Uni-Gold HSV-2 Rapid. Cod. catalogo
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- Gianluca Grande
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1 od. catalogo test AMPO DI UILIZZO è u test rapido destiato alla rilevazioe qualitativa della preseza o asseza di aticorpi della classe IgG umai cotro il virus dell'herpes simplex di tipo 2 (HSV-2) el sague itero umao (veoso o capillare) o el siero. Il test è destiato all'aalisi degli adulti sessualmete attivi o delle doe i gravidaza per la diagosi presutiva dell'ifezioe da HSV-2. Il dispositivo o è destiato alla popolazioe pediatrica, allo screeig eoatale o all'aalisi di pazieti immuocompromessi. Il presete kit o è destiato all'autoaalisi e o è autorizzato dalla FDA per il test di doatori di sague o siero. Solo per uso diagostico i vitro. est a moderata complessità. INRODUZIONE E DESRIZIONE Il virus dell'herpes simplex (HSV) è u patogeo umao comue presete i tutto il modo che geera diverse malattie. Il virus dell'herpes simplex è stato caratterizzato i due diversi sierotipi: L'HSV- è geeralmete associato ad ifezioi ella ligua, bocca, labbra, farige ed occhi; metre l'hsv-2 è pricipalmete associato a ifezioi geitali e eoatali. Negli Stati Uiti la maggior parte dei giovai sessualmete attivi co ulcere geitali preseta herpes geitale. 2 Le ulcere geitali soo state associate ad u rischio aumetato di ifezioi da HIV. 2 Molti casi di herpes geitali soo trasmessi da persoe che o soo cosapevoli di essere ifette o o ricooscoo i sitomi. Il eters for Disease otrol ad Prevetio (D) sostiee che la cosuleza è u aspetto importate della gestioe dei pazieti co herpes geitale. 2 Ua delle cosegueze più gravi dell'herpes geitale è l'herpes eoatale. 3 Quasi tutte le ifezioi eoatali da HSV-2 soo acquisite co il passaggio i u caale del parto ifetto di madri che soo asitomatiche al parto. 2,5 Le madri presetao u rischio maggiore di cotrarre u'ifezioe da HSV geitale primaria o iiziale se soo sieroegative a uo o etrambi i tipi di HSV e il loro parter è sieropositivo. 7,8 PRINIPIO DEL ES è u test immuocromatografico che utilizza u atigee gg-2 purificato legato a ua membraa di itrocellulosa per rilevare aticorpi ati-hsv-2. Il campioe è aggiuto al pozzetto del campioe e filtrato attraverso la membraa di separazioe del sague el coperchio dell'alloggiameto. Il coperchio dell'alloggiameto viee aperto 30 secodi dopo l'aggiuta del campioe dove è accessibile u pozzetto di tampoe. Il tampoe è aggiuto al pozzetto del tampoe i modo che il campioe e il coiugato co oro degli aticorpi specifico per IgG umai depositato tra il tampoe e la zoa di deposito del campioe possa migrare attraverso la membraa di itrocellulosa. Quado il campioe migra attraverso la membraa, la liea del test HSV-2 cattura gli aticorpi ati- HSV-2 preseti el campioe. Se o vi soo aticorpi ati-hsv-2 preseti el campioe o è visibile alcua liea del test. Il campioe viee a cotatto co la liea di cotrollo che cattura l'ig umao presete el campioe. La formazioe di ua liea rosa ella zoa di cotrollo del dispositivo idica che il dispositivo sta fuzioado i modo corretto. MAERIALI FORNII Il kit cotiee materiali sufficieti per eseguire 5 determiazioi. utti i materiali o aperti soo stabili a ua temperatura compresa tra 2 e 30 fio alla data di scadeza riportata sull'etichetta del reagete. Dispositivi del test, 5 dispositivi cofezioati sigolarmete i sacchetti iascu dispositivo è cofezioato sigolarmete i u sacchetto co dessiccate. Gli igredieti attivi el dispositivo soo gg-2 ativi purificati e ati-igg umai su ua membraa di itrocellulosa e aticorpi ati-igg umai coiugati co particelle di oro colloidali. ampoe, fiala di 2,5 ml Il tampoe è costituito da ua soluzioe tampoe salia isotoica (cloruro di sodio allo 0,9%) coteete u detergete o ioico e 0,% di sodio azide come coservate. Provette per prelievo capillare moouso e statuffi, 5 provette e statuffi Provette capillari rivestite di litio-eparia graduate moouso e statuffi da utilizzare co sague itero capillare. Pozzetto del campioe Pozzetto del tampoe MAERIALI RIHIESI E DISPONIBILI OME AESSORI AL KI otrolli per il kit del test. odice catalogo iascua cofezioe di cotrolli per il kit cotiee fiala di cotrollo positivo (0,5 ml) e fiala di cotrollo egativo (0,5 ml). MAERIALI RIHIESI MA NON FORNII Orologio o croometro capace di misurare i secodi oteitore per rifiuti a rischio biologico Guati moouso Pao atisettico ampoe di garza sterile Beda adesiva Articoli addizioali richiesti per prelievo di sague itero co veiputura Dispositivi per prelievo di sague per sague itero e siero mediate veiputura. Pipetta calibrata da utilizzare co sague itero veoso (20 µl) e siero (5 µl). etrifuga per trattameto. Articoli addizioali richiesti per apparecchio pugidito (sague itero capillare) Bisturi sterile capace di produrre u campioe di 20 µl. AVVERIMENI E PREAUZIONI. Per uso diagostico i vitro. 2. Leggere tutto il foglietto illustrativo prima di utilizzare il prodotto. Seguire la procedura come descritto el presete foglietto illustrativo e ella guida di cosultazioe facile. L'iosservaza delle procedure può determiare risultati errati. 