Allegato 6 TERMINALE GNL ADRIATICO S.R.L.

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Linda Ruggeri
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1 Allegato 6 TERMINALE GNL ADRIATICO S.R.L. Piano di monitoraggio ambientale (fase di esercizio) del Terminale GNL di Porto Viro e della condotta di collegamento alla terraferma Area della Laguna Vallona Fase Esercizio provvisorio III anno di monitoraggio Biota Tapes philippinarum Mytilus galloprovincialis I campagna - Novembre 2012 II campagna - Maggio 2013 Risultati analisi Biomarkers Dicembre 2014

Viro e della condotta di collegamento alla terraferma Area della Laguna Vallona Fase Esercizio

2 Responsabili scientifici Dott. Massimo Gabellini, Dott.ssa Claudia Virno Lamberti Coordinamento stesura documento D.ssa Claudia Virno Lamberti, Ing. Silvia Ceracchi Analisi di Laboratorio D.ssa Ginevra Moltedo (Ref.) D.ssa Barbara Catalano Dott. Giacomo Martuccio Dott. Alessandro Mercatini Dott. Andrea Tornambè

ssa Claudia Virno Lamberti, Ing. Silvia Ceracchi Analisi di Laboratorio D.

3 Si riportano di seguito le specifiche del piano di campionamento per le analisi di biomarkers in Tapes philippinarum (vongole) e Mytilus galloprovincialis (mitili) ed i rispettivi risultati analitici della prima e della seconda campagna previste per il III anno di monitoraggio per la fase di esercizio provvisorio nell area della Laguna Vallona. La I campagna di prelievo di bivalvi filtratori è stata effettuata il 14 Novembre 2012 per Mytilus galloprovincialis ed il 21 Novembre 2012 per Tapes philippinarum. La II campagna di prelievo di bivalvi filtratori è stata effettuata il 29 Maggio 2013 sia per Mytilus galloprovincialis che per Tapes philippinarum. Gli esemplari della specie Tapes philippinarum sono stati prelevati da 4 stazioni (Fig. 1): 2 stazioni più vicine alla condotta, situate nell area di allevamento vicino l isola S. Margherita (LE22V e LE23V); 2 stazioni più lontane dalla condotta, situate nell area di allevamento nel resto della Laguna (LE16V e LE17V). Gli organismi di Mytilus galloprovinciali sono stati prelevati da 2 stazioni posizionate a nord del tracciato della condotta offshore, una più vicina (LE023M) e una più lontana (LE024M) rispetto al tracciato (Fig. 1). La Tabella 1 riporta in dettaglio le coordinate delle stazioni di campionamento, la Figura 1 rappresenta la posizione delle stesse. Tabella 1: Coordinate delle stazioni di campionamento di vongole e mitili. Le lettere che seguono il codice della stazione indicano gli organismi prelevati e sottoposti ad indagine: V: vongole (Tapes philippinarum); M: mitili (Mytilus galloprovincialis). Organismi Stazione Latitudine Nord Longitudine Est Vongole LE016V 45 01'45,7072" N 12 23'43,7583" E Vongole LE017V 45 02'29,1077" N 12 23'11,5296" E Vongole LE022V 45 01'45,9061" N 12 23'18,6364" E Vongole LE023V 45 02'06,4470" N 12 23'03,4213" E Mitili LE023M 45 02'06,4470" N 12 23'03,4213" E Mitili LE024M 45 02'05,6988" N 12 22'54,0918" E 1

La I campagna di prelievo di bivalvi filtratori è stata effettuata il 14 Novembre 2012 per Mytilus galloprovincialis ed il 21 Novembre 2012 per Tapes philippinarum.

4 Figura 1: Posizionamento delle stazioni di prelievo delle vongole (in rosa) e dei mitili (in giallo). La linea rossa rappresenta la condotta di collegamento al Terminale per il trasporto del gas. 2

5 1. Prima campagna di campionamento (Novembre 2012) BIOMARKERS Area Laguna Vallona Tapes philippinarum III anno di Esercizio Novembre 2012 LE16V LE17V LE22V LE23V Biomarker Tessuto target u.m. media ± d.s./sem media ± d.s./sem media ± d.s./sem media ± d.s./sem DML emolinfa NRRT (min) 8 ± 4 17 ± 3 13 ± 8 13 ± 7 COMET emolinfa %DNA coda 17 ± 5 15 ± 3 10 ± 5 12 ± 2 MN emolinfa 0,20 ± 0,13 0,40 ± 0,52 0,60 ± 0,22 0,50 ± 0,17 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 13,64 ± 3,15 10,81 ± 3,64 10,92 ± 3,41 8,98 ± 2,25 AOX epatopancreas munità/mg prot 0,55 ± 0,18 0,56 ± 0,25 0,53 ± 0,16 0,51 ± 0,20 MT epatopancreas nmol MT/mg prot tot 0,36 ± 0,07 0,37 ± 0,04 0,36 ± 0,04 0,37 ± 0,08 CAT epatopancreas µmol/min/mg 24,94 ± 2,88 26,61 ± 5,63 21,99 ± 6,04 24,00 ± 6,18 TOSCAROO epatopancreas UTOSC/ mg prot 701 ± ± ± ± 112 TOSCAOH epatopancreas UTOSC/ mg prot 591 ± ± ± ± 68 MDA epatopancreas nmol/gr tess 22,86 ± 6,36 23,57 ± 9,00 30,00 ± 10,80 34,29 ± 11,34 3

0,60 ± 0,22 0,50 ± 0,17 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 13,64 ± 3,15 10,81 ± 3,64 10,92 ± 3,41 8,98 ± 2,25 AOX epatopancreas munità/mg prot 0,55 ± 0,18 0,56 ± 0,25 0,53 ± 0,16 0,51 ± 0,20 MT

