PROGRAMMAZIONE DI LABORATORIO: CHIMICA ORGANICA

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1 PROGRAMMAZIONE DI LABORATORIO: CHIMICA ORGANICA VE chimica a.s Teorico: Prof.ssa Gaetana Mirabelli MODULO 0 PREREQUISITI Unità didattica Attività di laboratorio Labora torio UD1 Stereoisomeria 1-Determinazione dell'attività ottica LAB.1 UD2 Glucidi 2-Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca dell amido negli alimenti 3-Riconoscimento di principi nutritivi: Saggio di -Benedict per gli zuccheri riducenti 4-Riconoscimento di principi nutritivi: Saggio di Lugol per l amido LAB.1 MODULO 1 BIOMOLECOLE UD1 Lipidi 5-Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca dei grassi negli alimenti LAB.1 attraverso il cambiamento di colore del KmnmO4 6-Riconoscimento di principi nutritivi: riconoscimento dei grassi negli alimenti UD2 Protidi 7-Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca delle proteine negli alimenti LAB.1 UD3 Acidi nucleici 8-estrazione di DNA da campioni vegetali LAB.1 MODULO 2 LA CELLULA UD1 La cellula 9-osservazione microscopica dei fenomeni osmotici in cellula vegetale 10-cromatografia dei pigmento fotosintetici 11-Osservazione microscopica di epidermide di cipolla 12-osservazione microscopica a fresco di muffe animali 13-osservazione microscopica a fresco di un preparato di protozoi 14-osservazione microscopica di cellule epiteliali della mucosa boccale 15-osservazione microscopica a fresco di batteri presenti in un campione di yogurt 16-osservazione microscopica a fresco di un preparato di lievito di birra 17-osservazione microscopica di ascospore di Sac. Cerevisiae 18-osservazione microscopica mediante colorazione semplice di lievito di birra UD2 Regolazione del metabolismo cellulare LAB.1

2 UD3 La tecnologia genetica MODULO 3 MICROBIOLOGIA INDUSTRIALE UD1 Prodotti ottenibili mediante processi biotecnologici UD2 Crescita dei microrganismi e produzione di metaboliti UD3 Enzimi

3 1) Determinazione dell'attività ottica lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: chimica organicabiochimica e laboratorio- Valitutti Vol. unico pag.425 breve descrizione: Determinazione del potere rotatorio specifico di alcuni glucidi. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore monosaccaridi, disaccaridi e polisaccaridi polarimetro PRECAUZIONI: Nessuna.

4 2) Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca dell amido negli alimenti lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.262 breve descrizione: Campioni alimentari vengono pestati con acqua e l estratto è poi saggiato con iodio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore reattive di Lugol becher cilindro da 100 ml mortaio parafilm pennarello indelebile pinze di legno pipetta da 5 ml spatola bilancia bunsen Cipolla Patata Latte Banana, mela pane PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione al bagno termostatato. Prestare molta attenzione nella fase di preparazione del reattivo di Lugol che deve avvenire sotto cappa aspirante, per evitare di respirarne i fumi, sia durante la fase di riscaldamento dei campioni alla fiamma del bunsen.

5 3) Riconoscimento di principi nutritivi: Saggio di Benedict per gli zuccheri riducenti lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.257 breve descrizione: Scaldando il reattivo di Benedict con uno zucchero riducente il colore del reattivo vira dal blu, al verde, al giallo, al rosso o all arancione a seconda della concentrazione dello zucchero. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore reattive di Benedict becher carta stagnola parafilm pennarello indelebile pipetta di precisione da 1mL puntali blu per micropipetta bagno termostatico bilancia piastra scaldante Amido di patata al 2% Sol. Di glucosio al 6& Sol di maltosio al 6% Sol. di saccarosio al 6% Succo di cipolla PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione al bagno termostatato. Il reattivo di Benedict nella sua formulazione contiene sostanze nocive per inalazione e ingestione oltre che irritanti per la pelle e gli occhi, quindi durante le fasi operative è necessario indossare i guanti di lattice e la mascherina protettiva.