3. Prima di eseguire le aalisi, gli operatori devoo leggere e cooscere le precauzioi geeriche per la prevezioe della trasmissioe del virus dell'immuodeficieza umaa, il virus dell'epatite B e altri patogei veicolati dal sague i ambieti saitari. 4. utti i prodotti a base di sague umao devoo essere maipolati come materiale potezialmete ifetto. I cotrolli, i campioi di siero e le apparecchiature che vegoo a cotatto co questi campioi devoo essere cosiderati potezialmete ifetti e decotamiati o smaltiti co le adeguate precauzioi per i rifiuti a rischio biologico. 5. Il tampoe cotiee 0,% di sodio azide come coservate. La sodio azide può reagire co le tubature i piombo o rame formado azidi di metalli altamete esplosive. Se il tampoe viee scaricato el lavadio, far scorrere a lugo l'acqua per evitare l'accumulo di azide. Di tato i tato decotamiare gli scarichi co idrossido di sodio al 0% (AENZIONE: corrosivo), lasciar riposare per 0 miuti e poi sciacquare co abbodati quatità di acqua. 6. I materiali per le aalisi (campioi, dispositivi del test e provette) devoo essere smaltiti come rifiuti a rischio biologico secodo le orme locali, azioali e/o federali. 7. sostituire o miscelare i reageti di lotti diversi o di produttori diversi. 8. forare la membraa del test co la pipetta per il prelievo o la puta della pipetta. La membraa può essere daeggiata dal cotatto. 9. La cotamiazioe microbica dei campioi di siero può produrre risultati errati. Utilizzare teciche asettiche per evitare la cotamiazioe microbica. 0. utilizzare il dispositivo se il sacchetto è stato perforato.. iascu dispositivo è esclusivamete moouso. 2. utilizzare il kit dopo la data di scadeza. 3. Per leggere i risultati dei test è ecessaria u'adeguata illumiazioe. 4. Eseguire il test a ua temperatura ambiete compresa tra 5 e L'itesità della liea del test o è ecessariamete correlata co il livello di aticorpo el campioe. ISRUZIONI PER LA ONSERVAZIONE. oservare a ua temperatura compresa tra 2 e I compoeti del kit soo stabili fio alla data di scadeza se coservati el modo idicato. 3. NON ONGELARE. 4. Se coservati i frigorifero, portare i compoeti a temperatura ambiete prima dell'uso (circa 30 miuti). 5. utilizzare dopo la data di scadeza idicata. 6. oservare i cotrolli per il kit del test foriti separatamete a ua temperatura compresa tra 2 e 8. Pagia di 6 - I
2 AMPIONAMENO E PREPARAZIONE Per eseguire questo test può essere utilizzato soltato sague itero capillare o veoso o siero. Prelevare i campioi i modo asettico utilizzado teciche di prelievo campioi approvate SANGUE INERO PRELEVAO MEDIANE APPAREHIO PUNGIDIO Prelevare i campioi di sague i modo asettico utilizzado le teciche approvate. 9,20 Usare u pao asettico per pulire il dito. Lasciar asciugare completamete il dito o asciugare co u tampoe di garza sterile. Utilizzare u bisturi sterile capace di produrre gocce di sague sufficieti a riempire la provetta da 20 µl. Pugere la pelle lotao dal cetro del polpastrello. eere il dito rivolto verso il basso. Esercitare ua lieve pressioe accato al puto del foro. Evitare di comprimere il dito per farlo saguiare. ogliere la prima goccia di sague co u tampoe di garza sterile. Lasciar formare ua goccia uova di sague. Massaggiare la base del dito per produrre ua goccia di volume sufficiete se il flusso del sague o è adeguato. Evitare di "mugere" il dito. Il sague itero raccolto mediate apparecchio pugidito deve essere utilizzato su immediatamete dopo il prelievo. SANGUE INERO PRELEVAO MEDIANE VENIPUNURA Prelevare i campioi di sague i modo asettico utilizzado teciche di veiputura eseguite da persoale qualificato. 2 Prelevare u campioe di sague itero mediate veiputura utilizzado ua provetta per il prelievo di sague itero coteete EDA (tappo lavada). Altri aticoagulati o soo stati testati e possoo forire risultati o corretti. Se i campioi o vegoo aalizzati al mometo del prelievo, il sague itero può essere coservato a ua temperatura compresa tra 2 e 8 fio a 48 ore. Prima dell'aalisi, miscelare delicatamete la provetta di sague rigiradola diverse volte per garatire u campioe omogeeo. SIERO Prelevare i campioi di sague i modo asettico utilizzado teciche di veiputura eseguite da persoale qualificato. 2 Prelevare u campioe di sague itero mediate veiputura utilizzado ua provetta per il prelievo di sague seza coagulati. Lasciare coagulare il campioe di sague a temperatura ambiete prima della cetrifugazioe. rasferire i modo asettico il siero i u coteitore sterile a chiusura ermetica per la coservazioe. Il siero separato deve rimaere a ua temperatura ambiete compresa tra 5 e 30 per o più di 4 ore. Se il test o viee completato etro 48 ore oppure se i campioi devoo essere spediti, cogelare ad almeo -20. Scogelare e miscelare i campioi prima dell'uso. Evitare cicli multipli di cogelameto/scogelameto. deve essere utilizzato siero iperlipemico, iattivato dal calore, emolizzato o cotamiato. Le codizioi di coservazioe del siero soo le segueti: emperatura ambiete compresa tra 5 e 30 : 4 ore oservazioe i frigorifero tra 2 e 8 : 8 ore (portare il campioe a temperatura ambiete prima dell'uso.) ogelare < -20 : 2 mesi (scogelare e portare i campioi a temperatura ambiete prima dell'uso). PROEDURA NOE PROEDURALI. utilizzare il test dopo la data di scadeza. 