6 BIOMARKERS Area Laguna Vallona Mytilus galloprovincialis III anno di Esercizio Novembre 2012 LE23M LE24M Biomarker Tessuto target u.m. media ± d.s./sem media ± d.s./sem DML emolinfa NRRT (min) 30 ± ± 11 COMET emolinfa % DNA coda 12 ± 2 13 ± 4 MN emolinfa 0,63 ± 0,16 0,38 ± 0,16 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 52,79 ± 11,02 62,95 ± 22,18 AOX epatopancreas munità/mg prot 0,66 ± 0,24 0,67 ± 0,29 MT epatopancreas nmol MT/mg prot tot 0,22 ± 0,02 0,20 ± 0,02 CAT epatopancreas µmol/min/mg 8,37 ± 3,41 7,81 ± 3,34 TOSCAROO epatopancreas UTOSC/ mg prot 655,90 ± 128,60 889,35 ± 124,18 TOSCAOH epatopancreas UTOSC/ mg prot 406,46 ± 152,54 415,47 ± 78,36 MDA epatopancreas nmol/gr tess 29,29 ± 8,38 29,17 ± 3,76 4

7 1. Seconda campagna di campionamento (Maggio 2013) BIOMARKERS Area Laguna Vallona Tapes philippinarum III anno di Esercizio Maggio 2013 LE16V LE17V LE22V LE23V Biomarker Tessuto target u.m. media ± d.s./sem media ± d.s./sem media ± d.s./sem media ± d.s./sem DML emolinfa NRRT (min) 3,0 ± 2,4 6,8 ± 4,5 6,8 ± 2,9 3,0 ± 0,0 COMET emolinfa %DNA coda 8,35 ± 5,03 4,54 ± 2,13 4,55 ± 1,39 3,43 ± 2,04 MN emolinfa 0,25 ± 0,15 0,88 ± 0,20 0,50 ± 0,17 0,38 ± 0,16 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 14,01 ± 5,48 18,04 ± 7,70 15,13 ± 5,76 10,51 ± 2,35 AOX epatopancreas munità/mg prot 1,71 ± 0,28 1,75 ± 0,38 1,86 ± 0,15 1,31 ± 0,34 MT epatopancreas nmol MT/mg prot 0,40 ± 0,03 0,41 ± 0,06 0,29 ± 0,05 0,33 ± 0,04 CAT epatopancreas µmoli/min/mg prot. 90,08 ± 16,94 80,46 ± 13,91 77,16 ± 11,59 79,08 ± 12,83 TOSCAROO epatopancreas UTOSC/ mg prot 588,32 ± 75,89 474,00 ± 39,87 473,23 ± 29,22 445,95 ± 57,54 TOSCAOH epatopancreas UTOSC/ mg prot 889,97 ± 121,81 731,91 ± 79,92 742,29 ± 44,86 730,22 ± 61,22 MDA epatopancreas nmol/gr tess 58,72 ± 10,73 55,37 ± 11,25 58,98 ± 14,48 47,76 ± 9,07 5

emolinfa 0,25 ± 0,15 0,88 ± 0,20 0,50 ± 0,17 0,38 ± 0,16 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 14,01 ± 5,48 18,04 ± 7,70 15,13 ± 5,76 10,51 ± 2,35 AOX epatopancreas munità/mg prot 1,71 ± 0,28 1,75 ± 0,38

8 BIOMARKERS Area Laguna Vallona Mytilus galloprovincialis III anno di Esercizio Maggio 2013 LE23M LE024M Biomarker Tessuto target u.m. media ± d.s./sem media ± d.s./sem DML emolinfa NRRT (min) 15,00 ± 0,00 15,00 ± 0,00 COMET emolinfa % DNA coda 8,09 ± 3,11 9,51 ± 4,95 MN emolinfa 0,25 ± 0,15 0,50 ± 0,24 ACHE emolinfa nmoli/min/mg prot 123,97 ± 46,18 98,58 ± 35,86 AOX epatopancreas munità/mg prot 0,55 ± 0,15 0,51 ± 0,13 MT epatopancreas nmol MT/mg prot tot 0,28 ± 0,09 0,28 ± 0,04 CAT epatopancreas µmoli/min/mg prot 7,98 ± 1,72 8,08 ± 1,74 TOSCAROO epatopancreas UTOSC/ mg prot 635,84 ± 109,24 778,30 ± 128,65 TOSCAOH epatopancreas UTOSC/ mg prot 439,75 ± 111,88 519,73 ± 134,36 MDA epatopancreas nmol/gr tess 12,42 ± 2,53 13,82 ± 2,55 6

9 Parametri sigla Metodo analitico Stabilità lisosomiale DML Lowe et al., 1995 Comet Assay Comet Assay Machella et al., 2006 Micronuclei negli emociti MN Venier et al., 1997 Att. enzimatica della acetilcolinesterasi AchE Ellman et al., 1961 Metallotioneine MT Viarengo et al., 1997 Att. enzimatica acilcoa ossidasi AOX Small et al., 1985 Att. enzimatica della catalasi CAT Regoli and Principato, 1995; Regoli et al., 2004 Capacità antiossidante totale ROO. TOSC ROO Regoli and Winston, 1999 Capacità antiossidante totale OH. TOSC OH Regoli and Winston, 1999 Livelli di malondialdeide MDA Shaw et al.,

, 1961 Metallotioneine MT Viarengo et al., 1997 Att. enzimatica acilcoa ossidasi AOX Small et al., 1985 Att.

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