ISTITUTO ZOOPROFILATTICO SPERIMENT~:~E;;... DELL'UMBRIA E DELLE MARCHE.,,~:~/ DELIBERAZIONE DEL DIRETTORE GENERALE

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1 ~,"~;'-'~;_.;:'...,.,. / ',> l,-o t:..\.:::::' ISTITUTO ZOOPROFILATTICO SPERIMENT~:~E;;... DELL'UMBRIA E DELLE MARCHE.,,~:~/ :;,J.. ' l,. ".;.. '...j,,;es! DELIBERAZIONE DEL DIRETTORE GENERALE n 25 del 21 gennaio 2014 Oggetto: Progetto di ricerca autofinanziato dall'istituto " Metrite ed Endometrite Bovina" - Responsabile' Scientifico Giovanni Filippini - codice RCIS52014.

2 DELIBERAZIONE DEL DIRETTORE GENERALE OGGETTO: Progetto di ricerca autofinanziato dall'istituto "Metrite ed Responsabile Scientifico Giovanni Filippini - codice RCIS IL DIRETTORE GENERALE VISTO il progetto di ricerca autofinanziato dall'istituto "Metrite ed endometrite Bovina" Responsabile Scientifico Giovanni Filippini - codice RCIS52014, allegato alla presente deliberazione per farne parte integrante e sostanziale; VISTA la deliberazione del Direttore Generale n. 288 del 16 novembre 2012 con la quale è stata approvata la proposta di Bilancio Preventivo per l'anno 2013 e la deliberazione del Consiglio di Amministrazione n. 7 del 23 novembre 2012 con la quale è stato approvato il Bilancio Economico Preventivo 2013, reso esecutivo con deliberazione di Giunta Regionale n del 27 dicembre 2012; ATTESO che: - la delibera del Direttore Generale n. 305 del 9 ottobre u.s. recita "la Regione Umbria con delibera n del ha ratificato la Conferenza dei Servizi delle Regioni Umbria e Marche del 26 ottobre 2012 con la quale l'istituto é stato autorizzato ad autofinanziare le Ricerche Scientifiche con i ricavi derivanti dall'attività commerciale (ovvero fuori dalle risorse nazionali assegnate per il funzionamento dell'ente) per un importo di all'anno purché /'Istituto stesso chiuda gli esercizi almeno pareggio di bilancio; - con la stessa delibera viene specificato che "non é possibile adottare la regolamentazione nazionale per le Ricerche finanziate dallo Stato e dalla Comunità Europea in quanto, le Ricerche proprie autofinanziate, non hanno un'entrata specifica finalizzata ma unicamente l'utilizzo di conti economici tra i conti della produzione"; PRESO ATTO che il Bilancio Economico Preventivo di cui alla deliberazione del Direttore Generale n. 353/2013 approvato dal Consiglio di Amministrazione con provvedimento del , ha determinato la previsione economica per l'anno 2014 al conto per complessivi euro ,00 il cui impiego è stato esplicitato nella relazione metodologica su criteri adottati - Allegato A - del suddetto bilancio; VISTO che il progetto, ha la durata di mesi 11, con decorrenza da 1 febbraio 2014 e termine 31 dicembre 2014; DATO ATTO che la Direzione Aziendale, ha valutato il merito e la compatibilità economica del progetto autorizzandone lo svolgimento e la conseguente predisposizione del presente atto; CONSIDERATO che tale Progetto ha come Responsabile Scientifico Giovanni Filippini, e che con il presente atto si provvede ad incaricarlo per tutto ciò che attiene alla gestione operativa dello stesso; DATO ATTO che il piano economico della ricerca, di cui in allegato, prevede di utilizzare le risorse pari ad uro ,00, così ripartite: uro ,00 per il personale non dipendente; uro 4.600,00 per il materiale di consumo; VISTA la dichiarazione regolarità tecnica rilasciata dal Responsabile dell'u.o. Gestione Ri Progetti Speciali, per quanto di competenza; 1 di 2