2. oservare il kit del test a ua temperatura compresa tra 2 e 30. cogelare. Attedere circa 30 miuti i modo che il kit del test raggiuga la temperatura ambiete, se coservato i frigorifero, prima dell'uso. 3. Utilizzare il test etro 2 ore dopo avere rimosso il dispositivo del test dal sacchetto. 4. aprire la parte superiore del dispositivo del test prima di aggiugere il campioe. 5. daeggiare la membraa del test. 6. ollocare il dispositivo i posizioe orizzotale su ua superficie piaa durate l'esecuzioe del test. 7. Utilizzare ua provetta distita per ciascu campioe. 8. eere la provetta e il flacoe del tampoe i posizioe verticale per dispesare il sague e il tampoe sul dispositivo del test. 9. Accertarsi che la provetta sia direttamete sul pozzetto del campioe prima di premere lo statuffo. Quatità isufficieti di campioe possoo determiare risultati o. 0. mettere a cotatto diretto la puta della provetta o la puta del flacoe del tampoe co la membraa del test. PROEDURA DEL ES Aprire il sacchetto di allumiio e collocare il dispositivo del test su ua superficie orizzotale piaa. utilizzare il dessiccate.. Utilizzare la provetta moouso rivestita co mylar forita el kit per il prelievo di campioi di sague itero capillare (apparecchio pugidito). Iserire lo statuffo ella provetta. ollocare la puta della provetta el campioe. La provetta deve essere riempita co il campioe fio al cotrassego. Se il campioe o raggiuge il cotrassego, la provetta deve essere scartata e si deve prelevare u altro campioe da u altro dito ripetedo la procedura di prelievo del campioe. rasferire tutto il coteuto (circa 20 µl) di sague itero al pozzetto del campioe premedo lo statuffo. Prestare attezioe che la puta della provetta o daeggi la membraa. Smaltire la provetta utilizzata i u coteitore per rifiuti a rischio biologico. Per il sague itero veoso utilizzare ua pipetta di trasferimeto da laboratorio calibrata per erogare 20 µl di campioe el pozzetto di aggiuta del campioe. Per il siero, utilizzare ua pipetta di trasferimeto da laboratorio calibrata per erogare 5 µl di campioe el pozzetto di aggiuta del campioe. 2. Attedere 30 secodi i modo che il campioe peetri el pozzetto del campioe. Aprire la parte superiore del dispositivo (scopredo il pozzetto di aggiuta del tampoe). 3. Aggiugere 5 gocce di tampoe al pozzetto del tampoe. Lasciare che il tampoe cada a gocce el pozzetto del tampoe. Prestare attezioe i modo che la puta del flacoe del tampoe o tocchi la membraa. Lasciare il dispositivo del test aperto fio alla lettura dei risultati del test. 4. Lasciare il dispositivo del test i posizioe piaa. Impostare il timer su 5 miuti e iiziare il croometraggio del test. 5. Leggere il risultato ai 5 miuti, ma o leggere il risultato quado soo trascorsi più di 20 miuti. aratteristiche itegrate dei cotrolli ONROLLO DI QUALIÀ dispoe di u cotrollo procedurale itegrato che dimostra la tà del test. Ua liea rosa/rossa ella liea di ONROLLO () idica che il test fuzioa i modo corretto. I risultati del test o soo se o vi è ua liea di cotrollo. I test o devoo essere ripetuti.. La liea di ONROLLO () NON è u riferimeto itero per l'itesità della liea del risultato del test. 2. La liea di ONROLLO () può apparire prima di 5 miuti. È importate attedere almeo 5 miuti prima di leggere u risultato egativo. 3. Ua liea del ES () positiva può svilupparsi dopo 5 miuti, se si osserva la liea di ONROLLO (); il test può essere letto come positivo. otrollo di qualità estero I cotrolli per il kit del test (od. catalogo ) soo dispoibili separatamete per essere utilizzati co il kit del test. I cotrolli per il kit soo utilizzati per verificare la propria abilità ell'esecuzioe del test e iterpretare il risultato del test. I cotrolli devoo essere testati co la stessa procedura dei campioi dei pazieti. L'utilizzo di reageti di cotrollo per il kit di altri produttori può o geerare i risultati richiesti. Il cotrollo positivo deve produrre ua liea del ES () positiva da debole a moderata combiata co ua liea di ONROLLO () chiaramete visibile. Il cotrollo egativo deve produrre ua liea di ONROLLO () chiaramete visibile combiata co ua liea o visibile sulla liea del ES (). Eseguire il cotrollo del kit elle segueti circostaze: 8 iascu uovo operatore prima di eseguire il test sui campioi dei pazieti. Quado si apre u uovo lotto di kit del test. Quado si riceve ua uova spedizioe di kit del test. Se la temperatura dell'area di coservazioe del kit del test o è più compresa tra 2 e 30. Se la temperatura dell'area di aalisi o è più compresa tra 5 e 30. A itervalli periodici i coformità co le orme locali, azioali e/o federali o i programmi di accreditameto. osultare il foglietto illustrativo dei cotrolli per il kit del test per le istruzioi sull'utilizzo di questi reageti. iascu laboratorio che utilizza il kit del test è resposabile di defiire u adeguato programma di garazia di qualità per assicurare il redimeto del dispositivo elle sue posizioi e codizioi di utilizzo specifiche. Per assisteza o ulteriori iformazioi sui cotrolli dell'utete, cotattare l'assisteza tecica