QUANTA Chek ANA Panel
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- Eloisa Raimondi
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1 QUANTA Chek ANA Panel Finalità d uso Il Pannello ANA QUANTA Chek TM è utilizzato per il controllo della qualità delle procedure per la ricerca degli anticorpi antinucleo IFA ed ELISA. Ciascun siero funge sia da controllo del pattern che da controllo della sensibilità titolabile. Il pattern e l intensità della colorazione per ciascun siero sono stati calibrati analizzandoli su tre partite di vetrini della INOVA Diagnostics e tre partite di vetrini della INOVA Diagnostics. Descrizione dei sieri del pannello Dieci fiale contenenti 0,15 ml di siero umano non diluito conservato con azoturo di sodio allo 0,09%. Siero Numero di partita Pattern Siero A del pannello ANA A Mitocondrio Siero B del pannello ANA B Pontos Nucleares Siero C del pannello ANA C Omogeneo Siero D del pannello ANA D Ribosomiale Siero E del pannello ANA E Nucleolare Siero F del pannello ANA F PCNA Siero G del pannello ANA G Scl-70 Siero H del pannello ANA H Granuloso Siero I del pannello ANA I Centromereo Siero J del pannello ANA J Negativo Avvertimenti e precauzioni Materiale di provenienza umana: trattare come potenzialmente infettivo. Il siero utilizzato nella preparazione di questo prodotto è stato testato con metodi approvati dall ente statunitense preposto al controllo degli alimenti e dei farmaci (Food and Drug Administration, FDA) ed è risultato non reattivo per la presenza di antigeni di superficie dell Epatite B (HBsAg), di anticorpi del virus dell immunodeficienza umana (HIV) ed al virus dell Epatite C (HCV). Nessun metodo per test conosciuto offre l assoluta certezza che siano assenti i virus dell Epatite B, l HIV, l HCV o altri agenti infettivi. Maneggiare i sieri del pannello e tutti i campioni dei pazienti in base al Secondo livello della Biosicurezza come raccomandato nel manuale dei Centri per il Controllo delle Malattie/Istituti Sanitari Nazionali statunitensi (Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual) intitolato Biosicurezza nei laboratori microbiologici e biomedici "Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories", 2007, Fifth Edition]. ATTENZIONE: il siero del pannello contiene azoturo di sodio allo 0,09%. L azoturo di sodio può reagire con il piombo ed il rame delle condutture idrauliche e formare degli azoturi metallici altamente esplosivi. Allo smaltimento fare scorrere un grande volume di acqua per evitare il depositarsi di azoturi. 1
2 ISTRUZIONI PER L USO Controllo Pattern di colorazione IFA 1. I sieri del pannello sono forniti non diluiti. Devono essere trattati ed analizzati come campioni di pazienti. 2. Analizzare i sieri del pannello come se fossero sieri di pazienti seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo dell. 3. Determinare il pattern ed il livello di intensità della colorazione di ciascun siero utilizzando i seguenti criteri: 4+ Fluorescenza verde chiaro brillante 3+ Fluorescenza verde chiara accesa 2+ Fluorescenza positiva chiaramente distinguibile 1+ La più bassa fluorescenza specifica che permette di differenziare chiaramente una struttura cellulare dalla fluorescenza di fondo. Controllo IFA della sensibilità del siero 1. Dopo aver preparato una diluizione 1:40 del pannello sierico in salina tamponata con fosfato (PBS), continuare a preparare diluizioni doppie seriali fino ad una diluizione di almeno 1: Analizzare le diluizioni seguendo le istruzioni contenute nel foglietto illustrativo del kit. 3. Determinare il titolo estremo di ogni siero del pannello. Il titolo estremo è la diluizione maggiore del siero che mostra un intensità di colorazione pari a 1+. Questo pannello sierico può essere utilizzato come parte delle procedure del controllo della qualità per le analisi alla immunofluorescenza su substrati. Osservare l intensità di colorazione per ciascun siero. Il titolo estremo è determinato dalla diluizione con un intensità di colorazione di 1+. Una sensibilità accettabile per la propria analisi può essere verificata ottenendo lo stesso estremo (+ una diluizione doppia) come mostrato nella