3 / " (~"~ L.!:. :'..~'.'" \ -;., ;';'..' "'. VISTA la dichiarazione di utilità per il se. I pubblico rilasciata da Giovanni Fili~pilJi,.in qualità di responsabile del progetto; y::,,' :! " I.~,,,.'.~ " I,., /....::..""..::~,,'",'. ;.,/ ACQUISITO il parere favorevole del Direttore Sanitario, per la parte di competenza, ai sè'nsi'eper gli effetti degli art. 12 comma 2, lettera a), delle leggi regionali n. 5/97 dell'umbria e n. 20/97 delle Marche ed ai sensi dell'art. 10 dello Statut del 'Ent, nonché la dichiarazione di legittimità, congruità ed utilità per il pubblico servizio; ACQUISITO il parere favorevole e di legittimità ttore Amministrativo, ai sensi e per gli effetti dell'art. 12 delle Leggi Regionali n. 5/97 dell'umbria e n. 20/97 delle Marche e ai sensi dell'art. 10 dello Statuto dell'ente, anche ai fini della verifica della compatibilità della s a l' sigenza di tutela dell'equilibrio finanziario complessivo della gestione e con i vincoli di fi,, ~/'....". -' \. \~,! Tutto ciò premesso DELIBERA 1. di dar corso al progetto autofinanziato dall'istituto "Metrite ed Endometrite Bovina" Responsabile Giovanni Filippini - codice RCIS52014, allegato alla presente deliberazione per farne parte integrante e sostanziale; 2. di stabilire che ai fini dell'aggregazione dei costi viene assegnato al progetto il codice aziendale RCIS52014 e che lo stesso dovrà essere utilizzato per le rilevazione dei costi relativi alle risorse destinate al personale non dipendente; 3. di incaricare il Responsabile della Progetto Giovanni Filippini, per tutto ciò che attiene alla gestione operativa del Progetto; 4. di incaricare il Direttore Sanitario della verifica dell'andamento del progetto; 5. di prevedere di utilizzare le risorse, pari ad uro ,00 secondo il piano economico della ricerca, così ripartito: uro 18,400,00 per il personale non dipendente; uro 4,600,00 per il materiale di consumo; 6. di acquisire, da parte dell'unità operativa GRPS, la relazione intermedia e finale del Progetto. 2 di 2

4 PROGETTO DI RICERCA CORRENTE PROPRIO ANNO 2014 Titolo del progetto: Metrite ed Endometrite Bovina. Durata del progetto (espressa in mesi): Il mesi (febbraio - dicembre 2014) Responsabile scientifico: Giovanni Filippini Descrizione sintetica del progetto: determinare la prevalenza dell'infezione da Coxie/la burnetii e l'incidenza di questa sull'eziopatogenesi della metrite/endometrite post-partum e descrivere le componenti infettive che intervengono nel decorso della metrite bovina e valutare l'influenza di questa infezione sulle performances riproduttive delle bovine da latte. Introduzione La metrite bovina è un'infiammazione dell'utero che si colloca generalmente post - partum, pur essendo una malattia poli fattoriale, essa è riconducibile prevalentemente ad un'infezione batterica. Clinicamente la metrite bovina si manifesta con ipertermia, scolo vaginale maleodorante e perdita della tonicità dell'utero. La metri te clinica si osserva prevalentemente nei primi lo giorni dopo il parto, mentre successivamente le manifestazioni divengono meno gravi, non c'è risentimento sistemico e in questo caso si parla di endometrite subclinica. In seguito a metri te si osserva frequentemente un peggioramento delle performance riproduttive dell'animale. Dalle bovine colpite da metrite sono stati isolati più di 35 agenti batterici, ma non tutti sembrano rivestire lo stesso ruolo nella patogenesi: Escherichia coli, Arcanobacterium pyogenes, Fusobacterium necrophorum, Prevote/la melaninogenica e Proteus spp. sono considerati agenti primari. (Mc Dougall S., 20 Il). Accanto a questi agenti batterici comunemente isolati in corso di metri te, riveste importanza crescente nell'eziopatogenesi della malattia il batterio intracellulare Coxie/la burnetii, agente della Febbre Q. Coxie/la burnetii è molto diffusa in natura ed è in grado di contagiare diverse specie animali, inclusi i mammiferi, gli uccelli, i rettili, e gli artropodi. Nell'uomo, l'infezione è spesso asintomatica, ma può essere causa di malattia acuta o cronica, con sintomi simil-influenzali, polmonite, epatite ed endocardite e può essere associata ad aborto e natimortalità. Nel bovino, il segno clinico più evidente, anche se non il più frequente, è l'aborto. In caso di aborto il feto si presenta macroscopicamente normale e, solo in alcuni casi, può presentare segni di broncopolmonite. La placenta può mostrare lesioni fibrinose intercotiledonari, con presenza di essudato, comunque non patognomoniche. L'infertilità, con allungamento del periodo partoconcepimento, metriti, endometriti tardive post inseminazione artificiale, presenza di bovine "repeat breeders", ritenzione degli invogli fetali associata o meno a parti anticipati, sono segni, molto spesso sottostimati, che possono essere correlati all'infezione da Coxie/la burnetii. In un recente studio condotto sul latte di massa per valutare la diffusione di Coxiella burnelii in allevamenti di bovine da latte è emersa una positività del 40, l % con una correlazione statisticamente significativa per quanto attiene l'incidenza di metriti/endometriti. In Italia l'incidenza della metrite/endometrite puerperale varia tra il lo e il 40% (Mari G. 2012) e per il territorio Umbro-Marchigiano costituisce uno dei principali motivi di perdita economica per l'allevamento di bovine da latte a causa della ridotta fertilità degli animali affetti che determina un aumento dell'intervallo parto-concepimento e del tasso di rimonta e una riduzione del tasso di concepimento. Scopo di questo lavoro sarà quindi: l. Creare un iter diagnostico per la diagnosi della: l.l metrite bovina, basato sul confronto tra il rilievo clinico (gold standard) e gli accertamenti diagnostici di tipo batteriologico, molecolare e citologico. Si effettua sui campioni del I prelievo (entro 12 giorni dal parto).

