TSH neonatal screening ELISA
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- Giovanni Perrone
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1 Istruzioni per l Uso TSH neonatal screening ELISA Test immunoenzimatico per la determinazione quantitativa diagnostica in vitro dell ormone stimolante la tiroide (TSH) in gocce di sangue di neonato umano. Per lo screening neonatale dell ipotiroidismo congenito (IC). RE55105 / RE / C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)
2 1. USO PREVISTO Test immunoenzimatico per la determinazione quantitativa diagnostica in vitro dell ormone stimolante la tiroide (TSH) in gocce di sangue di neonato umano. Per lo screening neonatale dell ipotiroidismo congenito (IC). 2. SOMMARIO E SPIEGAZIONI La tireotropina umana (ormone stimolante la tiroide, htsh) è una glicoproteina sintetizzata e secreta dal lobo anteriore dell ipofisi. Essa regola e stimola la tiroide a produrre T4 e T3. Attraverso un meccanismo di feedback negativo, il deficit di ormoni tiroidei stimola la secrezione di htsh. Il livello di htsh è influenzato anche dall ormone rilasciante l htsh (TRH), un tripeptide prodotto dall ipotalamo. Il malfunzionamento di una qualsiasi parte del sistema tiroideo in via di sviluppo nel neonato può causare un ipotiroidismo congenito (eccesso di TSH). L ipotiroidismo congenito (IC) rappresenta una delle cause prevenibili più comuni di ritardo mentale e si verifica in circa 1 bambino su 4000 nel mondo. La diagnosi clinica viene effettuata in <5% dei neonati con IC a causa dell assenza di sintomi e segni specifici nel primo periodo neonatale. In assenza di un trattamento tempestivo, sono inevitabili ritardo mentale irreversibile, mancata crescita e svariati deficit neuropsicologici. Queste caratteristiche dell IC indicano che è essenziale diagnosticare e trattare la patologia il più precocemente possibile. Da quando è stato sviluppato lo screening pilota dell ipotiroidismo congenito in Québec e a Pittsburgh nel 1974, lo screening neonatale per l ipotiroidismo congenito è diventato abituale in tutti i Paesi sviluppati del mondo e nella maggior parte di quelli dell Europa dell Est ed è in crescita in molti Paesi in via di sviluppo. [1, 2, 3, 4, 5]. 3. PRINCIPIO DEL TEST Lo screening neonatale del TSH è un test immunoenzimatico in fase solida di tipo a sandwich, basato su due anticorpi monoclonali con diversa specificità degli epitopi verso la molecola del TSH. Uno di questi anticorpi è coniugato con la biotina, l altro è immobilizzato sulla superficie interna dei pozzetti. Le molecole di TSH del campione si legano all anticorpo immobilizzato e al coniugato anti-tsh-biotina. I pozzetti vengono quindi lavati con un tampone per rimuovere il materiale non legato alla loro superficie interna e a ogni pozzetto viene aggiunto il coniugato enzimatico. I pozzetti vengono lavati nuovamente per rimuovere eventuale coniugato non legato all anticorpo coniugato e a ogni pozzetto è aggiunto il substrato. L intensità del colore sviluppato dopo l incubazione del substrato è proporzionale alla quantità di antigene nel campione. I risultati dei campioni possono essere determinati direttamente usando la curva di calibrazione. 4. AVVERTENZE E PRECAUZIONI 1. Solo per uso diagnostico in-vitro. Solo per uso professionale. 2. Leggere attentamente le istruzioni prima di iniziare il test. Utilizzare il manuale fornito nel kit. Assicurarsi di aver compreso tutte le indicazioni. 3. In caso di danneggiamento del kit contattare IBL o il Vostro fornitore entro 1 settimana dal ricevimento della merce. Non utilizzare i componenti danneggiati ma conservarli per fornire prove del danno assieme al reclamo che inoltrerete al produttore/fornitore. 4. Rispettare lotto e scadenze. Non scambiare o mescolare tra loro reagenti di lotti diversi. Non usare i reagenti scaduti. 5. Attenersi alle Buone Pratiche di Laboratorio e alle direttive di sicurezza. Indossare camici, guanti in lattice e occhiali protettivi se necessario. 