dose recovery: % Precision: o Intra-assay CV: < 10% o Inter-assay CV: < 20%

12 via Quintiliano, Milano - Tel: PIVA Attenzione, la Partita IVA e variata il 1 gennaio 2015 Solo per ricerca scientifica (RUO). Non utilizzare in procedure diagnostiche ACEA Biosciences, Inc. Tutti i diritti riservati. NovoCyte, NovoExpress, NovoFlow, NovoClean, NovoRinse, xcelligence, e ACEA Biosciences sono marchi di ACEA Biosciences, Inc. negli Stati Uniti e in altri paesi. Tutti gli altri nomi di prodotti e marchi sono di proprietà dei rispettivi proprietari.