TEST hcg. Famiglia di prodotti n Solo per uso diagnostico in vitro
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1 TEST hcg Famiglia di prodotti n Solo per uso diagnostico in vitro
2 INDICE Uso previsto...2 Caratteristiche e vantaggi... 3 Riassunto e spiegazione... 4 Principio della procedura... 4 Deposito e stabilità... 6 Istruzioni per l'uso... 6 Materiali...7 Raccolta e gestione del campione... 9 Metodo del test...10 Interpretazione dei risultati...14 Controllo della qualità...16 Risultati previsti...17
3 Limitazioni...18 Smaltimento...19 Caratteristiche prestazionali...19 Riferimenti...29 USO PREVISTO Il test hcg di ADEXUSDx è un'analisi immunologica utilizzata per rilevare qualitativamente la gonadotropina corionica umana nel sangue intero umano, plasma o siero al fine di aiutare gli operatori sanitari a diagnosticare una gravidanza precoce. 2
4 CARATTERISTICHE Soglia clinica rilevante: 10 miu/ml Test con volume del campione piccolo (circa 40 μl) Semplice dispositivo a fase unica Test per sangue capillare umano, plasma o siero VANTAGGI Analisi rapida dei pazienti in 10 minuti Facilità d'uso Risultati accurati (correlati al metodo di laboratorio) 3
5 RIASSUNTO E SPIEGAZIONE I test di gravidanza si basano sul rilevamento della gonadotropina corionica (hcg), un ormone prodotto dalla placenta intorno al quarto giorno dal concepimento. I livelli di hcg aumentano rapidamente e raddoppiano ogni due giorni circa. Il test hcg di ADEXUSDx può rilevare l'hcg in una sola goccia di sangue intero, siero o plasma senza materiali o reagenti aggiuntivi. PRINCIPIO DELLA PROCEDURA Il test hcg di ADEXUSDx è un'analisi immunocromatografica rapida. Un campione viene dispensato nella zona di applicazione del campione per riempire il canale di ricezione. Quando una quantità sufficiente del campione è nel canale di ricezione, il campione fluisce in una striscia reattiva porosa e asciutta costituita da una membrana di separazione del plasma e da una membrana analitica. Prima il campione passa attraverso 4
6 5 PRINCIPIO DELLA PROCEDURA (CONTINUA) la membrana di separazione del plasma, che contiene il rilevatore di anticorpi monoclonali anti-hcg di topo contrassegnati con il colore. Il rilevatore di anticorpi si lega all'hcg nel campione per formare complessi di hcg colorati solubili, che successivamente si spostano verso la membrana analitica. I complessi di hcg colorati vengono catturati dagli anticorpi policlonali di capra anti-coniglio immobilizzati nella regione della striscia del test della membrana analitica. La comparsa della striscia visibile indica che il campione contiene un livello di hcg rilevabile. Gli anticorpi rilevati in eccesso fluiranno oltre la regione della striscia del test e si legheranno agli anticorpi policlonali di coniglio anti-topo immobilizzati nella regione della striscia di controllo della membrana analitica. Una striscia di controllo visibile senza la striscia del test assicura che il risultato negativo non è dovuto a una procedura impropria.
7 DEPOSITO E STABILITÀ Il test hcg di ADEXUSDx è stabile sigillato a 4 C-30 C (39 F-86 F) fino alla data di scadenza. ISTRUZIONI PER L'USO Avvisi e dichiarazioni precauzionali: Solo per uso diagnostico in vitro. Smaltire i test scaduti e i test effettuati come materiale a rischio biologico. Non utilizzare test scaduti. Non utilizzare se la busta sigillata è compromessa. Solo usa e getta. 6
8 ISTRUZIONI PER L'USO (CONTINUA) ATTENZIONE: il dispositivo contiene materiale di origine umana o animale e deve essere trattato come potenziale portatore e trasmettitore della malattia. MATERIALI MATERIALE FORNITO: Il test hcg di ADEXUSDx è confezionato singolarmente in buste di alluminio. 7
9 MATERIALE RICHIESTO, MA NON FORNITO: Test per sangue capillare Ago disponibile in commercio per ottenere il sangue dalla puntura di un dito Tamponi imbevuti di alcol Timer Test per sangue venoso, plasma e siero Contenitore di raccolta del campione eparinizzato per sangue venoso Contenitore di raccolta del campione appropriato e attrezzatura per ottenere il plasma o il siero Dispositivo di trasferimento del campione Timer 8
10 RACCOLTA E GESTIONE DEL CAMPIONE Test per sangue capillare Il campione di sangue derivante dalla puntura di un dito deve essere ottenuto subito prima dell'applicazione al test. Test per sangue venoso, plasma e siero Per i test per sangue venoso o plasma, ottenere il sangue mediante venipuntura. In un contenitore eparinizzato, raccogliere il sangue per il test o estrapolare il plasma dal sangue. Per i test per siero, ottenere il sangue mediante venipuntura. In un contenitore adatto, raccogliere il sangue e trattarlo per ottenere il siero. I campioni di sangue venoso possono essere conservati a una temperatura ambiente di 15 C-25 C, (59 F-77 F) per un massimo di 4 ore prima di eseguire il test. I campioni di plasma e di siero possono essere conservati per 72 ore a 2 C - 8 C (36 F - 46 F) prima di eseguire il test. Per poter 9 effettuare il test, i campioni devono essere a temperatura ambiente.