6 4) Riconoscimento di principi nutritivi: Saggio di Lugol per l amido lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.262 breve descrizione: In presenza di amido il reattivo di Lugol vira dal colore bruno-giallastro al blu scuro, mentre non si verifica alcun cambiamento di colore in presenza di monosaccaridi o di disaccaridi. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore reattive di Lugol becher cilindro da 100 ml parafilm pennarello indelebile pipetta di precisione da 1mL puntali blu per micropipetta spatola bilancia cappa aspirante Amido di patata al 2% Sol. di glucosio al 6& Sol di maltosio al 6% Sol. di saccarosio al 6% Succo di cipolla PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione al bagno termostatato. Prestare molta attenzione nella fase di preparazione del reattivo di Lugol che deve avvenire sotto cappa aspirante, per evitare di respirarne i fumi.

7 5) Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca dei grassi negli alimenti attraverso il cambiamento di colore del KmnmO4 lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.289 breve descrizione: Piccole quantità di campione si introducono in provetta con il permanganato di potassio e si osserva l eventuale scomparsa della colorazione violetta. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore KMnO4 1% bisturi mortaio pennarello indelebile pinze di legno pipetta da 5 ml Burro Olio d oliva Olio di semi PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nell uso del bisturi per frammentare i campioni. Il permanganato di potasio è una sostanza corrosiva per gli occhi, la cute e il tratto respiratorio, quindi nell esecuzione dell esperienza è bene indossare i guanti di lattice, protezione oculare abbinata a protezione delle vie respiratorie.

8 6) Riconoscimento di principi nutritivi: riconoscimento dei grassi negli alimenti lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.286 breve descrizione: Campioni di cibo vengono pestati in alcol e il filtrato è poi versato in acqua per vedere se si forma un emulsione. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore isopropanolo becher bisturi imbuto filtro mortaio pennarello indelebile pipetta graduate da 5 ml e 10 ml vetrini da orologio Carne bianca Burro Formaggio Patate PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nell uso del bisturi per frammentare i campioni. L isopropanolo può essere irritante per pelle, occhi e apparato respiratorio. Non respirare. Evitare il contatto con la pelle, usando guanti in lattice.

9 7) Riconoscimento di principi nutritivi: ricerca delle proteine negli alimenti lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.279 breve descrizione: Campioni alimentari vengono pestati con acqua e l estratto è poi saggiato col reattivo del biureto TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore reattive del biureto: solfato di rame pentaidrato, tartrato di sodio e potassio, idrossido di sodio becher cilindro da 100 ml mortaio parafilm pennarello indelebile pipetta graduate da 1 ml, 5 ml e 10 ml spatola bilancia Amido di patata Bianco d uovo Carne bianca Cipolla Fagioli Latte Mela PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nel corretto uso delle sostanze per la preparazione del reattivo al biureto.

10 8) estrazione di DNA da campioni vegetali lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.193 breve descrizione: Estrarre il DNA dalla frutta e osservarlo al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore cloruro di sodio detergente per piatti etanolo succo d ananas becher cilindro graduato colino contenitore per tagliare e pestare la frutta pipette da 10 ml da 20 ml vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio bilancia Frutta a polpa morbida PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Non vi sono sotanze pericolose nell esecuzione dell esperienza.

11 9) osservazione microscopica dei fenomeni osmotici in cellula vegetale lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.190 breve descrizione: Estrarre le clorofilla da foglie di spinaci ed effettuarne la cromatografia su carta. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore soluzione sgrassante alcol-etere soluzione ipertonica di NaCl soluzione ipotonica di NaCl soluzione fisiologica bisturi capsula Petri pinzetta a punta piatta e vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio cipolla PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare anche attenzione all uso del bisturi in quanto potrebbe tagliare. La soluzione sgrassante è infiammabile e i vapori sono nocivi, utilizzare i dispositivi di protezione.

12 10) cromatografia dei pigmento fotosintetici lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.176 breve descrizione: Estrarre le clorofilla da foglie di spinaci ed effettuarne la cromatografia su carta. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora + 1 ora miscela solvente (etere di petrolio 10% - acetone 8%) sabbia becher provettone carta da filtro matita riga forbici mortaio sostegno metallico Foglie di spinaci PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Usare dispositivi di sicurezza (guanti, occhiali) ed operare sotto cappa durante ma manipolazione dell etere di petrolio e acetone.

