AGGIORNAMENTI SULL ANALISI DEI RESIDUI DI PESTICIDI MEDIANTE METODI A SINGOLO RESIDUO NELL AMBITO DEI PROFICIENCY TEST EUROPEI E NAZIONALI
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1 AGGIORNAMENTI SULL ANALISI DEI RESIDUI DI PESTICIDI MEDIANTE METODI A SINGOLO RESIDUO NELL AMBITO DEI PROFICIENCY TEST EUROPEI E NAZIONALI Workshop «Laboratori Nazionali di Riferimento AO/CF/FV/SRM e Laboratori Ufficiali per l analisi di residui di antiparassitari in alimenti» Angela Santilio Laboratorio Nazionale di Riferimento per i residui di pesticidi metodi a singolo residuo Istituto Superiore di Sanità Dipartimento Ambiente e Salute angela.santilio@iss.it
2 INTRODUZIONE EUPTSRM spinaci Metodi di analisi nei proficiency test
3 I risultati del PT Europeo su spinaci EUPT-SRM11 è stato condotto tra Aprile e Giugno Il test è stato condotto su omogenato di spinaci.
4 I risultati del PT Europeo su spinaci Composti obbligatori da ricercare 2,4-D Cyromazine BAC-C14 DTC Dodine Ethefon Fluazifop Glyfosate Haloxyfop TFNA (metabolita flonicamid) TFNG (metabolita flonicamid) Tolylfluanide Composti facoltativi da ricercare BAC-C10-C18 Chlorate DDAC Dithianon Fosetyl Phosphinc acid MCPA MCPB Perchlorate Pymetrozine Quizalofop Triclopyr
5 I risultati del PT Europeo su spinaci 6 composti obbligatori presenti: Cyromazine, DTC, Dodine, TFNA e TFNG (metaboliti Flonicamid), Tolylfluanide 8 composti opzionali presenti : BAC-C14, Chlorate, Dithianon, Perchlorate, Pymetrozine, Quizalofop, Triclopyr.
6 I risultati del PT Europeo spinaci Campione addizionato (350 g) Campione non addizionato (350 g) (bianco). I campioni furono inviati ai laboratori partecipanti in ghiaccio secco.
7 I risultati del PT Europeo spinaci 13 laboratori partecipanti di cui 2 privati 5 laboratori al Nord 5 laboratori al Centro 3 laboratori al SUD 1 privato e 1 laboratorio ufficiale non hanno presentato i risultati 2 laboratori hanno analizzato tutte le sostanze 1 laboratorio ha analizzato 3 sostanze 5 laboratori hanno analizzato 2 sostanze 2 laboratori hanno analizzato 1 sostanza
8 I risultati per i composti obbligatori Analita Cyromazina DTC Dodina TFNA TFNG Tolylfluanide Valore assegnato (mg/kg) 1,514 1,298 1,243 0, Lab no ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ,400; 0,3 1,370; 0, ; ; ,350; -0,4 1,050; -0, ,299; -2, ;
9 I risultati per i composti facoltativi Analita BAC-C14 Clorato Dithianon Phosphonic acid Perchorate Pymetrozine Quizalofop Triclopyr Valore Assegnato (mg/kg) Lab no ; ; ; ; ; ;-0.6 FN; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ,310; -1, ; ;
10 I risultati del PT Europeo spinaci Composti obbligatori 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% 70% 46% 46% 15% 15% 46% Serie1
11 I risultati del PT Europeo su spinaci Composti facoltativi 40% 35% 38% 31% 30% 25% 20% 15% 10% 15% 8% 15% 8% 15% 5% 0%
12 I risultati del PT Europeo su spinaci Per l Italia hanno partecipato 11 laboratori ufficiali e 2 laboratori privati. Due laboratori non hanno inviato risultati (1 laboratorio ufficiale e 1 laboratorio privato. I laboratori partecipanti hanno determinato pochi composti rispetto alla lista fornita da EURL-SRM. I valori di z-score sono inferiori a 2 ad eccezione dei valori di z-score >3 per Dodina e Ditiocarbammati e dei valori >2 per Cyromazina e Tolylfluanide.
13 I metodi di analisi fenossiacidi Due metodi: QuEChERS metodo (EN 15662) QuEChERS metodo acidificato (A-QuEChERS) QuEChERS estrazione con 10 ml acetonitrile contenente 1% acido formico e successiva ripartizione con 1g NaCl e 4g MgSO 4. Agitare per 15 minuti mediante agitator meccanico. Non viene condotta idrolisi alcalina poiché è necessario avere I composti nella forma acida. 22
14 I metodi di analisi fenossiacidi 1-Naphtyl acetic acid, 2,4,5-T, Fenopropo (2,4,5-TP), 2,4,6- Triclfhlorophenol, 2,4-D, 2,4-DB, 2,4-DP (dichlorprop), 2- Naphthoxyacetic acid, 4-CPA, Acifluorfen, Bentazone, Bromacil, Bromoxynil, BTS 9608 (metabolita Prochoraz) Clopyralid, Dalapon, Dicamba, Diflufenzopyr, Dikegulac, Fenoxaprop-p, Fluazifop, Fluroxypyr, acido Giberellico, Haloxyfop, Imazamox, Imazapyr, Imazethapyr, Inabenfide, Ioxynil, MCPA, MCPB, MCPP, Pentachlorophenol, Quizalofop, TFNA (metabolita flonicamid), TFNG (metabolita flonicamid), Triclopyr (IS= 2,4-D-D3, BNPH).