6. Alcuni reagenti del kit contengono sostanze pericolose che potrebbero causare irritazioni a pelle ed occhi. Consultare la sezione MATERIALE FORNITO e le etichette per i dettagli precisi. Schede di sicurezza del prodotto sono disponibili sul sito web IBL o su richiesta specifica ad IBL/fornitore. 7. I reagenti preparati e usati e le sostanze chimiche del kit devono essere trattati come rifiuti pericolosi secondo le normative di sicurezza e la legislazione vigente nel Paese in cui il prodotto viene usato. 8. Il personale delle pulizie dev essere informato dal personale specializzato sui possibili rischi e sulle procedure da adottare. 9. Tutti i reagenti del kit contenenti siero umano o plasma sono risultati negativi rispetto a HIV I/II, HBsAg e HCV. Si raccomanda tuttavia di trattarli come potenzialmente pericolosi poiché non si può escludere in maniera assoluta la presenza di questi o di altri agenti infettivi. 10. Evitare il contatto con la soluzione stop. Può causare irritazioni e ustioni della pelle. Version / 6
3 5. CONSERVAZIONE E STABILITÀ Il kit è spedito e trasportato a temperatura ambiente e deve essere conservato a 2-8 C. Non esporre a luce solare diretta e ad alte temperature. Le informazioni relative a conservazione e stabilità di tutti i reagenti e dei campioni sono riportate nel capitolo corrispondente. La piastra microtitrata aperta è stabile fino a scadenza del kit se conservata nel suo involucro ben chiuso riposta a 2 8 C. 6. PRELIEVO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI Gocce di Sangue Prelevare il sangue dei neonati dalla parte mediana o laterale della pianta del piede. Osservare le precauzioni del caso durante il prelievo. Dopo puntura del tallone asciugare la prima goccia di sangue con una garza sterile.toccare con la card di raccolta campione una grossa goccia di sangue e permettere che una quantità sufficiente di sangue imbeva il filtro di raccolta in un unico passaggio, per riempire completamente il circolo contrassegnato. Ripetere la procedura per riempire i circoli necessari sulla card di raccolta campione. Far asciugare le gocce di sangue all aria a temperatura ambiente per 3 ore, lontano da luce solare diretta. Poiché gli standard sono deposti su carta da filtro Whatman 903 e la carta da filtro influenza significativamente i risultati (vedere LIMITAZIONI DELLA PROCEDURA), per i campioni dei pazienti DEVE essere usata la carta da filtro Whatman 903. Non pizzicare la zona del prelievo durante la raccolta del campione poiché ciò potrebbe causare diluizione del sangue con i fluidi dei tessuti o emolisi. Non applicare su uno stesso circolo gocce di sangue prelevate successivamente. Non toccare o strisciare le gocce di sangue. Far attenzione all aspetto delle gocce di sangue (non devono avere impronte digitali, coaguli, le gocce di sangue non devono essere strisciate). I prelievi vengono effettuati nella maggior parte dei casi tra 48 e 72 ore dopo la nascita. Il campionamento non deve essere effettuato prima di 36 ore dopo la nascita e oltre 72 ore dopo la nascita [6]. Si devono comunque considerare le linee guida specifiche per nazione e Paese relative al momento della raccolta del campione. Conservazione: 2-8 C Non esporre alla luce solare diretta e al calore. Stabilità: 6 mesi 7. MATERIALE FORNITO Quantità (RE55105) Quantità (RE55109) Simbolo 5 x 12 x 8 25 x 12 x 8 MTP 1 x 6 x 8 2 x 6 x 8 1 x 3 x 8 2 x 3 x 8 CAL A-F CONTROL x 15 ml 4 x 15 ml ASSAYBUF CONC 1 x 400 µl 5 x 400 µl BIOTIN-AB CONC 1 x 600 µl 5 x 600 µl ENZCONJ CONC 5 x 15 ml 4 x 90 ml TMB SUBS Componente Micropiastra Strisce separabili. Coniugato con anticorpi contro TSH. Standard A-F Pronto/a all uso. Contiene: sangue umano, TSH umano su carta Whatman Gocce di Sangue / carta. Per le concentrazioni esatte vedere le etichette o il Certificato di Controllo Qualità. Controllo 1-3 Pronto/a all uso. Controllo 1: basso Controllo 2: medio Controllo 3: elevato Contiene: sangue umano, TSH umano su carta Whatman Gocce di Sangue / carta. Per la concentrazioni / range accettabili vedere le etichette o il Certificato di Controllo Qualità. Tampone Saggio, Concentrato (20x) Di colore rosso. Contiene: tampone fosfato, BSA e ProClin300. Biotina anti-tsh Ab, Concentrato (100x) Contiene: Biotina-anti-TSH anticorpo e ProClin300. Coniugato Enzimatico, Concentrato (100x) Contiene: streptavidina coniugato a perossidase e stabilizzatori. Soluzione Substrato TMB Pronto/a all uso. Contiene: Tampone, TMB, stabilizzatori. Version / 6