11 METODO DEL TEST Posizione di controllo (C) Posizione del test (T) Linea di riempimento Canale di ricezione Zona di applicazione del campione Cappuccio 10
12 METODO DEL TEST (CONTINUA) Per campioni di sangue intero capillare 1. Rimuovere il test hcg di ADEXUSDx dalla busta di alluminio e togliere il materiale essiccante e l'involucro. 2. Per promuovere il flusso di sangue verso la punta delle dita, chiedere al soggetto di abbassare la mano da pungere e massaggiare le dita verso le punte. 3. Per eseguire il test scegliere il dito anulare o medio. Strofinare la punta del dito con un tampone imbevuto di alcol e far asciugare bene il dito all'aria. 4. Preparare l'ago seguendo le istruzioni del produttore. 5. Scegliere il dito da pungere. Non utilizzare il centro o la punta del dito, perché sono le zone più sensibili. 6. Spremere il centro del dito (con una mano) mentre si preme 11
13 saldamente sul punto da pungere con l'ago (con l'altra mano). 7. Rilasciare l'ago seguendo le istruzioni del produttore. 8. Massaggiare delicatamente la punta del dito verso il punto in cui è stata punta per far fuoriuscire il sangue. 9. Toccare la parte punta con la zona di applicazione del campione del test hcg di ADEXUSDx. 10. Attendere finché il campione di sangue non viene risucchiato dal test hcg di ADEXUSDx. Se il campione di sangue non ha raggiunto la linea di riempimento, continuare a massaggiare il dito per far fuoriuscire altro sangue, finché il campione non raggiunge la linea di riempimento. 11. Avviare il timer. 12. Dopo 10 minuti osservare la comparsa delle strisce nella finestra del test in posizione di controllo (C) e in posizione del test (T). Vedere Interpretazione dei risultati. Non interpretare i risultati del test dopo 30 minuti. 12
14 METODO DEL TEST (CONTINUA) Per campioni di sangue venoso, plasma o siero 1. Rimuovere il test hcg di ADEXUSDx dalla busta di alluminio e togliere il materiale essiccante e l'involucro. 2. Applicare il campione alla zona di applicazione del campione del test hcg di ADEXUSDx utilizzando un dispositivo di trasferimento del liquido (non fornito) finché non raggiunge la linea di riempimento (circa 40 μl). 3. Avviare il timer. 4. Dopo 10 minuti osservare la comparsa delle strisce nella finestra del test in posizione di controllo (C) e in posizione del test (T). Vedere Interpretazione dei risultati. Non interpretare i risultati del test dopo 30 minuti. 13
15 INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI Una striscia di un'intensità qualsiasi di segnale che compare in posizione del test (T) è considerata positiva alla hcg. risultato positivo risultato positivo risultato negativo risultato non valido 14
16 INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI (CONTINUA) Note: L'intensità di colore della striscia di controllo e della striscia del test è variabile. L'intensità della striscia del test varierà a seconda della concentrazione di hcg presente nel campione. Tuttavia, il valore quantitativo di hcg non può essere determinato da questo test qualitativo. L'intensità del colore delle strisce aumenterà lentamente nel tempo per l'evaporazione del campione. Pertanto, non leggere il test dopo 30 minuti. 15
17 CONTROLLO DELLA QUALITÀ Il test hcg di ADEXUSDx ha una striscia di controllo procedurale interno. Qualora non compaia la striscia del test, la comparsa della striscia di controllo assicura la corretta applicazione del campione e la giusta cromatografia del test. Si consiglia di utilizzare i materiali di controllo della qualità esterni per verificare il risultato del test hcg di ADEXUSDx. Devono essere utilizzati un controllo hcg negativo (< 5 miu di hcg/ml) e un controllo hcg positivo (> 10 miu di hcg/ml). Si consiglia di seguire le linee guida locali, statali e federali suggerite. 16
