Linfoma a grandi cellule B diffuso (LGCBD)

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1 Linfoma a grandi cellule B diffuso (LGCBD)

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4 GENERALITÀ E CLINICA Crescita di tipo diffuso, sostenuta da una popolazione di grande taglia (diametro cellulare >20 μm). Ogni fascia di età (mediana: 60 anni). Più spesso, primitivo. Talora secondario ad un linfoma a minore aggressività (LLC-B, LLP, LZM, LF, LHPL). Sede primitiva, sia nodale (60%) che extranodale. CHOP vs. R-CHOP R (3-yr yr-ffs: 46 > 59%; 2-yr2 yr-os: 52 > 78%).

5 MORFOLOGIA Popolazione più spesso polimorfa. Varianti: centroblastica, a nuclei ampi multilobati, immunoblastica, anaplastica, rare.

6 Più spesso, composizione citologica polimorfa

7 Variante centroblastica Variante multilobata (primitiva dell osso)

8 Variante immunoblastica con differenziazione plasmacellulare

9 Variante anaplastica

10 Varianti citologiche rare Epitelioide A cellule chiare Signet Ring Con rosette

11 Varianti citologiche rare Kikuchi- simile

12 CD68 Linfoadenite di Kikuchi MPO NE

13 FENOTIPO CD45 & marcatori B + Ig intracitoplasmatiche (CIg)) e di superficie (SIg( SIg) -/+ Ki-67: alto CD5 + (12%) (ciclina D1 - ) Altri: CD10 (30-40%), Bcl-6* (60-80%), IRF4* (75%), CD138, BLIMP1, CD30, IRTA-1, LMO2, HGAL, GCET1, Bcl-2 *50% = co-espressi

14 Diagnosi di coinvolgimento midollare: l immunoistochimica l è determinante nel 5-15% 5 dei casi Rituximab! CD20

15 CIg/restrizione monotipica lambda Ki-67/ 67/proliferazione

16 FENOTIPO CD45 & marcatori B + Ig intracitoplasmatiche (CIg)) e di superficie (SIg( SIg) -/+ Ki-67: alto CD5 + (12%) (ciclina D1 - ) Altri: CD10 (30-40%), Bcl-6* (60-80%), IRF4* (75%), CD138, BLIMP1, CD30, IRTA-1, LMO2, HGAL, GCET1, Bcl-2 *50% = co-espressi

17 Haematologica 2008; 93:

18 CD79a CD5

19 Phenotype, Genotype Clinical features CD5+ DLBCL IVL Neurological signs Cutaneous lesions Respiratory disturbance Histology, Clinical features

20 Overall survival: CD5-positive vs. CD5 negative DLBCL 100 Survival (%) P=.0026 CD5 - DLBCL (n=384) De novo CD5 + DLBCL (n=109) Years

21 FENOTIPO CD45 & marcatori B + Ig intracitoplasmatiche (CIg)) e di superficie (SIg( SIg) -/+ Ki-67: alto CD5 + (12%) (ciclina D1 - ) Altri: CD10 (30-40%), Bcl-6* (60-80%), IRF4* (75%), CD138, BLIMP1, CD30, IRTA-1, LMO2, HGAL, GCET1, Bcl-2 *50% = co-espressi

22 Bcl-6 6 & IRF4 Cellule B vergini IgM/D Ag BSAP + ZM CD10 + Bcl-6 + Mutazioni somatiche di VH, Fas, BCL6 ZS CG BSAP + IRF4 -/+ Selezione ZC CD30+ IRTA-1 + ZMG BSAP -/W Blimp-1 Cellule memoria IRF4 W /BSAP? /CD27 Plasmacellule BSAP - Apoptosi IRF4 > CD138, VS38C

23 Clustering analysis on 68 cases with LMO2, HGAL,, JAW1, GCET1, FOXP1 PAG, BCL6, BCL2, CD10, IRF4,

24 CD10 Bcl-6 IRF4 CD138 IRTA-1 CD30

25 GENOTIPO Riarrangiamento clonale dei geni che codificano per le Ig (con carico elevato di mutazioni somatiche). Ipermutazioni aberranti nel 50% dei casi (PAX5,( PIM1, RhOH/TTF, C-MYCC MYC). BCL-6: riarrangiamenti BCL-2: riarrangiamenti C-MYC: : aberrazioni p53: : anomalie