4 Quantità (RE55105) Quantità (RE55109) Simbolo 5 x 15 ml 4 x 90 ml TMB STOP 2 x 100 ml 10 x 100 ml WASHBUF CONC 15 x 15 x FOIL Componente Soluzione Stop TMB Pronto/a all uso. Contiene: 1 M H 2SO 4. Tampone Lavaggio, Concentrato (10x) Contiene: tampone fosfato, Tween. Pellicola Adesiva Di colore nero. 8. MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI 1. Micropipette (Multipette Eppendorf o similari, < 3 % CV). Volumi: 50; ; 1000 µl 2. Cartine per la raccolta di sangue (Whatman 903 ) 3. Punzone per le macchie di sangue, 3 mm (e.g. Sauer, Hannover, Germany) 4. Agitatore per micropiastre ( rpm; ampiezza mm) 5. Lettore per micropiastre in grado di leggere ad assorbanza di 450 nm (lunghezza d onda di riferimento nm) 6. Flaconi vuoti per la preparazione di Biotina e Coniugato Enzimatico 7. Vortex mixer 8. Micropipetta 8-Canali con contenitori per reagenti 9. Spruzzetta per lavaggi, lavatore per micropiastre automatico o semi automatico 10. Acqua bidistillata o deionizzata 11. Carta assorbente, puntali per pipette e timer 9. NOTE PER LA PROCEDURA 1. Qualsiasi manipolazione impropria dei campioni o modifica alla procedura può compromettere i risultati. Rispettare rigorosamente i volumi, i tempi e le temperature di incubazione e i passaggi di pretrattamento dei campioni indicati in metodica. Utilizzare pipette calibrate. 2. Una volta iniziato il test completare tutti i passaggi senza interruzioni. Assicurarsi che tutti i reagenti siano stati precedentemente preparati in tempo utile. Far raggiungere la temperatura ambiente ai campioni e ai componenti del kit (18-25 C) e mescolare delicatamente ciascun reattivo liquido e campione prima dell uso. Non creare schiuma durante il mescolamento. 3. Evitare la contaminazione di reagenti, pipette, pozzetti o provette. Usare puntali di plastica nuovi per ogni reagente, standard e campione. Non scambiare i tappi tra loro. Tappare sempre i flaconi non utilizzati. Non riutilizzare pozzetti/provette o reagenti. Pozzetti non utilizzati devono essere restituiti immediatamente nella busta richiusa con il disseccante. 4. Si consiglia di saggiare i campioni in doppio per poter identificare eventuali errori di pipettamento. 5. Usare uno schema di pipettamento per realizzare un appropriata distribuzione sulla piastra. 6. Il tempo di incubazione influisce sui risultati. Tutti i pozzetti dovrebbero essere dispensati nello stesso ordine e sequenza temporale. Si raccomanda una pipetta multicanale a 8 canali per pipettare le soluzioni in tutti i pozzetti. 7. Il lavaggio della micropiastra è importante. Pozzetti lavati in modo inappropriato possono portare a risultati erronei. Si raccomanda una pipetta multicanale o un lavatore automatico per piastre. Non far asciugare i pozzetti tra le varie incubazioni. Non graffiare i pozzetti rivestiti durante risciacqui e aspirazioni. Risciacquare e versare i reagenti con cura. Durante i risciacqui assicurarsi che i pozzetti siano ben riempiti con la soluzione di lavaggio e che non ci siano residui nei pozzetti. 8. Quando si punzonano le gocce di sangue essiccato per la determinazione si devono prendere le seguenti precauzioni: 1. Punzonare solo i dischi con macchia di sangue essiccate uniformemente coperte. 2. Per le determinazioni doppie, usare solo due dischi adiacenti relativi a una sola macchia di sangue per evitare il più possibile un effetto cromatografico. 3. Nota: Non punzonare troppo vicino al bordo della macchia di sangue (1 mm dal bordo)! 9. Assicurarsi che tutte le macchie di sangue essiccato, senza eccezioni, siano rimosse dalla piastra per microtitolazione prima di iniziare il lavaggio. 10. Controllare che le macchie di sangue non siano visibilmente deteriorate (ad es. che non ci siano sbavature di sangue, coaguli, né impronte di dita sulle macchie). 11. I pozzetti/le provette non utilizzati/e e le macchie di sangue essiccato devono essere immediatamente rimessi/e nella sacca chiusa contenente l essiccante. Version / 6