di riity Biotech al umero (800) INERPREAZIONE DEI RISULAI Validità del test: Il risultato del test è valido soltato se appare ua liea rosa/rossa ella liea di ONROLLO () del dispositivo. Se o si osserva alcua liea di ONROLLO (), il risultato deve essere cosiderato o valido e il test deve essere ripetuto. Risultato positivo La preseza di ua liea rosa/rossa ella liea del ES () e ella liea di ONROLLO () del dispositivo è u test positivo che idica che l'aticorpo ati-hsv-2 è presete el campioe. La liea I del ES () deve essere cosiderata u risultato positivo, idipedetemete dall'ampiezza sulla striscia del test. Risultato egativo L'asseza completa di ua liea ella liea del ES () co ua liea rosa/rossa ella liea di ONROLLO () del dispositivo deve essere cosiderata u risultato egativo idicate che essu aticorpo ati-hsv-2 è presete el campioe. LEURA DEI RISULAI DEL ES Positivo: Appaioo due liee - ua ella liea del est () e ua ella liea di otrollo (). Negativo: Ua liea appare ella liea di otrollo () e essua liea appare ella liea del est (). valido: La liea ella liea di otrollo () o appare etro 20 miuti. Idipedetemete dalla comparsa o meo di ua liea ella liea del est (), il risultato o è valido e il test deve essere ripetuto co ua uova cassetta. LIMII Il test deve essere utilizzato secodo le istruzioi coteute el presete foglietto illustrativo per otteere risultati accurati.. Il redimeto di questo test o è stato determiato per la popolazioe geerica. 2. Il redimeto di questo test o è stato determiato per il moitoraggio della terapia cotro l'hsv L'aalisi della cross-reattività di questo test o è stata valutata per hlamydia trachomatis, repoema pallidum, papillomavirus umao, oxoplasma godii, adida albicas, Neisseria goorrhea, batteroidi, Garderella vagialis o Mobilucus. Pagia 2 di 6 - I
3 4. aalizzare campioi lipemici, iattivati dal calore, emolizzati o cotamiati. 5. La lettura dei risultati prima di 5 miuti o dopo 20 miuti può forire risultati o corretti. utti i risultati derivati da questa e altre sierologie devoo essere correlati co l'aamesi cliica, i dati epidemiologici e altri dati a disposizioe del medico curate ella valutazioe del paziete. 6. La prevaleza dell'ifezioe ifluezerà egativamete il valore predittivo del test. 7. ome per altri test sierologici, i risultati egativi o escludoo la diagosi del virus dell'herpes simplex-2. Il tempo richiesto per la sierocoversioe i seguito all'ifezioe primaria varia a secoda dell'idividuo, il campioe può essere stato prelevato prima della comparsa di aticorpi rilevabili. 5 Vi soo segalazioi di sieroreversioe. 5,6 Se ecessario, per esempio, i malattia da virus dell'herpes simplex-2 precoce sospetta, il test deve essere ripetuto o eseguito co diversa aalisi, come u HSV-2 IgG ELISA specifico. 2,4 Se al mometo della uova aalisi, il risultato rimae egativo, allora u secodo campioe deve essere prelevato 4-2 settimae dopo e il test ripetuto. 4,5 8. Liljeqvist ha segalato che circa lo 0,2% (5/2400) di isolati di HSV-2 o aveva gg2 rilevabili come determiato dal legame co aticorpi moocloali ome per altri test sierologici, possoo esserci risultati falsi positivi. La ripetizioe del test o l'aalisi co u dispositivo diverso può essere suggerita i alcue situazioi, per esempio co i pazieti co ua bassa probabilità di ifezioe da HSV. 2,4 0. U sigolo risultato positivo idica soltato ua precedete esposizioe immuologica; il livello di risposta degli aticorpi o di risposta della classe di aticorpi o può essere utilizzato per determiare l'ifezioe attiva o lo stadio della malattia.. La sierologia o può distiguere tra ifezioi geitali e orali. Quado opportuo, si cosiglia la coltura per idividuare il sito di ifezioe. uttavia, colture di HSV false egative soo frequeti, i particolare ei pazieti co ifezioe ricorrete o co lesioi i fase di guarigioe L'itesità di ua liea ella liea del ES () o è u'idicazioe del livello di aticorpi el campioe. 3. Il redimeto del test o è stato determiato per escludere malattie co sitomi simili, per esempio adida albicas, batteroidi, G. vagialis, Mobilucus o HPV. Utilizzare quidi la coltura o altri metodi appropriati. 4. Il redimeto di questa aalisi o è stato determiato per matrici diverse dal sague itero o diluito (capillare o veoso co EDA) o siero. VALORI AESI Aalisti esteri hao valutato il dispositivo co campioi mascherati, prospettivi proveieti da ) adulti sessualmete attivi ( = 575), e 2) da doe i gravidaza ( = 40). Il metodo di riferimeto è stato u test di immuoblottig IgG e 2 dispoibile i commercio. Le prevaleze osservate e i valori predittivi ipotetici per le due popolazioi soo illustrati di seguito. Il valore predittivo positivo dimiuirà proporzioalmete alla prevaleza di ifezioe da HSV come idicato ella tabella riportata di seguito. Prevaleza osservata Positivi (+) a HSV-2 co doe i gravidaza Positivi (+) a HSV-2 co adulti sessualmete attivi Percetuale osservata di positivi elle popolazioi idicate Ui- Ui-Gold Ui-Gold est di Gold HSV-2 Rapid HSV-2 Rapid immuoblottig HSV-2 el sague el sague dispoibile i Rapid itero itero veoso commercio el siero capillare (8/400) 29,5% (24/573) 42,% (8/400) 29,5% (240/573) 4,9% (24/400) 