sezione contenente le specifiche del controllo della qualità. Il titolo di siero effettivamente riscontrato nel proprio laboratorio può variare di più o meno una diluizione doppia per via di differenze relativamente a tecnica, interpretazione dei dati o microscopio utilizzati. Nel caso in cui i propri risultati dovessero variare di due o più diluizioni doppie, pregasi rivolgersi al nostro Reparto di assistenza tecnica chiamando il numero (U.S. & Canada soltanto): , (all'esterno U.S.): oppure inviando un FAX al numero NOTA: le specifiche del controllo della qualità elencate in basso sono state ottenute utilizzando substrati, reagenti ed apparecchiature INOVA Diagnostics. I titoli ottenuti possono variare da laboratorio a laboratorio in base ai substrati, ai reagenti, al microscopio, alla fonte di luce, all età della lampadina e all ingrandimento utilizzati per stabilire il titolo estremo. Controllo del siero 1. I sieri del pannello sono forniti non diluiti. Devono essere trattati ed analizzati come campioni di pazienti. 2. Analizzare i sieri del pannello come se fossero sieri di pazienti seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo dell. 3. Determinare la reattività di ciascun siero, positiva o negativa, e compararla con la reattività ottenuta con l della INOVA Diagnostics. 2
3 Questo pannello sierico può essere utilizzato come parte della procedura del controllo della qualità per gli. Determinare il valore delle unità per ciascun siero del pannello seguendo le istruzioni riportate nel foglietto illustrativo del kit. Utilizzare questi valori in conformità con il foglietto illustrativo per determinare se il campione è positivo o negativo per gli autoanticorpi ANA. Una sensibilità accettabile per la propria analisi può essere verificata ottenendo la stessa interpretazione (positiva o negativa) come mostrato nella sezione contenente le specifiche del controllo della qualità. NOTA: le specifiche del controllo della qualità elencate in basso sono state ottenute utilizzando reagenti, procedure ed apparecchiature della INOVA Diagnostics. I risultati possono variare da laboratorio a laboratorio in base al produttore del kit, alla temperatura del laboratorio, alle tecniche ed al lettore di piastra microwell utilizzati. Specifiche del controllo della qualità Ciascun siero di questo pannello è stato analizzato con tre partite di (NOVA Lite ) e tre partite di (QUANTA Lite ). Queste analisi sono state eseguite nei laboratori del Controllo della Qualità della INOVA Diagnostics utilizzando reagenti INOVA e conformemente a quanto riportato nei foglietti illustrativi INOVA. Per l analisi IFA è stato utilizzato un microscopio con lampadina alogena da 100 watt ed un ingrandimento di 400x. Per l analisi ELISA è stato utilizzato un lettore di piastra microwell regolato a 450 nm con riferimento a 620 nm. Siero A del pannello ANA N. di partita A Pattern: Mitocondrio : Positivo : Positivo : Positivo Siero B del pannello ANA N. di partita B Pattern: Pontos Nucleares : Positivo : Positivo : Positivo Siero C del pannello ANA N. di partita C Pattern: Omogeneo : Positivo : Positivo : Positivo Siero D del pannello ANA N. di partita D Pattern: Ribosomiale : Positivo : Positivo : Positivo 3
4 Siero E del pannello ANA N. di partita E Pattern: Nucleolare : Negativo : Negativo : Negativo Siero F del pannello ANA N. di partita F Pattern: PCNA : Positivo : Positivo : Positivo Siero G del pannello ANA N. di partita G Pattern: Scl : Positivo : Positivo : Positivo Siero H del pannello ANA N. di partita H Pattern: Granuloso : Positivo : Positivo : Positivo Siero I del pannello ANA N. di partita I Pattern: Centromereo : Positivo : Positivo : Positivo Siero J del pannello ANA N. di partita J Pattern: Negativo Negativo Negativo Negativo 4
5 Fornitore: INOVA Diagnostics, Inc Old Grove Road San Diego, CA United States of America Technical Service (U.S. & Canada Only) : Technical Service (Outside the U.S.) : support@inovadx.com Rappresentante Autorizzato: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D St. Ingbert, Germany Tel.: Fax.: ITA July 2012 Revision 13 5
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