5 10. ISTRUZIONI PRE-TEST Preparazione di componenti concentrati (1 Micropiastra) Diluire / dissolvere Componente con Diluente Rapporto Note Conservazione Stabilità 100 ml WASHBUF CONC 900 ml acqua bidist. 1:10 Mescolare energicamente. 2-8 C 4 settimane 2 ml ASSAYBUF CONC 38 ml acqua bidist. 1:20 Mischiare bene. 2-8 C 2 settimane 60 µl BIOTIN-AB CONC 6 ml 110 µl ENZCONJ CONC 11 ml Soluzione Tampone diluita Soluzione Tampone diluita 1:101 1:101 Mischiare > 10 min senza formazione di schiuma. Mischiare > 10 min senza formazione di schiuma. cambiamento di colore: rosso arancione TA TA fino a 3h fino a 3h Portare i reattivi a temperatura ambiente (18-25 C). Mescolare i reagenti prima di preparare le soluzion. Quando il liquido viene portato a temperatura ambiente, gli eventuali precipitati esistenti nel tampone di dosaggio si dissolvono. Se si usano diversi flaconi del coniugato enzimatico concentrato, si raccomanda vivamente di riunire le soluzioni e di creare la soluzione operativa da questo insieme. Non utilizzare bottiglie in polipropilene per la preparazione di coniugato enzimatico. 11. PROCEDURA DEL TEST 1. Punzonare un disco per ogni goccia di sangue Standard (A - F), Controllo 1-3 e campione con un punzone per gocce di sangue e mettere i dischi nel pozzetto assegnato della MTP rivestita. 2. Pipettare 100 µl di Soluzione Tampone diluita in ogni pozzetto. Coprire la piastra con pellicola adesiva nera. 3. Incubare per 60 min a TA (18-25 C) su un Agitatore per micropiastre ( rpm; mm ampiezza). Assicurarsi che tutti i dischi siano immersi Soluzione Tampone diluita. 4. Rimuovere la pellicola adesiva. Pipettare 50 µl di Biotin-AB diluita in ogni pozzetto. Coprire la piastra con pellicola adesiva nera. 5. Incubare per 60 min a TA (18-25 C) su un Agitatore per micropiastre ( rpm; mm ampiezza). 6. Rimuovere la pellicola adesiva. Eliminare la soluzione di incubazione e tutti i dischi picchiettando la piastra rovesciata su un asciugamano di carta. Lavare la piastra per 5x con 300 μl di Tampone Lavaggio diluito. Rimuovere l eccesso di soluzione picchiettando la piastra capovolta su una salvietta di carta. 7. Pipettare 100 μl di Coniugato Enzimatico diluito appena preparato in ogni pozzetto. Coprire la piastra con pellicola adesiva nera. 8. Incubare per 60 min a TA (18-25 C) su un Agitatore per micropiastre ( rpm; mm ampiezza). 9. Rimuovere la pellicola adesiva. Eliminare la soluzione d incubazione. Lavare la piastra per 5x con 300 μl di Tampone Lavaggio diluito. Rimuovere l eccesso di soluzione picchiettando la piastra capovolta su una salvietta di carta. 10. Per aggiungere le Soluzioni Substrato e Stop usare, possibilmente, una micropipetta 8-canali. Pipettare con intervalli di tempo costanti per le Soluzioni Stop e Substrato. Usare uno spostamento positivo ed evitare la formazione di bolle d aria. 11. Pipettare 100 μl di Soluzione Substrato TMB in ogni pozzetto. 12. Incubare per 30 min a TA (18-25 C) su un Agitatore per micropiastre ( rpm; mm ampiezza). 13. Fermate la reazione substrato aggiungendo 100 μl di Soluzione Stop TMB in ogni pozzetto. Mescolare delicatamente il contenuto agitando leggermente la piastra. 14. Misurare la densità ottica con un fotometro a 450 nm entro 15 min dall aggiunta della Soluzione Stop (Lunghezza d onda di riferimento: nm). Version / 6