3,0% (243/573) 42,4% Prevaleza cotro valori predittivi ipotetici (elle doe i gravidaza) Prevaleza Prevaleza cotro valori predittivi ipotetici (egli adulti sessualmete attivi) (7/399) 29,3% (226/570) 39,6% Sague itero Siero Sague itero veoso capillare PPV NPV PPV NPV PPV NPV 50% 96,7% 94,8% 97,0% 93,4% 95,7% 94,9% 40% 95,2% 96,5% 95,6% 95,5% 93,7% 96,6% 30% 92,7% 97,7% 93,4% 97,% 90,5% 97,8% 25% 90,8% 98,2% 9,6% 97,7% 88,% 98,2% 20% 88,% 98,7% 89,% 98,3% 84,7% 98,7% 5% 83,9% 99,0% 85,3% 98,8% 79,7% 99,% 0% 76,6% 99,4% 78,5% 99,2% 7,2% 99,4% 5% 60,8% 99,7% 63,3% 99,6% 53,9% 99,7% Prevaleza Siero Sague itero veoso Sague itero capillare PPV NPV PPV NPV PPV NPV 50% 92,0% 93,6% 92,5% 93,3% 92,0% 93,7% 40% 88,4% 95,7% 89,% 95,4% 88,5% 95,7% 30% 83,% 97,2% 84,% 97,0% 83,% 97,2% 25% 79,3% 97,8% 80,4% 97,7% 79,3% 97,8% 20% 74,2% 98,3% 75,5% 98,2% 74,2% 98,3% 5% 67,0% 98,8% 68,5% 98,7% 67,0% 98,8% 0% 56,% 99,2% 57,8% 99,2% 56,% 99,3% 5% 37,7% 99,6% 39,3% 99,6% 37,7% 99,6% Nota: Le distribuzioi della frequeza relative ad adulti sessualmete attivi e a doe i gravidaza possoo variare rispetto ai dati riportati ella tabella illustrata sopra a secoda dell'area geografica. Ogi laboratorio deve defiire le distribuzioi della frequeza per le proprie popolazioi specifiche di pazieti. RIASSUNO DEGLI SUDI Studio Doe i gravidaza (popolazioe idicata) el siero Doe i gravidaza (popolazioe idicata) el sague itero veoso Doe i gravidaza (popolazioe idicata) el sague itero capillare Adulti sessualmete attivi (popolazioe idicata) el siero Adulti sessualmete attivi (popolazioe idicata) el sague itero veoso Adulti sessualmete attivi (popolazioe idicata) el sague itero capillare Adulti o sessualmete attivi (popolazioe a bassa prevaleza) el siero Adulti o sessualmete attivi (popolazioe a bassa prevaleza) el sague itero veoso Adulti o sessualmete attivi (popolazioe a bassa prevaleza) el sague itero capillare PRESAZIONI SPEIFIIÀ E SENSIBILIÀ ON LE DONNE IN GRAVIDANZA (N = 40) L'aalista estero I ( = 6), l'aalista estero II ( = 20) e l'aalista estero III ( = 20) hao valutato l'accordo del dispositivo ei soggetti proveieti da ambulatori preatali. Il sague itero capillare e veoso e il siero di soggetti prospettivi sequeziali è stato prelevato, aalizzato e mascherato presso i siti degli aalisti esteri. Il campioe di siero mascherato è stato presetato al laboratorio e testato co i metodi di riferimeto. L'aalista estero I era rappresetato da u ambulatorio di scuola medica del sud-est degli Stati Uiti; l'aalista estero II da u ambulatorio pre-atale della regioe medio-atlatica degli Stati Uiti; e l'aalista estero III da uo studio di ostetricia e giecologia ella regioe medio-atlatica degli Stati Uiti. U test di immuoblottig IgG e 2 dispoibile i commercio è stato il metodo di riferimeto di tipizzazioe per il calcolo della specificità e sesibilità. Doe i gravidaza el siero ha mostrato accordo del 96,% (27/282) co egativi di immuoblottig e accordo del 92,3% (08/7) co positivi di immuoblottig. Due campioi o soo stati testati sull'immuoblottig. Dei 40 sieri, l'igg di immuoblottig era egativo co 282 e positivo co 7. Due campioi o soo stati testati ell'immuoblottig; uo per quatità isufficieti e l'altro per coservazioe iadeguata. Dei 282 sieri di immuoblottig egativi, era egativo co 96,% (27/282), positivo co 9 e o valido co 2. Dei 7 sieri di immuoblottig positivi, era egativo co 6, positivo co 92,3% (08/7) e o valido co 3. UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON DONNE IN GRAVIDANZA NEL SIERO (N= 40) Due campioi o soo stati aalizzati. riteri DONNE IN GRAVIDANZA IN SANGUE INERO VENOSO e specificità co u test di immuoblottig dispoibile i commercio 92,3% (08/7) 96,% (27/282) 93,2% (09/7) 97,2% (274/282) 94,9% (/7) 95,4% (269/282) 92,9% (20/226) 9,8% (35/343) 93,4% (2/226) 92,4% (37/343) 93,8% (22/226) 9,8% (35/343) 0% (0/2) 00% (0/0) 0% (0/2) 00% (0/0) 0% (0/2) 00% (0/0) Pael D HSV/MV 00% (35/35) 98,5% (64/65) ross-reattività: ross-reattività geerale 4,2% (9/23) Riproducibilità iterlotto V (%) < 0% Riproducibilità iteroperatore e itersito Rage V (%) < 65,0% Riproducibilità iteroperatore V (%) < 35,% Riproducibilità itersito V (%) di positivi < 23,0% Iterfereza Nessu effetto sui risultati dei campioi 92,3% Positivi (08/7) 85,9-96,4% 96,% Negativi (27/282) 93,-98,0% Dubbi ha mostrato accordo del 97,2% (274/282) co egativi di immuoblottig e accordo del 93,2% (09/7) co positivi di immuoblottig. Dei 40 campioi, il test IgG di immuoblottig era egativo co 282 e positivo co 7. Due campioi o soo stati testati; uo per quatità isufficieti e l'altro per coservazioe iadeguata. Dei 282 campioi di immuoblottig egativi, era egativo co 97,2% (274/282), positivo co 8 e o Dei 7 campioi di immuoblottig positivi, era egativo co 8, positivo co 93,2% (09/7) e o Pagia 3 di 6 - I
