Completa automazione per una diagnosi semplice e veloce della Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi
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- Nicoletta Ferrara
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1 HemosIL AcuStar Si n drom e da Anticor pi Anti f osf oli pi di Completa automazione per una diagnosi semplice e veloce della Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi 4 HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgG 4 HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgM 4 Glycoprotein-I IgG 4 Glycoprotein-I IgM S i n d r o m e d a A n t i c o r p i A n t i f o s f o l i p i d i
2 Completa automazione per risultati più accurati e in tempi brevi Test in chemiluminescenza per una maggiore sensibilità, precisione e accuratezza Approvato dall FDA come aiuto nella Diagnosi della Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi Sistema a cartucce pronte all uso e precalibrate per una maggiore semplicità d uso Elevata stabilità a bordo, fino a sei settimane - test disponibile 24 ore su 24, 7 giorni su 7 Elevata linearità Cut-off validato clinicamente a 20 U/mL per tutti i test Test eseguibili sia su siero che su plasma
3 Cosa è la Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi (APS)? La Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi (conosciuta anche come Sindrome di Hughes) è una malattia autoimmune in cui gli anticorpi antifosfolipidi possono essere associati a trombosi venose e arteriose, perdita fetale ricorrente, ripetuti aborti spontanei e/o nascita prematura. L APS si verifica quando gli anticorpi sono generati contro antifosfolipidi legati a proteine, come la ß2 glicoproteina I, e a fosfolipidi, come la cardiolipina. Tuttavia ci possono essere implicazioni a livello della Protrombina, Fosfatidilserina, Annessina V, Proteina C e Proteina S. Le APS in forma grave sono più rare, spesso letali e legate a patologie trombotiche che possono portare ad un danneggiamento degli organi. Con una diagnosi di APS confermata, il medico è in grado di proporre una cura, come la terapia anticoagulante, per fornire al paziente un migliore trattamento clinico. Per la diagnosi di APS sono necessari criteri clinici e di laboratorio. Criteri Clinici 1. Trombosi vascolare (arteriosa, venosa) 2. Interruzione di gravidanza Aborti Ricorrenti Decesso del feto prima della 10ª settimana Nascita prematura prima della 34ª settimana Tre o più aborti spontanei ed inspiegabili prima della 10ª settimana Criteri di laboratorio 1. Anticorpi LA Doppia positività a distanza di 12 settimane 2. Anticorpi acl Medio o alto titolo per IgG e/o IgM Doppia positività a distanza di 12 settimane 3. Anticorpi aß 2 GPI IgG e/o IgM Doppia positività a distanza di 12 settimane Test Funzionali su Famiglia ACL TOP + Test Antifosfolipidi su ACL AcuStar = Una Diagnosi completa ed efficiente Secondo le Linee Guida ISTH per la Diagnosi di APS LA Famiglia ACL TOP HemosIL drvvt Screen & Confirm HemosIL Silica Clotting Time Pannello APS HemosIL acl IgG & IgM ACL AcuStar HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgG HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgM aß 2 GPI IgG & IgM ACL AcuStar Glycoprotein-I IgG Glycoprotein-I IgM Negativo Almeno un test positivo Nessun test futuro Ripetizione del test dopo 12 settimane Negativo Positivo APS
4 Eccellenti performance analitiche Precisione CV % (nella serie) CV % Totale Sotto al Cut-off < 8 < 12 Medio Titolo < 5 < 8 Alto Titolo < 7 < 7 acl IgG acl IgM aß 2 GPI IgG aß 2 GPI IgM Linearità (U/mL) Limite di rilevabilità (U/mL) Cut-off (U/mL) Senza Rerun Senza Rerun Senza Rerun Senza Rerun 2, , , ,1-841 Con Rerun Con Rerun Con Rerun Con Rerun 2, , , , ,6 1,0 6,4 1, Performance Cliniche Come riportato da de Moerloose et al., 1 è stato eseguito uno studio clinico per valutare il pannello di test HemosIL apl. Sono stati inclusi dei pazienti con APS confermata: APS Primaria (PAPS) APS Secondaria (SAPS) Nel gruppo di controllo sono stati inclusi i seguenti campioni: Donatori apparentemente sani (normali) Lupus Eritematoso Sistemico (SLE) senza APS SLE-like Altre malattie