Misurazione su modello suino dell'argento estraibile da Askina Calgitrol Ag

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1 Misurazione su modello suino dell'argento estraibile da Askina Calgitrol Ag OBIETTIVO Misurazione della concentrazione di argento estraibile da Askina Calgitrol Ag dopo l'applicazione su ferite profonde nel maiale domestico. PROTOCOLLO METODI Per via chirurgica sono state inflitte ad un maiale profonde ferite circolari (diametro 2,0-2,3 cm; profondità 5-7 mm). Quindi è stato applicato Askina Calgitrol Ag, fissandolo con una medicazione in pellicola (Askina Derm). Prima del trattamento (giorno 0) e nei giorni 1, 3 e 7 è stato effettuato un prelievo di sangue per estrarne il siero. Il contenuto in argento dei campioni di siero è stato poi determinato tramite spettroscopia di emissione atomica con plasma accoppiato induttivamente (ICP-OES).

2 RISULTATI In queste condizioni di studio le concentrazioni di argento sono risultate simili in tutti i campioni prelevati nei vari momenti (giorno 1, 3 e 7). La concentrazione più elevata (0,008 ppm) è stata registrata al giorno 7. In confronto al tasso medio di argento nel sangue umano, questa concentrazione è da considerarsi irrilevante. Campioni Prima del trattamento Concentrazione in ppm (parti per milione) in Ìg/g NR Giorno 1 0,005 Giorno 3 0,002 Giorno 7 0,007-0,008 Limite di rilevamento 0,001 NR = non rilevabile CONCLUSIONE Askina Calgitrol Ag non provoca nessun aumento significativo della concentrazione di ioni argento nel siero ematico.

3 Studio sulla migrazione dell'argento contenuto in Askina Calgitrol Ag nel siero di sangue suino OBIETTIVO Valutazione della migrazione dell'argento da Askina Calgitrol Ag in siero di sangue di maiale nell'arco di determinati periodi di tempo. PROTOCOLLO METODO Sono stati presi in esame tre lotti di Askina Calgitrol Ag. Ciascun test è stato eseguito in duplicato. Da ogni medicazioni sono stati ritagliati dischi (diametro di 3,9 cm) che sono stati poi incubati in 20 ml di siero ematico di maiale in condizioni uguali. Dopo l'intervallo di tempo previsto il siero suino in cui sono state incubate le medicazioni è stato filtrato (vedere i grafici A e B). A B Il contenuto in argento del filtrato è stato determinato tramite spettroscopia di emissione atomica con plasma accoppiato induttivamente (ICP-OES) ed in tal modo è stata stabilita la quota percentuale di argento rilasciato da Askina Calgitrol Ag. I residui di medicazione nella carta de filtro sono stati completamente degradati con acidi minerali e analizzati separatamente tramite ICP-OES per determinarne il contenuto in argento. In tal modo si è potuta determinare la quota percentuale di argento rimasta nella medicazione.

4 RISULTATI Il rilascio di argento da Askina Calgitrol Ag ha luogo gradualmente e con velocità costante. (Grafico 1) 1 Argento (ppm) Argento rilasciato da Askina Calgitrol Ag (ppm) - misurazione tridimensionale Askina Calgitrol Ag rilascia concentrazioni relativamente basse rispetto all'argento totale contenuto nella medicazione. (Grafico A) Tempo (h) A Argento rilasciato (%) Argento rilasciato dalla matrice di alginato d'argento di Askina Calgitrol Ag Tempo (h) B Quantità residua di argento (%) Residuo di argento in Askina Calgitrol Ag Tempo (h) CONCLUSIONE Il rilascio di ioni argento da Askina Calgitrol Ag avviene in modo controllato e durevole.