4 UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON DONNE IN GRAVIDANZA IN SANGUE INERO VENOSO (N = 40) Positivi DONNE IN GRAVIDANZA IN SANGUE INERO APILLARE ha mostrato accordo del 95,4% (269/282) co egativi di immuoblottig e accordo del 94,9% (/7) co positivi di immuoblottig. Dei 40 campioi, il test IgG di immuoblottig era egativo co 282 e positivo co 7. Due campioi o soo stati testati su immuoblottig per quatità isufficieti. Dei 282 campioi di immuoblottig egativi, era egativo co 95,4% (269/282), positivo co 2 e o valido co. Dei 7 campioi di immuoblottig positivi, era egativo co 6, positivo co 94,9% (/7) e o UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON DONNE IN GRAVIDANZA IN SANGUE INERO APILLARE (N = 40) SPEIFIIÀ E SENSIBILIÀ ON ADULI SESSUALMENE AIVI (N = 575) 93,2% (09/7) 87,0-97,0% Negativi L'aalista estero I ( = 95), l'aalista estero II ( = 90) e l'aalista estero III ( = 90) hao valutato l'accordo del dispositivo co soggetti sessualmete attivi presso scuole mediche, ambulatori per studeti e pubblici. Il sague itero capillare e veoso e il siero di soggetti prospettivi sequeziali è stato prelevato, aalizzato e mascherato presso i siti degli aalisti esteri. Il campioe di siero mascherato è stato presetato al laboratorio e testato co i metodi di riferimeto. L'aalista estero I era rappresetato da u ambulatorio di scuola medica del sud-est degli Stati Uiti; l'aalista estero II da u ambulatorio pre-atale della regioe medio-atlatica degli Stati Uiti; e l'aalista estero III da u ambulatorio per studeti el sud-est degli Stati Uiti. U test di immuoblottig IgG e 2 dispoibile i commercio è stato il metodo di riferimeto di tipizzazioe per il calcolo della specificità e sesibilità. Adulti sessualmete attivi el siero ha mostrato accordo del 9,8% (35/343) co egativi di immuoblottig e accordo del 92,9% (20/226) co positivi di immuoblottig. Dei 575 sieri, l'igg di immuoblottig era egativo co 343, positivo co 226 e dubbio co. ique campioi o soo stati testati i immuoblottig. Due campioi soo stati persi tra l'aalista e il laboratorio e tre o soo stati aalizzati per quatità isufficieti. Dei 343 sieri di immuoblottig egativi, era egativo co 9,8% (35/343), positivo co 28 e o Dei 226 sieri di immuoblottig positivi, era egativo co 4, positivo co 92,9% (20/226) e o valido co 2. UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI SESSUALMENE AIVI NEL SIERO (N = 575) 97,2% (274/282) 94,5-98,8% Dubbi Due campioi o soo stati aalizzati. Immuoblo ttig Positivi Negativi ,9% (20/226) 88,8-95,9% Dubbi 0 0 ique campioi o soo stati aalizzati. 9,8% (35/343) 88,4-94,5% Adulti sessualmete attivi i sague itero veoso ha mostrato accordo del 92,4% (35/343) co egativi di immuoblottig e accordo del 93,4% (2/226) co positivi di immuoblottig. Dei 575 campioi, l'igg di immuoblottig era egativo co 343 e positivo co 226. ique campioi o soo stati testati i immuoblottig. Due campioi soo stati persi tra l'aalista e il laboratorio e tre o soo stati aalizzati per quatità isufficieti. Dei 343 campioi di immuoblottig egativi, era egativo co 92,4% (37/343), positivo co 26 e o Dei 226 campioi di immuoblottig positivi, era egativo co 5, positivo co 93,4% (2/226) e o UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI SESSUALMENE AIVI NEL SANGUE INERO VENOSO (N = 575) Adulti sessualmete attivi i sague itero capillare ha mostrato accordo del 9,8% (35/343) co egativi di immuoblottig e accordo del 93,8% (22/226) co positivi di immuoblottig. Dei 575 campioi, l'igg di immuoblottig era egativo co 343 e positivo co 226. ique campioi o soo stati testati i immuoblottig. Due campioi soo stati persi tra l'aalista e il laboratorio e tre o soo stati aalizzati per quatità isufficieti. Dei 343 campioi di immuoblottig egativi, era egativo co 9,8% (35/343), positivo co 28 e o Dei 226 campioi di immuoblottig positivi, era egativo co 4, positivo co 93,8% (2/226) e o UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI SESSUALMENE AIVI NEL SANGUE INERO APILLARE (N = 575) e sesibilità co adulti o sessualmete attivi {Bassa prevaleza} ( =04) L'aalista estero I ( = 46) e l'aalista estero II ( = 58) hao valutato l'accordo del dispositivo co soggetti adulti o sessualmete attivi (bassa prevaleza) di ua popolazioe metropolitaa e ua popolazioe di studeti. Il sague itero capillare e veoso e il siero di soggetti prospettivi sequeziali è stato prelevato, aalizzato e mascherato presso i siti degli aalisti esteri. Il campioe di siero mascherato è stato presetato al laboratorio e testato co i metodi di riferimeto. L'aalizzatore estero I era rappresetato da u ambulatorio di scuola medica del sud-est degli Stati Uiti; l'aalizzatore estero II da u ambulatorio SD collocato el ord-ovest del Pacifico. U test di immuoblottig IgG e 2 dispoibile i commercio è stato il metodo di riferimeto di tipizzazioe per il calcolo della specificità e sesibilità. Adulti o sessualmete attivi (bassa prevaleza) el siero Positivi ,4% (22/226) % Negativi ha mostrato accordo del 00,0% (0/0) co egativi di immuoblottig e accordo dello 0,0% (0/2) co positivi di immuoblottig. Dei 04 sieri, l'igg di immuoblottig era egativo co 0 e positivo co 2. U campioe o è stato aalizzato su immuoblottig per quatità isufficieti. Dei 0 sieri di immuoblottig egativi, era egativo co 00,0% (0/0), positivo co 0 e o Dei 2 sieri di immuoblottig positivi, era positivo co 0,0% (0/2), egativo co 2 e o 92,4% (37/343) 89,-95,0% Dubbi 0 0 ique campioi o soo stati aalizzati. 94,9% Positivi (/7) 89,2-98,% Negativi ,4% (269/282) 92,2 97,5% Dubbi Due campioi o soo stati aalizzati. Positivi ,8% (22/226) % Negativi ,8% (35/343) % Dubbi 0 0 ique campioi o soo stati aalizzati. Pagia 4 di 6 - I