26 P H Y S I O L O G I C A L IgV SOMATIC HYPERMUTATION in GERMINAL CENTER BCL-6 FAS FDC GERMINAL CENTER SHM PIM-1 Serine kinase Prolongs survival of haematopoietic cells PAX-5 B-cell-specific transcription factor essential for B-lineage B commitment and differentiation Implicated in translocations of NHL ABERRANT (SHM malfunctioning) c-myc Transcriptional activator Involved in the control of cell growth, proliferation, differentiation and apoptosis Implicated in translocations of NHL RhoH/TTF Small GTP-binding protein belonging to the Ras superfamily Implicated in translocations of NHL

27 GENOTIPO Riarrangiamento clonale dei geni che codificano per le Ig (con carico elevato di mutazioni somatiche). Ipermutazioni aberranti nel 50% dei casi (PAX5,( PIM1, RhOH/TTF, C-MYCC MYC). BCL-6: riarrangiamenti (30% dei casi almeno) BCL-2: : riarrangiamenti C-MYC: : aberrazioni p53: : anomalie

28 Sostituzione del promotore di BCL6 in molteplici traslocazioni a 3q27 TTF BOB1 3q27 translocations IgV H der(3) X TTF-bcl6 BOB1-bcl6 IgV H -bcl6 Prognosi migliore? X-bcl6

29 Potential therapeutic targets Potential therapeutic targets

30 GENOTIPO Riarrangiamento clonale dei geni che codificano per le Ig (con carico elevato di mutazioni somatiche). Ipermutazioni aberranti nel 50% dei casi (PAX5,( PIM1, RhOH/TTF, C-MYCC MYC). BCL-6: riarrangiamenti BCL-2: riarrangiamenti (20-30% dei casi) C-MYC: : aberrazioni (23% dei casi) Secondari De novo p53: : anomalie

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32 Blastic transformation of FL with MZ-like pattern

33 Mib-1

34 p53 over-expression expression and p53 gene point mutations

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40

41 Alizadeh AA et al. Nature 2000, 403:

42 Rosenwald A et al. NEJM, 346: , 47, Wright G et al. PNAS, 100:9991-6, Lymphoma/Leukemia Molecular Profiling Project ( Ulteriori sottogruppi (274 DLBCLs). Interpolando la firma genica con l espressione l di geni coinvolti nel controllo della cinetica cellu- lare (NF( NF-kB) ) e della risposta dell ospite: 3 gruppi (OS a 5 anni: 73%, 34%, and 15%).

43

44 Application of the Wright-Classifier to the MMML-DLBCL cases MMML-DLBCL cases LLMPP-Series Rosenwald et al NEJM 2002 ABC Type 3 GCB

45 , 2008

46 Surrogato Surrogato Paul Gauguin Karkad Karkadè

47 DASL Assay Pool (DAP) probe These probes span about 50 bases,, making it possible to profile partially degraded RNA.

48

49 Hans CP et al. Blood 2004; 103: cases (142 evaluated by cdna microarray) were sub- classified based on the expression of CD10, Bcl-6 and IRF4. Cases were subdivided into GCB and non-gcb. 5-yr OS: 76% vs. 34%. In multivariate analysis, a high IPI and the non-gcb profile were independent adverse predictors.

50

51 Improved upon Hans algorithm to achieve a concordance with GEP data of 93% (Hans ~80%) How: 1.Puts less weight on BCL6 which shows poor inter-laboratories agreement. 2.GCET1 is considered as a highly specific GCB marker (GC expressed transcript 1).

52 LIM domain only 2

53

54 69 DLBCLs

55 GEP Hans Tally

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57 CD10 Bcl-6 IRF4 Bcl % GCB, BCL NC 40 ABC CD10 Bcl-6 IRF4 Bcl-2 20 OS months 100 % GCB, BCL2 - CD138 Bcl-6 IRF4 Bcl NC 40 ABC 20 DFS months

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60 ABC GCB

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62 Extra-cellular matrix deposition + histiocytes Angiogenesis Micro-vessel density

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