13 11) Osservazione microscopica di epidermide di cipolla lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.161 breve descrizione: Osservazione al microscopio di epidermide di cipolla senza e con colorazione. TEMPI DI ATTUAZIONE: 2 ore soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione di blu di metilene liquido di lugol microscopio cipolla PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria. Prestare attenzione nella preparazione del liquido di Lugol, che deve svolgersi sotto cappa aspirante per evitare inalazione dei vapori. La soluzione sgrassante è infiammabile, i vapori sono nocivi

14 12) osservazione microscopica a fresco di muffe animali lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.237 breve descrizione: Si preleva unaa piccola quantità di campione degli alimenti e si lasciano inumiditi in un recipiente chiuso. Dopo una settimana si osservano le muffe al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora + 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione di colorante glicerina ago di platino su supporto bacchetta di vetro pinza recipiente con coperchio sacchetto di plastica vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio Campione di origine alimentare (pane, pomodoro limone) PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Non vi sono sostanze pericolose nell esecuzione dell esperienza.

15 13) osservazione microscopica a fresco di un preparato di protozoi lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.243 breve descrizione: Si tiene per una settimana in un flacone chiuso acqua di rubinetto con una manciata di fieno o erba fresca. Si preleva quindi una sospensione del liquido e si osserva al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora + 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione di rosso congo bacchetta di vetro becher vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio Lievito di birra Fieno o erba fresca PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Non vi sono sostanze pericolose nell esecuzione dell esperienza.

16 14) osservazione microscopica di cellule epiteliali della mucosa boccale lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.199 breve descrizione: Si prelevano cellule della mucosa boccale con uno stuzzicadenti, si colorano e si vedono al microspopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione di blu di metilene liquido di Lugol bacchetta di vetro stuzzicadenti vaschetta da colorazione vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio Cellule mucosa boccale PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nella preparazione del liquido di Lugol, che deve svolgersi sotto cappa aspirante per evitare inalazione dei vapori.

17 15) osservazione microscopica a fresco di batteri presenti in un campione di yogurt lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.220 breve descrizione: Si preleva da un vasetto di yogurt una piccola quantità di campione e si osserva al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere ansa di platino bacchetta di vetro parafilm vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio bunsen Vasetto di yogurt PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nella fase di utilizzo della fiamma del Bunsen, mantenere lontana da fiamme libere la soluzione sgrassante.

18 16) osservazione microscopica a fresco di un preparato di lievito di birra lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.224 breve descrizione: Si preleva da un cubetto di lievito di birra una piccola quantità di campione e si osserva al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere bacchetta di vetro bisturi parafilm pinza vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio Lievito di birra glucosio PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nella fase di utilizzo del bisturi.

19 17) osservazione microscopica di ascospore di Sac. Cerevisiae lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.252 breve descrizione: Si preleva una porzione di colonia sviluppata su Agar glucosio acetato, si stempera con acqua e si pone su vetrino. Si colora il preparato con verde malachite, poi si aggiunge il contrastante fucsina ei osserva al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione di fucsina soluzione acquosa di verde malachite al 5% ansa di platino bacchetta di vetro pinza vaschetta di colorazione vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio Coltura di Sac. Cerevisiae glucosio PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente.

20 18) osservazione microscopica mediante colorazione semplice di lievito di birra lab.1 TESTO DI RIFERIMENTO: laboratorio di microbiologia di M. Capurso Vol. 1 pag.248 breve descrizione: Si preleva da un cubetto di lievito di birra una piccola quantità di campione, si pone su due vetrini di cui uno si colora con blu di metilene e l altro con soluzione di Lugol. Quindi si osserva al microscopio. TEMPI DI ATTUAZIONE: 1 ora soluzione sgrassante di alcol-etere soluzione idroalcolica di blu di metilene liquido di Lugol ansa di platino bacchetta di vetro becher bisturi parafilm pinza vetrini portaoggetti e coprioggetti microscopio bilancia Lievito di birra glucosio PRECAUZIONI: Manipolare con attenzione la vetreria, che se si rompe diventa tagliente. Prestare attenzione nella fase di utilizzo del bisturi. Preparare il liquido di Lugol sotto cappa per evitare l inalazione dei vapori che sono nocivi.

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