18 RISULTATI PREVISTI Normalmente l'hcg nelle donne non incinta non è rilevabile dal test hcg di ADEXUSDx. Di solito le concentrazioni di hcg vanno dai 5 ai 50 miu/ml entro la prima settimana di età gestazionale o 3 settimane dopo dall'ultimo periodo mestruale (LMP). I livelli di hcg aumentano rapidamente, raddoppiano ogni due giorni circa e registrano un picco che supera miu/ml nell'ultima parte del primo trimestre della gravidanza. Se il test risulta negativo e si sospetta una gravidanza, ripetere il test dopo 2 o più giorni. Un test positivo poco marcato può essere confermato ripetendo il test 2 o più giorni dopo. 17
19 LIMITAZIONI Tra le altre condizioni cliniche che producono l'hcg sono comprese le malattie trofoblastiche e i tumori a cellule germinali. I test di gravidanza altamente sensibili come il test hcg di ADEXUSDx potrebbero rilevare gravidanze che si interrompono precocemente, un'eventualità che si verifica in circa una gravidanza su quattro. I risultati devono essere impiegati congiuntamente ad altri dati clinici e di laboratorio. I campioni con positività molto marcata potrebbero dare un risultato poco marcato sulla striscia di controllo. Non si è manifestato un effetto prozona (high dose hook) a ng di hcg/ml. Come con qualsiasi altra analisi che impiega anticorpi di topo, sono possibili interferenze di anticorpi umani anti-topo (HAMA) o di altre sostanze interferenti presenti nel campione. 18
20 SMALTIMENTO Smaltire i test scaduti e i test effettuati come materiale a rischio biologico. CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI Sensibilità: La striscia del test è stata progettata per essere visibile quando il test analizza un campione contenente una concentrazione di hcg di circa 10 miu/ml. Il test è stato calibrato con Architet di Abbott per ß-hCG totale calibrato con materiale a cui fa riferimento il 3 o standard internazionale 75/537 dell'oms. 19
21 Precisione di analisi con valori vicini alla soglia: Sono stati preparati tre gruppi di siero di pazienti positivi all'hcg per avere concentrazioni di hcg prossime a 20, 10 e 5 miu/ml. Venti (20) repliche di ciascun gruppo per un totale di 60 campioni sono state sottoposte al test hcg di ADEXUSDx. Il test hcg di ADEXUSDx ha identificato 40 campioni positivi (20 e 10 miu di hcg/ml) e 20 campioni negativi (5 miu di hcg/ml). Confronto metodologico: È stato effettuato uno studio comparativo tra il test hcg di ADEXUSDx e un'altra analisi del siero per hcg disponibile in commercio. Sono stati testati rispettivamente cinquantanove (59) e 57 campioni di siero femminile con concentrazioni di hcg superiori e inferiori a 10 miu/ml. 20
22 Altra analisi Test hcg di ADEXUSDx Positivi Negativi Positivi 59 4 Negativi Per i campioni di siero positivi all'hcg ( miu/ml), le due analisi hanno dato gli stessi risultati. Per i campioni di siero normali si sono verificate quattro discrepanze, in cui l'altra analisi ha dato risultati positivi e il test hcg di ADEXUSDx hcg ha dato risultati negativi. I campioni che hanno portato a queste discrepanze avevano concentrazioni di hcg di 2-6 miu/ml e sono stati riportati correttamente come negativi dal test hcg di ADEXUSDx in base al test hcg di ADEXUSDx con valore di soglia pari a 10 miu di hcg/ml. Per tutti gli altri campioni normali, i risultati del test hcg di ADEXUSDx hanno coinciso con quelli dell'altra analisi.