5 UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI NON SESSUALMENE AIVI (BASSA PREVALENZA) NEL SIERO (N =04) Adulti o sessualmete attivi (bassa prevaleza) el sague itero veoso ha mostrato accordo del 00,0% (0/0) co egativi di immuoblottig e accordo dello 0,0% (0/2) co positivi di immuoblottig. Dei 04 sieri, l'igg di immuoblottig era egativo co 0 e positivo co 2. U campioe o è stato aalizzato su immuoblottig per quatità isufficieti. Dei 0 sieri di immuoblottig egativi, era egativo co 00,0% (0/0), positivo co 0 e o Dei 2 sieri di immuoblottig positivi, era positivo co 0,0% (0/2), egativo co 2 e o UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI NON SESSUALMENE AIVI (BASSA PREVALENZA) NEL SANGUE INERO VENOSO (N =04) Adulti o sessualmete attivi (bassa prevaleza) el sague itero capillare ha mostrato accordo del 00,0% (0/0) co egativi di immuoblottig e accordo dello 0,0% (0/2) co positivi di immuoblottig. Dei 04 sieri, l'igg di immuoblottig era egativo co 0 e positivo co 2. U campioe o è stato aalizzato su immuoblottig per quatità isufficieti. Dei 0 sieri di immuoblottig egativi, era egativo co 00,0% (0/0), positivo co 0 e o Dei 2 sieri di immuoblottig positivi, era positivo co 0,0% (0/2), egativo co 2 e o UNI-GOLD HSV-2 RAPID RISPEO A IMMUNOBLOING ON ADULI NON SESSUALMENE AIVI (BASSA PREVALENZA) NEL SANGUE INERO APILLARE (N = 04) Accordo co il pael D ( = 00) Positivi % (0/2) Negativi % (0/0) 96,4-00 Dubbi U campioe o è stato aalizzato. Positivi % (0/2) Negativi % (0/0) 96,4-00 Dubbi U campioe o è stato aalizzato. Positivi % (0/2) Negativi % (0/0) Dubbi U campioe o è stato aalizzato. Di seguito soo riportati i risultati di u pael di sieri otteuti tramite metodo D e aalizzati dal laboratorio. I risultati del pael erao stati precedetemete ricevuti durate gli studi per uo strumeto di diagostica ad aaliti multipli. Questi risultati soo stati mascherati dalla persoa che esegue il test co il dispositivo e dalla persoa che esegue l'aalisi dei dati. I risultati itedoo essere uo strumeto per forire ulteriori iformazioi sul redimeto di questo test co u pael di siero mascherato, caratterizzato e o implicao u'approvazioe del test da parte del D. Il pael del test è costituito da 00 campioi. i soo 65 campioi egativi a HSV-2 e 35 positivi a HSV-2. Determiazioe di campioi positivi e egativi Dei 65 campioi egativi all'hsv-2, ha idividuato correttamete il 98,5% (64/65). Dei 35 campioi positivi all'hsv-2, ha idividuato correttamete il 00% (35/35). AORDO ON IL PANEL D (N = 00) HSV2 D Positivi Negativi ross-reattività ( = 23) La cross-reattività è stata valutata co campioi che erao sieroegativi e sieropositivi per almeo uo tra (= 25) Virus dell'herpes simplex (HSV-) (= 25) Virus della rosolia (= 42) Virus della varicella-zoster, (VZV) (= 25) Virus di Epstei-Barr (EBV) (= 32) itomegalovirus (MV) (= 33) Fattore reumatoide (FR) (= 3) Aticorpi ati-ucleo (ANA) Reattività co cross-reageti ha mostrato ua cross-reattività geerale di 4,2% (9/23). o IgG positivi all'hsv-, era positivo co 0,0% (0/25), egativo co 25 e o o positivi al virus della rosolia, era positivo co 4,0% (/25), egativo co 24 e o o IgG positivi a ZV, era positivo co 9,5% (4/42), egativo co 38 e o o IgG positivi a EBV, era positivo co 4,0% (/25), egativo co 24 e o o IgG positivi a MV, era positivo co 3,% (/32), egativo co 3 e o o positivi a FR, era positivo co 3,0% (/33), egativo co 32 e o valido co 0. o positivi a ANA, era positivo co 3,2% (/3), egativo co 30 e o ROSS-REAGENE DI AORDO PER UNI-GOLD HSV-2 RAPID ross-reagete Iterfereza Il redimeto del dispositivo è stato valutato co la preseza di iterfereti. Soo stati presi due soggetti: uo positivo per il virus dell'herpes simplex 2 e egativo per il virus dell'herpes simplex e uo egativo per etrambi i virus dell'herpes simplex e 2 co u IgG ELISA dispoibile i commercio. Per ciascu soggetto soo stati defiiti i livelli di baselie per trigliceridi, albumia, bilirubia ed emoglobia. Il siero rimaete è stato sirigato co iterfereti acquistati a livelli che eccedevao il rage umao atteso. I campioi sirigati soo stati di uovo aalizzati el test per determiare se i livelli elevati di iterfereti ifluezavao l'aalisi. Nessua iterfereza è stata osservata per alcuo degli iterfereti sia ei campioi positivi che i quelli egativi. ofroto delle matrici IgG + HSV Rubella IgG + VZV IgG + EBV IgG + MV RF ANA ross-reageti % accordo 00% (35/35) 90,0-00,0% 98.5% (64/65) 9,7-00,0% ross-reattività % 0,0% (0/25) 0,0-3,7% 4,0% (/25) 0,0-20,4% 9,5% (4/42) 2,7-22,6% 4,0% (/25) 0,0-20,4% 3,% (/32) 0,0-6,2% 3,0% (/33) 0,0-5,8% 3,2% (/3) 0,0-5,8% 4,2% (9/23),9-7,8% La reattività relativa del dispositivo è stata cofrotata co siero co sague itero veoso sirigado u siero positivo i siero egativo e sague itero veoso egativo, diluedo i serie il siero e il sague itero sirigati e aalizzado il siero e il sague diluiti co il dispositivo i triplicati. Due dei tre replicati di siero raggiugevao il puto fiale a :8 e uo a :4. re dei tre replicati di sague itero raggiugevao il puto fiale a :4. Pagia 5 di 6 - I