autoimmuni di tipo cardiovascolare. I campioni sono stati testati in cieco con i kit HemosIL AcuStar apl e con tre differenti kit ELISA in commercio. L uso di tutti e quattro i test del pannello HemosIL AcuStar apl, in aggiunta ai test funzionali HemosIL per la ricerca di LA, è in linea con quanto suggerito delle ultime Linee Guida ISTH sulla diagnosi di APS e migliora la probabilità di riconoscere anticorpi apl se presenti. Nei campioni testati i kit HemosIL AcuStar apl, utilizzando un cut-off pari a 20 U/mL, hanno dimostrato un buon equilibrio fra sensibilità e specificità se confrontati con i metodi ELISA e un eccellente concordanza con la diagnosi di APS. Il valore Odds Ratios Totale indica la capacità di ciascun pannello di test di predirre un evento trombotico o una complicanza ostetrica. I kit HemosIL AcuStar apl mostrano un eccellente valore predittivo rispetto ai test ELISA commerciali. Performance Cliniche Pannello HemosIL AcuStar apl ELISA 1 ELISA 2 ELISA 3 Sensibilità (%) 72,8 75,0 57,6 64,1 CI (%) 62,6-81, Specificità (%) 87,3 74,2 85,6 88,6 CI (%) 82,3-91,4 68,1-79,8 80,4-89,9 83,8-92,4 Agreement (%) 83,2 74,5 77,6 81,6 CI (%) 78,6-87,1 69,3-79,1 72,6-82,0 76,9-85,7 odds ratios Pannello HemosIL AcuStar apl ELISA 1 ELISA 2 ELISA 3 Odds Ratio Totale 6,4 4,0 3,5 5,7 - Trombosi 5,6 3,3 3,3 5,3 - Ostetrico 3,3 4,2 3,3 3,2 Il Pannello HemosIL per APS: massimizza l efficienza nella diagnosi I campioni di pazienti con PAPS e SAPS sono risultati positivi per uno o più degli apl: Anticorpi LA, anticorpi acl IgG e/o IgM e anticorpi aß 2 GPI IgG e/o IgM, come mostrato in figura. Questo indica chiaramente che un pannello di test completo massimizza l efficienza nella diagnosi di APS. 1. de Moerloose P, et al., Analytical and clinical performance of new automated panel for the diagnosis of antiphospholipid syndrome. Journal of Thrombosis & Haemostasis 2010; vol. 8: Anticorpi LA N = 47 acl lgg e/o IgM N = 78 aß 2 GPI lgg e/o lgm N = 80
5 Principio del Test I test del pannello HemosIL apl AcuStar sono completamente automatizzati e sono basati sulla tecnologia della chemiluminescenza. Le particelle magnetiche sono rivestite con ß 2 GPI umana, (test per anticorpi aß 2 GPI) e cardiolipina, complessato con ß 2 GPI umana (test per anticorpi acl). L antigene adeso sulle particelle magnetiche cattura gli anticorpi IgG e/o IgM, se presenti nel campione. Un secondo anticorpo marcato con isoluminolo si lega agli anticorpi presenti nella cuvetta di reazione; la luce emessa è proporzionale alla concentrazione degli anticorpi nel campione. Particella Magnetica I test HemosIL apl non sono virtualmente affetti da interferenze ottiche. Antigene Tracer: anticorpo marcato con isoluminolo Analita di interesse nel campione del paziente Luce emessa dalla reazione quando vengono aggiunti H 2 O 2 e un catalizzatore. Standardizzazione dei test E stato eseguito uno studio sul range di normalità usando 252 campioni di plasma citratato da donatori sani*. Per tutti e i quattro test del pannello apl è stato definito lo stesso cut-off pari a 20 U/mL. I test HemosIL AcuStar apl possono essere correlati con un anticorpo chimerico, HCAL**, e con un anticorpo monoclonale EY2C9**. * Basato sul 99 percentile come raccomandato dalle ultime Linee Guida Lupus Anticoagulant/Phospholipid-Dependent Antibodies del sottocomitato ISTH. ** HCL e EY2C9 si riferiscono agli Standard di Sapporo per la standardizzazione dei test apl. [apl] U/mL acl lgg acl lgm aß 2 GPI lgm aß 2 GPI lgg Standardizzazione del test Calibrazione del test Master Curve Predefinita Specifica per lotto Importata nel Software dell ACL AcuStar tramite il barcode della cartuccia Curva di Lavoro Validazione della Curva Master mediante i due calibratori contenuti nel kit Da eseguire solo al cambio lotto Relative Light Unit (thousands) Curva di Lavoro Master Curve U/mL 3k Curve di calibrazione