5 .. (i k0c:-ii'i7'.;o", oi:y.~f "';"\1' ~', ', t!.4'~t"",,~_. >-:} l J.A.",._ -~. _~,," 1.2 endometrite subclinica, basato sul confronto tra l'accertamento dia",onostico\~i 'f;p'i'< -I." '0",, \.~, citologico (gold standard), quello batteriologico, molecolare e l'esame ecografié.,0"i.si effettua sui campioni del II prelievo (entro giorni dal parto). """.C 1.3 Descrivere l'incidenza e il ruolo dell' infezione da Coxiella burnelii e le dinamiche delle popolazioni batteriche in uteri affetti da metrite e in uteri sani nel periodo postpartum (I-50 giorni p.p.) 2. Valutare l'impatto della metrite sulle performance riproduttive degli animali (pluripare e primipare) Saranno oggetto di valutazione i seguenti parametri: Intervallo parto - l calore. Tempo trascorso tra il parto e il primo calore Intervallo parto-concepimento. Tempo trascorso tra il parto e il concepimento % di vacche gravide al l intervento % di vacche gravide al Il intervento Ritenzione di placenta Materiali e metodi Campionamento La popolazione campionata sarà costituita da tutte le bovine provenienti da un allevamento situato nell'italia centrale, nel periodo post-partum. L'azienda verrà seguita inizialmente per Il mesi. Tutte le bovine al parto saranno campionate due volte sulla base della tempistica e di quanto descritto nel protocollo di prelievo. Il veterinario fornirà preliminarmente l'identificativo dei capi presenti e la data presunta del parto e il numero di parto di ciascun animale. TEMPISTICA Le bovine saranno esaminate e campionate 3 volte sulla base della seguente tempistica: 1. nell'immediato post-partum (I-12giorni); codice prelievo: PUERP; 2. a circa giorni dal parto; codice prelievo ENDO. Per ogni prelievo saranno effettuate le operazioni descritte nel protocollo di prelievo: PROTOCOLLO PRELIEVO 1. compilazione di una scheda di accompagnamento con i dati dell'animale campionato (comprendente identificativo dell'animale, data del parto, data del prelievo, indicazione del trattamento eventualmente effettuato). La scheda sarà comprensiva del QUESITO diagnostico attribuito a ciascuno dei due prelievi, in modo da facilitare le operazioni di accettazione. 2. esecuzione di due campioni mediante cytobrush (uno per conta PMN e uno per batteriologicolpcr Coxiella burnelii) e suo conferimento al laboratorio, il campione sarà identificato con il codice del prelievo e l'id dell'animale. Esami di laboratorio I campioni verranno mantenuti a 4 C e conferiti in laboratorio entro 24 ore dal prelievo, unitamente alle schede di cui sopra, ed accettate con identificazione di opportuno quesito diagnostico, comprendente l'identificativo di prelievo. Sarà specificato l'id dell'animale.