6 12. CONTROLLO DI QUALITA I risultati dei test sono validi unicamente se questi sono stati effettuati secondo le istruzioni. Inoltre l'utente deve rispettare le regole delle buone pratiche di laboratorio (GLP) o pari norme/standard. L'utente e/o il laboratorio devono disporre di un sistema approvato per ottenere una diagnosi secondo le GLP. Tutti i controlli del kit devono rientrare nei parametri accettabili indicati sulle etichette e sul certificato di QC. Se i criteri non sono rispettati, la prova non è valida e va ripetuta. Ciascun laboratorio deve utilizzare campioni noti come ulteriore controllo. Si consiglia di prendere parte ad adeguate prove di controllo qualità. In caso di eventuali deviazioni, va verificato quanto segue: data di scadenza dei reagenti (preparati), condizioni di stoccaggio, pipette, dispositivi, condizioni di incubazione e metodi di lavaggio. 13. CALCOLO DEI RISULTATI Determinazione della curva standard La DO ottenute per gli standard (asse y, lineare) sono messe in grafico rispetto alla loro concentrazione (asse x, logaritmico) sia su carta per grafico semilogaritmico che con metodo automatico. Buoni risultati si ottengono con Regressione lineare o 4 Parametri Logistica. Per il calcolo della curva standard utilizzare ogni segnale degli standard (omettere ovviamente i valori dei duplicati molto al di fuori dei risultati attesi e impiegare il valore singolo più plausibile). La concentrazione dei campioni può essere ricavata dalla curva standard. Gli standard sono calibrati secondo la 3 a preparazione di riferimento ISNS per lo screening neonatale. I risultati sono espressi in miu/l di sangue intero. Per convertirli in miu/l di siero, moltiplicare i risultati ottenuti per due. Tipica Curva di Calibrazione (Esempio: Non usare per il calcolo!) Standard miu/l OD media DO/DO max (%) A B C D E F VALORI ATTESI Diverse società per lo screening neonatale raccomandano diversi valori limite per la ripetizione della misurazione e l uso di saggi di conferma. A dipendenza dell applicazione dei campioni di neonati di diverse popolazioni si raccomanda caldamente che ogni laboratorio stabilisca il proprio intervallo di valori normali e che questa distribuzione di valori sia coordinata con le raccomandazioni della società responsabile in questa area geografica. I soli risultati non dovrebbero essere l unica motivazione alla base di una scelta terapeutica. Devono essere correlati ad altre osservazioni cliniche e test diagnostici. La tabella seguente può essere usata come indicazione per l interpretazione dei risultati. Gli intervalli si riferiscono ad altri saggi disponibili sul mercato ben correlati ai risultati ottenuti con il saggio IBL neonatal screening ELISA e calibrati contro lo stesso materiale di riferimento. Vi sono inoltre prove derivanti dalla letteratura scientifica che consentono di interpretare i risultati nel modo seguente: TSH Interpretazione < 10 miu/l normale miu/l dubbio > 20 miu/l ipotiroideo Version / 6
7 15. LIMITI DELLA PROCEDURA La raccolta e conservazione dei campioni ha influenza significativa sui risultati del test. Vedere la sezione PRELIEVO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI per maggiori dettagli. Qualsiasi risultato con un elevata concentrazione dev essere indicato come presunto positivo e dev essere riconfermato con campionature e analisi successive. Non si può escludere con assoluta certezza un risultato erroneamente negativo di questo saggio. Non si può escludere con certezza assoluta un risultato falso-negativo di questo dosaggio. Le condizioni conosciute in quanto causa di risultati analitici anomali nei dosaggi sono: - macchia-campione non uniformemente satura di sangue - macchie campione punzonate troppo in prossimità del margine della macchia ematica - campioni secchi raccolti in modo improprio e disseccati in modo scorretto - Per conservazione all asciutto di strip non usate. - contaminazione di cartina da filtro per macchie di sangue con materiale fecale Per le reazioni crociate vedere la sezione PERFORMANCE. I seguenti componenti del sangue non hanno effetto significativo sui risultati del test fino ai livelli di concentrazione riportati