6 HemosIL AcuStar Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi Reagenti Codice Configurazione del kit HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgG HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgM Glycoprotein-I IgG Glycoprotein-I IgM Cartuccia da 50 test per Anti-Cardiolipina lgg 1 Cartuccia da 50 test per Anti-Cardiolipina lgm 1 Cartuccia da 50 test per Anti-ß 2 Glycoprotein-l lgg 1 Cartuccia da 50 test per Anti-ß 2 Glycoprotein-l lgm CONTrolli Codice Configurazione del kit HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgG Controls HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipin IgM Controls Glycoprotein-I IgG Controls Glycoprotein-I IgM Controls Low Anti-Cardiolipin IgG Control, 3 x 1 ml (liq) High Anti-Cardiolipin IgG Control, 3 x 1 ml (liq) Low Anti-Cardiolipin IgM Control, 3 x 1 ml (liq) High Anti-Cardiolipin IgM Control, 3 x 1 ml (liq) Low Anti-ß 2 GPI IgG Control, 3 x 1 ml (liq) High Anti-ß 2 GPI IgG Control, 3 x 1 ml (liq) Low Anti-ß 2 GPI IgM Control, 3 x 1 ml (liq) High Anti-ß 2 GPI IgM Control, 3 x 1 ml (liq) Referenze De Moerloose P., Reber G, Musial J, Arnaut J. Analytical and clinical performance of a new automated panel for the diagnosis of antiphospholipid syndrome. Journal of Thrombosis and Haemostasis 2010; Volume 8: Forastiero R, et al. Evaluation of the performance of monoclonal and polyclonal antibody standards in different assays for the detection of antiphospholipid (apl) antibodies: Report of a wet workshop at the 13 th international congress on antiphospholipid antibodies. Arthritis & Rheumatism 2010; Volume 62(10); S946. Forastiero R, et al. Comparative evaluation of different immunoassays for the detection of antiphospholipid antibodies: Report of a wet workshop during the 13th international congress on antiphospholipid antibodies. Arthritis & Rheumatism 2010; Volume 62(10); S Galli M. Antiphospholipid syndrome: associate between laboratory tests and clinical practice. Pathophysiol Haemost Thromb 2003/2004; 33: Hanly JG. Antiphospholipid syndrome: an overview. CMAJ 2003:168(13): Levine JS, et al. The antiphospholipid syndrome. N Engl J Med 2002:346(10): Miyakis S, et al. International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS), J Thromb Haemost. 2006;4(2): Morin KA, et al. Analytical performance of new and quantitative assays for the diagnosis ofantiphospholipid syndrome on a fully automated, chemiluminescent analyzer. Journal of Thrombosis and Haemostasis 2009; Volume 7, Supplement 2: Abstract PP-WE-270 Morin K, et al. Analytical and clinical performance of new fully automated, chemiluminescent assay panel for the diagnosis of antiphospholipid syndrome (APS). Lupus 2010; Volume 19(4); Serra J, et al. Clinical performance of new and quantitative assays for the diagnosis of antiphospholipid syndrome (APS) on a fully automated, chemiluminescent analyzer. Journal of Thrombosis and Haemostasis 2009; Volume 7, Supplement 2: Abstract PP-WE-267 Werfen Group Worldwide Locations Corporate Headquarters Barcelona, Spain Tel Instrumentation Laboratory Headquarters Bedford, MA Tel US, Canada, Latin America and South America IL USA Bedford, MA Tel Werfen Medical Ltd. Brazil São Paulo Tel IL Canada Richmond Hill, ON Tel x6115 IL Mexico Col. Granada Tel Izasa Uruguay Montevideo Tel Pacific Werfen Medical China Shanghai Tel Beijing Tel Werfen Hong Kong Hong Kong Tel IL India New Delhi Tel IL Japan Minato-ku, Tokyo Tel Werfen Medical Korea Seoul Tel Europe, Middle East, Africa Werfen Austria Vienna Tel IL Belgium Zaventem Tel Comesa Czech Prague Tel IL France Paris Tel IL Germany Munich Tel IL The Netherlands Breda Tel. +31(0) Comesa Hungary Budapest Tel or 11 IL Italy Milan Tel IL Lithuania Kaunas Tel Comesa Poland Warsaw Tel Izasa Portugal Carnaxide Tel IL Russia Moscow Tel Izasa Spain Barcelona Tel IL UK Warrington, Cheshire Tel Il logo Instrumentation Laboratory, HemosIL, ACL e ACL AcuStar sono marchi registrati di Instrumentation Laboratory e consociate e sono registrati presso lo United States Patent and Trademark Office e in altre giurisdizioni. Tutti gli altri nomi di prodotti, nomi di società, marchi, loghi e simboli sono marchi dei rispettivi proprietari Instrumentation Laboratory. Tutti i diritti riservati. p/n Rev. 0 - Stampato in Italia - Grafica Briantea - 09/11
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