23 Test valutativi: A tre campioni di sangue intero umano normale è stata aggiunta dell'hcg per ottenere concentrazioni inferiori o superiori al valore di soglia di 10 miu/ml. A tre ospedali e in situ, per un totale di 4 siti, sono state fornite 5 repliche. Le repliche sono state inviate come campioni ciechi con un'etichetta univoca per ciascuna delle 15 provette. Tutti i siti hanno dato lo stesso risultato. 22
24 Sito Numero di risultati positivi/totale Sotto la soglia (senza additivi) Triplo della soglia Sei volte la soglia Concordanza intra-test 1 0/5 5/5 5/5 100% 2 0/5 5/5 5/5 100% 3 0/5 5/5 5/5 100% In situ 0/5 5/5 5/5 100% Concordanza tra siti 100% 100% 100% 23
25 Studio sulla diluizione: Sono state preparate tre diluizioni seriali duplici di plasma positivo all'hcg. Cinque repliche di ciascun campione sono state sottoposte al test hcg di ADEXUSDx. Tutti i campioni con concentrazioni di hcg superiori a 10 miu/ml hanno dato risultati positivi e quelli inferiori a 10 miu/ml hanno dato risultati negativi. Conc. hcg (miu/ml) Numero di positivi/totale 24,8 5/5 12,4 5/5 6,2 0/5 3,1 0/5 24
26 Correlazione tra sangue intero e plasma Al sangue intero eparinizzato di una donna non incinta è stata aggiunta dell'hcg per ottenere campioni con concentrazioni di hcg <1,2, 4, 9 e 19 miu/ml quando il plasma recuperato dal sangue con additivi è stato quantificato. I campioni di sangue e i relativi campioni di plasma, per un totale di 4 serie di campioni, sono stati sottoposti al test hcg di ADEXUSDx. Ogni serie è stata testata 5 volte. I risultati dei test per sangue e plasma erano correlati. Plasma Sangue intero Positivi Negativi Positivi 10 0 Negativi
27 Per valori di hcg pari o superiori a 9 miu/ml, i test effettuati sul sangue intero e sul plasma hanno dato gli stessi risultati. I due test hanno dato un segnale positivo lieve nel sangue intero a 4 miu di hcg/ml. Effetto prozona (hook): Al siero umano normale è stata aggiunta dell'hcg per avere una concentrazione di hcg pari a miu/ml. Cinque (5) repliche sono state sottoposte al test hcg di ADEXUSDx. In tutti i casi il segnale della striscia del test era ben marcato. Test per sangue capillare: I campioni di sangue capillare di 10 donatrici non incinta sono stati prelevati utilizzando gli aghi disponibili in commercio per pungere le dita. I campioni sono stati sottoposti al test hcg di ADEXUSDx ed esaminati dopo 10 minuti. In tutti i test era presente la striscia di controllo, il fronte dei globuli rossi era inferiore alla finestra del test, il fronte del plasma ha raggiunto l'estremità massima della striscia del test e non si è verificata emolisi. La striscia del test era assente in tutti i test che davano risultati negativi. 26
28 Specificità: I seguenti ormoni collegati sono stati aggiunti al siero per il controllo negativo umano. htsh hlh hfsh 1000 μiu/ml 500 miu/ml 1000 miu/ml I risultati negativi si sono verificati alle concentrazioni date. 27
29 Sostanze interferenti: Le seguenti sostanze potenzialmente interferenti sono state aggiunte ai campioni di siero contenenti da 0 a 10 miu di hcg/ml. Proteina Emoglobina Trigliceridi Bilirubina 14 g/dl 250 mg/dl 2000 mg/dl 15 mg/dl Nessuna delle sostanze alla concentrazione testata hanno interferito con il test hcg di ADEXUSDx. 28
30 RIFERIMENTI 1. Ho HH, O Connor JF, Nakajima ST, Tieu J, Overstreet JW, Lasley BL. Characterization of human chorionic gonadotropin in normal and abnormal pregnancies. Early Pregnancy. 1997; 3(3): Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma concentration of human chorionic gonadotropin from the time of implantation until the second week of pregnancy. Fertil. Steril. 1982; 37(6): Batzer FR. Hormonal evaluation of early pregnancy. Fertil. Steril. 1980; 34(1): Braunstein GD, Rasor J, Danzer H, Adler D, Wade ME. Serum human chorionic gonadotropin levels throughout normal pregnancy. Am. J. Obstet. Gynecol. 1976; 126(6):
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