6 Gli accertamenti di laboratorio saranno i seguenti: conta dei PMN; esame batteriologico standard; esame batteriologico in microaerofilia; esame batteriologico in anaerobiosi; PCR da cytobrush uteri no per la ricerca di Coxiella burnetii. Tutti gli esami colturali verranno eseguiti tramite procedura semi-quantitativa. DESCRIZIONE DELLE PERFORMANCE RIPRODUTTIVE Raccolta dei dati ed elaborazione statistica Tutti i dati raccolti, tramite schede o indagini di laboratorio, verranno mantenuti su database Excel ed aggiornati costantemente. a cura dell'izsum I dati necessari al calcolo dei seguenti parametri: l. Intervallo parto - lo calore. Tempo trascorso tra il parto e il primo calore 2. Intervallo parto-concepimento. Tempo trascorso tra il parto e il concepimento 3. Ritenzione di placenta saranno raccolti a cura del veterinario aziendale e fomiti su foglio di lavoro excel. Obiettivi e indicatori per la verifica dei risultati raggiunti. Obiettivo 1. Espressione dei risultati delle prove diagnostiche: esame clinico=positivo/negativo; esame citologico= categorizzazione degli esiti; esame batteriologico=categorizzazione degli esiti. PCR Coxiella burnetii= positivo/negativo Obiettivo2: Obiettivo3: Espressione dei risultati delle prove diagnostiche Espressione dei risultati delle perfomance riproduttive Al termine degli undici mesi i dati subiranno una prima elaborazione per la raccolta di queste informazioni: 1. Valutazione dei dati di laboratorio (conta dei PMN, infezioni batteriche) tra la popolazione malata e quella sana per delimitare i parametri utili nella diagnosi di metri te bovina; 2. Dati descrittivi relativi alla prevalenza dei diversi patogeni e alla conta dei PMN. Criticità del progetto Una eventuale carenza di dati (pochi animali appartenenti alle subpopolazioni evidenziate nell'obiettivo 3, troppe performance riproduttive) potrebbe inficiare una eventuale analisi statistica ed il conseguente raggiungimento di alcuni obiettivi in particolar modo del terzo. È possibile però aumentare il numero di animali e quindi di campioni (valutando le possibilità economiche e fattive del laboratorio) subito dopo la prima verifica (circa sei mesi dopo l'inizio del progetto) e/o diminuire le performance riproduttive o le sottopopolazioni da esaminare. Trasferibilità. I risultati della ricerca possono essere immediatamente trasferiti nell'ambito dell'attività diagnostica applicata ai vari settori zootecnici.

7 ... I risultati del progetto saranno, oggetto di divulgazione operatori di Sanità Pubblica, aglizò~iàtiied. agli allevatori anche In occasione di Corsi/Seminari specifici; saranno lnoltrevoggetto"cù pubblicazioni scientifiche e presentazioni In occasione di congressi e convegni riaiionali ed internazionali,,..' " PREVENTIVO DI SPESA Voce di spesa Personale - Borsa di studio (Medico veterinario per Il mesi) Materiale di consumo TOTALE Costo ,600 23,000

8 ATTESTATO DI PUBBLICAZIONE Delibera del Direttore Generale no: 25 del 21/01/2014 Il presente verbalerdildeliber:a viene pubblicato all'albo pretorio dell'istituto I. I l "1 "" I, il giorno:, U,_ - o per la durata di giorni)5.,.-, '\.< ".''.~ A~'.....? Il Dirigente : r.' Y \.:. ~'. -- j, ' \.. ' ';.:,. " ESECUTIVITA' cdh~~gùitatl.2 1 GG!. 2li;~, ai sensi della deliberazione del Consiglio di Amministrazione n, 6 del 24//03/2010, Attestato di conformità all'originale La presente copia è conforme all'originale composta da no pagine. esistente presso l'ufficio Il Dirigente: _ Trasmissione delibera: Collegio dei Revisori Registrato a p. n. 119 del Registro n. 9 delle deliberazioni del Direttore Generale. I Inviata alla Corte dei Conti il