5 Valutazione comparativa delle reazioni cutanee con particolare riguardo ad eritemi, edemi e scolorimento cutaneo OBIETTIVO Confronto delle reazioni cutanee provocate da varie medicazioni contenenti argento riguardo a eritemi edemi scolorimento cutaneo PROTOCOLLO METODI La faccia interna di un avambraccio umano è stata pulita e sgrassata con alcool isopropilico al 70%. Usando dei cerotti sono stati poi applicati sulla pelle ritagli (ca. 6 x 12,5 mm) di ciascuna medicazione. Nel caso di un prodotto in forma di gel schiumogeno è stato applicato un grammo di gel sul cerotto, che è stato poi fissato nel punto corrispondente. L'incavo del braccio è stato lasciato libero. Medicazioni all'argento esaminate Specifiche del prodotto 1. Askina Calgitrol Ag - B. Braun Medical AG placca in schiuma di poliuretano e argento, applicata allo stato secco 2. Medicazione per ustioni A (argento nanocristallino) applicata asciutta 3. Medicazione per ustioni A (argento nanocristallino) inumidita prima dell'applicazione 4. Medicazione all'argento B (argento nanocristallino) inumidita prima dell'applicazione 5. Medicazione all'argento B (argento nanocristallino) applicata asciutta 6. Medicazione rivestita di argento C applicata asciutta 7. Medicazione rivestita di argento C applicata dopo inumidimento con 2 gocce di acqua deionizzata 8. Calgitrol gel schiumogeno all'alginato Gel in schiuma con alginato ed argento Le reazioni cutanee sono state valutate sulla base di una scala da 0 a 4 punti per eritemi, edemi ed eventuali scolorimenti. Punteggio Eritema Edema Scolorimento cutaneo 0 nessuno nessuno nessuno 1 minimo minimo minimo 2 ben delimitato ben delimitato medio 3 medio medio scuro 4 elevato elevato elevato

6 RISULTATI Medicazioni all'argento esaminate Eritema Edema Scolorimento cutaneo 1. Askina Calgitrol Ag - B. Braun Medical SA Medicazione per ustioni A (argento nanocristallino) Medicazione per ustioni A (argento nanocristallino) Medicazione all'argento B (argento nanocristallino) Medicazione all'argento B (argento nanocristallino) Medicazione rivestita di argento C Medicazione rivestita di argento C Calgitrol gel schiumogeno all'alginato Nessuna delle medicazioni in esame ha provocato eritema. Due medicazioni (3 e 5) hanno provocato un edema da minimo a lieve. Uno scolorimento si è verificato con tutte le medicazioni, ad eccezione di Askina Calgitrol Ag e della medicazione rivestita in argento C. CONCLUSIONE Askina Calgitrol Ag non provoca irritazioni cutanee, formazione di macchie o scolorimento della pelle.

7 Misurazione del potenziale microbicida della medicazione in espanso-argento Askina Calgitrol Ag OBIETTIVO Verifica dell'efficacia microbicida della medicazione in espanso-argento Askina Calgitrol Ag (su Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans) PROTOCOLLO METODI Per visualizzare i batteri e valutarne le caratteristiche di crescita, le popolazioni cellulari sono state colorate con il kit LIVE/DEAD Baclight Bacterial Viability (Molecular Probes; Invitrogen). ll kit è composto da due coloranti fluorescenti, STYO 9 (verde) e ioduro di propidio (rosso), confezionati in pipette in plastica preriempite. I microrganismi (Candida albicans ATCC2091; Escherichia coli ATCC8739 e Staphylococcus aureus ATCC 6538P) sono stati colorati con la miscela di coloranti ed incubati su Askina Calgitrol Ag. I batteri vivi o vitali presentano una fluorescenza verde. In caso di danno alla parete batterica il colore passa al rosso, perciò i batteri morti o morenti presentano una colorazione rossa. La medicazione è stata esaminata a scadenze precise (dopo 0, 1, 2, 3, 4, 12 e 24 ore) con un microscopio confocale a scansione laser TCS AOBS Leica. I microrganismi vivi (verdi) e morti (rossi) sono stati contati tramite il software Image J, sulla base di 10 immagini per scadenza. I risultati indicano la percentuale di vitalità rilevata in ciascun esame. RISULTATI Dopo un'incubazione di 12 ore si è già osservata un'elevata mortalità, e dopo 24 ore era morto quasi il 100% delle cellule in tutte le colture. Vitalità dei microrganismi in % sulla medicazione in espanso-argento Askina Calgitrol Ag 0 ore 1 ore 2 ore 3 ore 4 ore 12 ore 24 ore C. albicans % % % % % % 0 % E. coli % % % % % % 5.43 % S. aureus 100 % 100 % % % % % 0.55 %

8 Confronto della vitalità percentuale delle specie incubte sulla medicazione in espanso-argento Askina Calgitrol Ag nell'arco di 24 ore S. aureus C. albicans E. coli ore Le figure seguenti mostrano a titolo esemplificativo per ciascuno degli organismi esaminati il pattern cromatico nei rispettivi momenti di misura Microrganismi incubati sulla medicazione in espanso-argento Askina Calgitrol Ag (100 µl di sospensione non diluita) 0 ore 2 ore 12 ore 24 ore C. albicans E. coli S. aureus CONCLUSIONE Askina Calgitrol Ag uccide i microrganismi entro un periodo di 24 ore.