6 Riproducibilità Laboratorio itero; u laboratorio cliico collocato el sud della aliforia; u ambulatorio pubblico ubicato ella regioe delle Motage Rocciose degli Stati Uiti; u ambulatorio per studeti el sud-est degli Stati Uiti; e u ambulatorio SD collocato el ord-ovest del Pacifico hao valutato la riproducibilità del dispositivo iterlotto, iter/itraoperatore e la riproducibilità iter/itrasito. iascuo dei siti ha aalizzato dieci campioi i sigolo i tre giori diversi. 7. Liljeqvist et al. ypig of liical Herpes Simplex Virus ype ad ype 2 Isolates with Moocloal Atibodies. J li Micro 37: (999). 8. LSI. Poit-of-care i vitro diagostic (IVD) testig; approved guidelie; AS2-A. st ed. Waye, PA LSI. Procedures ad devices for the collectio of diagostic capillary blood specimes; approved stadard, H04-A5. 5th ed. Waye, PA LSI. Quality microcollectio. H04-A3-V. Waye, PA.994. Rage ELISA Negativo valori alti Riproducibilità iterlotto Media V % Iteroperatore V % Itersito ID campioe Accuratezza Precisioe Accuratezza Precisioe V % HSV- 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% Borderlie HSV-2 00,0% 0,0% 98,8% 96,3% 3,7% 98,8% 97,8% 2,2% Negativi HSV- 00,0% 0,0% 97,5% 92,4% 7,6% 97,5% 95,6% 4,4% Alti Positivi HSV-2 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% Positivi HSV-3 00,0% 0,0% 97,5% 92,4% 7,6% 97,5% 95,6% 4,4% Bassi Positivi HSV-4 00,0% 0,0% 59,3% 35,0% 65,0% 59,3% 65,2% 34,8% Negativi HSV-5 77,8% 24,7% 82,7% 7,4% 28,6% 82,7% 83,0% 7,0% Positivi HSV-26 00,0% 0,0% 97,5% 95,0% 5,0% 97,5% 97,8% 2,2% Negativi HSV-27 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% 00,0% 00,0% 0,0% Positivi HSV-28 00,0% 0,0% 98,8% 96,3% 3,7% 98,8% 97,8% 2,2% Produttore Rappresetate autorizzato osultare la documetazioe allegata ONROL + + otrollo positivo alto o positivo ONROL + otrollo positivo basso o di cut-off ONROL - otrollo egativo Itraoperatore Operatore Accuratezza Precisioe V % 96,7% 89,% 0,9% 2 97,8% 95,2% 4,8% 3 90,0% 64,9% 35,% 4 98,9% 96,4% 3,6% 5 87,8% 70,5% 29,5% 6 96,7% 89,% 0,9% 7 87,8% 86,% 3,9% 8 92,2% 77,2% 22,8% 9 9,% 69,% 30,9% Itrasito Accuratezza Precisioe V % 94,8% 87,6% 2,4% 2 94,4% 87,3% 2,7% 3 90,4% 79,0% 2,0% BIBLIOGRAFIA. Aurelia, L. Herpes Simplex Viruses I Specter, S & G Lacz (eds.). liical Virology Maual. 2 d Ed. Elsevier, New York. (992) 2. eters for Disease otrol ad Prevetio. Sexually trasmitted diseases treatmet guidelies MMWR 2002:5 (No. RR-6) 3. Arvi, A, Prober. Herpes Simplex Viruses I Murray, P, E Baro, M Pfaller, F eover, ad R Yolkeet (eds.). Maual of liical Microbiology. 6 th Ed. ASM, Washigto, D.. (995) 4. Whitley, R. Herpes Simplex Viruses I Fields, B, D Kipe, P Howley, et al. (eds.). Fields Virology 3 rd Ed. Lippicott-Rave, Philadelphia. (996) 5. Whitley, R. Herpes simplex, i J Klei & J Remigto (ed.), Ifectious diseases of the fetus ad ewbor ifats, 3 rd ed., p Prober,, W Sulleder, L Yasukawa, D Au, A Yaeger, A Arvi. Low risk of herpes simplex virus ifectios i eoates exposed to the virus at the time of vagial delivery to mothers with recurret herpes simplex virus ifectios. N Egl J Med 36: (98 ). 7. Brow, Z, S Sleke, J Zeh, J Kopelma, A Maslow, R Ashley, D Watts, S Berry, M Herd, L orrey. he acquisitio of herpes simplex virus durig pregacy. N Egl J Med 33 : (99 ). 8. Whitley, R, A Nahmias, A Visitie, Flemig, Alford. Natural history of herpes simplex virus ifectio of mother ad ewbor. Pediatrics 66: (980). 9. Prober G, orey L, Brow ZA et al he maagemet of pregacies complicated by geital ifectios with herpes simplex virus. li Ifect Dis. 5: Brow ZA, Beedetti J, Ashley R et. al. 99. Neoatal herpes simplex virus ifectio i relatio to asymptomatic materal ifectio at the time of labor. N Egl J Med 324: D. Uiversal precautios for prevetio of trasmissio of huma immuodeficiecy virus, hepatitis B virus, ad other blood-bore pathoges i health-care settigs. MMWWR 988; 37(24): LSI. Procedures for the Hadlig ad Processig of Blood Specimes; approved guidelie, H8-A3. 3 rd ed. Waye, PA orey, L., A. Wald, New Developmets i the Biology of Geital Herpes, i liical Maagemet of Herpes Viruses, p Ashley RL. Performace ad use of HSV type-specific serology test kits. Herpes 2002 Jul;9(2): Ashley-Morrow R, Kratz E, Wald A. ime ourse of Serocoversio by A commercially available ELISA test ELISA After Acquisitio of Geital Herpes Simplex Virus ype (HSV-) or HSV-2. Sex rasm Dis Apr;30(4): herpes L, Ashley RL, Mey LA, Hillier SL. Logitudial reliability of Focus glycoprotei G- based type-specific ezyme immuoassays for detectio of herpes simplex virus types ad 2 i wome. J li Microbiol 2003 Feb;4(2):67-4. REF odice prodotto LO Lotto Utilizzare etro Attezioe: cosultare la documetazioe allegata oservare a ua temperatura compresa tra 2 e 8 oservare a ua temperatura compresa tra 2 e 8 riity Biotech USA Jamestow, NY 470 el Fax: AL alibratore.f. Fattore di coefficieza RNG Rage SD Stadard IVD Per uso diagostico i vitro o Pericolo riity Biotech plc Bray o. Wicklow, Irelad el Fax Rev B 02/203 Pagia 6 di 6 - I
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