15 Metodo di analisi per la dodina Per la determinazione della Dodina utilizzando il QuEChERS e LC-MS/MS si osserva una sovrastima dei recuperi quando le soluzioni di calibrazione sono preparate in solvente. L effetto è attribuibile alla tendenza della Dodina a interagire con la superfice attiva, soprattutto in assenza di componenti della matrice competitive e può variare da strumento a strumento. Per eliminare tale effetto potrebbero essere utilizzate soluzioni di calibrazione in matrice. Alternativamente, l acidificazione delle soluzioni di calibrazione in solvente con acido formico può minimizzare queste interazioni.
16 Metodi di analisi QuPPe metodo per prodotti vegetali Version: V9.2 LC Method 1.1: Ethephon, HEPA, Glyphosate, AMPA, Glufosinate, MPPA, N-Acetylglufosinate LC Method 1.2: Ethephon, HEPA, Glyphosate, AMPA, Glufosinate, MPPA, N-Acetylglufosinate, Phosphonic acid, N-acetyl-AMPA, Fosetyl-aluminium LC Method 1.3: Ethephon, HEPA, Glyphosate, AMPA, Glufosinate, MPPA, N-Acetylglufosinate, Phosphonic acid, N-acetyl-AMPA, Fosetyl-aluminium, Maleic hydrazide, Perchlorate, Chlorate, Cyanuric acid, Bialaphos, N-Acetylglyphosate LC Method 1.4: Phosphonic acid, Perchlorate, Chlorate (better performing for these 3 compounds than method 1.3), Bromate, Bromide LC Method 2: Fosetyl-Al, Maleic hydrazide, Perchlorate LC Method 3: Amitrole, Chlormequat, Mepiquat, Difenzoquat, Daminozide, Trimesium, ETU, PTU, Cyromazine LC Method 4.1: Paraquat, Diquat, Chlormequat, Mepiquat, Difenzoquat, Daminozide, N,N- Dimethylhydrazine, Trimesium, Cyromazine, Nereistoxin, Melamine, Propamocarb LC Method 4.2: Amitrole, ETU, Chlormequat, Mepiquat, Daminozide, PTU, Cyromazine, Trimesium, Nereistoxin, Difenzoquat, Melamine, Propamocarb, Morpholine, Diethanolamine, Triethanolamine, Aminocyclopyrachlor, Choridazon-desphenyl, Mepiquat-4-hydroxy, Propamocarb-N-desmethyl, Propamocarb- N-oxide LC Method 5: Chlormequat, Mepiquat, Difenzoquat, ETU, PTU LC Method 6: Kasugamycin, Streptomycin LC Method 7: Morpholine, Diethanolamine, Triethanolamine (= wax additives present in extracts of waxtreated crops) LC Method 8: 1,2,4-Triazole (TRZ), Triazole-alanine (TA), Triazole-acetic acid (TAA), Triazole-lactic acid (TLA) and 1,2,3-Triazole (= Triazole Derivative Metabolites, TDMs) Last update of method:
17 Metodi di analisi per Flonicamid e metaboliti Per la determinazione del Flonicamid e suoi metaboliti (TFNA, TFNG) si applica il metodo QuEChERS e il QuEcHERS modificato. Per aumentare i recuperi per TFNA e TFNG è consigliabile acidificare usando acetonitrile 1% con acido formico. Non è necessaria nessuna purificazione. Tale metodo permette di ottenere buoni recuperi. Usando la procedura del QuEChERS normale è possibile ottenere buoni recuperi per il flonicamid e il metabolita TFNA-AM.
18 Metodo di analisi per Pymetrozine Pymetrozine determinata mediante il QuEChERS mostra dei recuperi inferiori al 70% (45% - 60%). Questo comportamento è dovuto alle carattere amfillilico della molecola, comprende gruppi solubili e insolubili in acqua. In funzione dell ambiente in cui si estrae il valore dei recuperi varia. Nel caso del QuEChERS usando il tampone citrato il ph è circa 4, la presenza del MgSO4 provoca una diminuzione dl ph poiché lo ione Mg 2+ forma un complesso con il citrato che rilascia il protone. Di conseguenza i recuperi sono <70%.
19 Metodo di analisi per Pymetrozine Da uno studio fatto dal EURL SRM si è dedotto che il ph può essere incrementato sostituendo il citrato con l acetato e le miscele ottimali sono: 4 g MgSO 4 +1 g NaCl g sodium acetate (miscela A) 4 g MgSO 4 +1 g Mg-Acetate (miscela B) Recuperi con miscela A: 86% succo arancia; 89% cetriolo Recuperi con miscela B: 86% succo arancia e cetriolo Analisi cromatografica: Colonna: Aqua C18 Fase mobile: formiato d ammonio 5 mm in H 2 O; formiato d ammonio 5 mm in CH 3 OH ESI positivo IS: Chlorpyrifos-ethyl D10
20 Metodo di analisi per Bifenazate Bifenazate e il Bifenazate-diazene sono determinati applicando il QuEChERS. La particolarità è che l estratto grezzo o il purificato devono essere trattati con acido ascorbico per proteggere il Bifenazate dall ossidazione e per convertire il Bifenazate-diazene a Bifenazate. 1 ml di estratto grezzo o di purificato sono addizionati con 25 ml di soluzione di acido ascorbico (30%, w/w) e lasciati per una notte prima di iniettare.
21 Metodo di analisi per Bifenazate Cromatografia liquida LC/MS/MS ESI Positivo Colonna: Waters BEH C18 o equivalente 2.1x100 mm, 1.7 mm Fase mobile: 5 mm Formiato ammonio in H 2 0/CH 3 OH (95/5, v/v) 5 mm Formiato ammonio in CH 3 OH Temperatura colonna: 40 C IS: Chlorpyrifos D10 Recuperi ( 0,01 mg/kg) in diverse matrici (farina, succo arancia, cetriolo) 86%-101%
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