in tabella: Bilirubina Trigliceridi 5 mg/ml 91 mg/ml 16. PERFORMANCE Specificità Analitica (Reattività Crociate) Non si sono rilevate reazioni crociate con le seguenti sostanze, testate fino a 10 volte il loro normale concentrazione nel sangue: hlh, hfsh, hcg, T3 e T4 Precisione Intervallo (miu/l) CV (%) Intra-Saggio Inter-Saggio Inter-Lotto Metodo di Paragone verso Altro Saggio IBL-Assay = 0.96 x CDC / UKNEQAS Campioni r = 0.98; n = 37 IBL-Assay = 0.73 x kit commerciale r = 0.98; n = 37 IBL-Assay = 1.00 x kit commerciale r = 0.98; n = 37 IBL-Assay = 1.37 x kit commerciale r = 0.97; n = 35 IBL-Assay = 0.85 x kit commerciale r = 0.94; n = RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI SUL PRODOTTO [1] Ingbar S.H.et al.: The thyroid gland. In Textbook of endocrinology, edited by R.H. Williams, W.B. Sounders Company, USA (1981) [2] American Academy of Pediatrics (AAP): Newborn screening for congenital hypothyroidism: recommended guidelines. Pediatrics 91: , [3] American Academy of Pediatrics. Committee on Genetics. Newborn screening fact sheets. Pediatrics 83: , [4] Willi SM et al.: Diagnostic dilemmas: results of screening tests for congenital hypothyroidism. Pediatr Clin North Am 38: , North Am 38: , [5] Dussault JH et al.: Preliminary report on a mass screening program for neonatal hypothyroidism. J. Pediatr 86: , [6] The German guidelines Bekanntmachung des Bundesministerium für Gesundheit und Soziale Sicherung (March 2005) are available at (accessed May 5, 2009). [7] Lando VS et al.: Effects of long-term storage of filter paper blood samples on neonatal thyroid stimulating hormone, thyroxin and 17-alpha-hydroxyprogesterone measurements. J Med Screen 2008;15: [8] International Atomic Energy Agency (IAEA): Screening of newborns for congenital hypothyroidism: guidance for developing programmes. Vienna 2005 [9] Rose SA et al.: Update of Newborn Screening and Therapy for Congenital Hypothyroidism. Pediatrics 2006;117;2290 [10] Delange F et al.: Neonatal Screening for Congenital Hypothyroidism Results and Perspectives. Horm Res 1997;4 [11] American Academy of Pediatrics (AAP): Update of Newborn Screening and Therapy for Congenital Hypothyroidism. Pediatrics 117: 2290, Version / 6
8 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύμβολα REF LOT CONC LYO IVD Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθμός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθμός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιμοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθμός εξετάσεων: Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συμπύκνωμα Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασμένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται μακριά από θερμότητα και άμεση επαφή με το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύμβολα των συστατικών του κιτ συμβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. COMPLAINTS: Complaints may be submitted initially written or vocal. Subsequently they need to be filed including the test performance and results in writing in case of analytical reasons. WARRANTY: The product is warranted to be free from material defects within the specific shelf life and to comply with product specifications delivered with the product. The product must be used according to the Intended use, all instructions given in the instructions for use and within the product specific shelf life. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. LIMITATION OF LIABILITY: IN ALL CIRCUMSTANCES THE EXTENT OF MANUFACTURER S LIABILITY IS LIMITED TO THE PURCHASE PRICE OF THE KIT(S) IN QUESTION. IN NO EVENT SHALL MANUFACTURER BE LIABLE FOR ANY INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING DAMAGES FOR LOST PROFITS, LOST SALES, INJURY TO PERSON OR PROPERTY OR ANY OTHER INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL LOSS. IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Symbols Version 4.5 /
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