Mirco Castiglioni 1 Benedetta Scarselli 2 Valentina Zambelli 2 Giovanni M. Colpi 1

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Simone Monti
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ICSI DA TESE A FRESCO NELLA ASTENOZOOSPERMIA ASSOLUTA: UNA OPZIONE O UNA SOLUZIONE IDEALE? Mirco Castiglioni 1 Benedetta Scarselli 2 Valentina Zambelli 2 Giovanni M. Colpi 1 1) U.O.C. Urologia II Andrologia e Riproduzione Assistita European Training Centre for Clinical Andrology certified by EUROPEAN ACADEMY of ANDROLOGY AO San Paolo Polo Universitario.

1 ICSI DA TESE A FRESCO NELLA ASTENOZOOSPERMIA ASSOLUTA: UNA OPZIONE O UNA SOLUZIONE IDEALE? Mirco Castiglioni 1 Benedetta Scarselli 2 Valentina Zambelli 2 Giovanni M. Colpi 1 1) U.O.C. Urologia II Andrologia e Riproduzione Assistita European Training Centre for Clinical Andrology certified by EUROPEAN ACADEMY of ANDROLOGY AO San Paolo Polo Universitario. Milano 2) Futura Diagnostica Medica PMA. Firenze

Totale assenza di motilità spermatica astenozoospermia

motilità viene acquisita durante il transito epididimario.

difetti ultrastrutturali del flagello (genetici o congeniti)

influenza fortemente negativa sull esito della ICSI è

Nagy et al, 1995 la necrozoospermia secondaria a infezioni

antispermatozoi, disordini metabolici che compromettono la

2 Totale assenza di motilità spermatica astenozoospermia assoluta Nel corso della naturale maturazione spermatica la motilità viene acquisita durante il transito epididimario. Le due principali cause di astenozoospermia assoluta sono: difetti ultrastrutturali del flagello (genetici o congeniti) Tra i parametri seminali di base l'unico fattore che ha una influenza fortemente negativa sull esito della ICSI è l'assenza di motilità. Nagy et al, 1995 la necrozoospermia secondaria a infezioni genitali, stress ossidativo, crioconservazione, anticorpi antispermatozoi, disordini metabolici che compromettono la produzione di ATP, disturbi del transito epididimario, inquinanti ambientali, astinenza prolungata, etc Ortega et al, 2011

0% Morf 11% (sett 05) V 2,2 ml N rarissimi Mot 0% SP(ott 05) V 2 ml N 0,6 mil/ml Mot 0% Morf 20%

8-9 ml Ecostruttura omogenea, minimo reflusso con Valsalva sin. F a.

3 CASO CLINICO M a. 39 A 29 anni correzione di varicocele sinistro Spermiogrammi: (mar 05) V 3,5 ml N 0,2 mil/ml Mot 0% Morf 11% (sett 05) V 2,2 ml N rarissimi Mot 0% SP(ott 05) V 2 ml N 0,6 mil/ml Mot 0% Morf 20% (nov 05) V 2 ml N 0,9 mil/ml Mot 0% Morf 12% (feb 06) V 3,8 ml N 4,4 mil/ml Mot 0% Morf 3% Eosin test 3% FSH 7.5 mu/ml Cariotipo 46,XY; Microdelezioni Y : non rilevate Esami microbiologici: negativi Testicoli 8-9 ml Ecostruttura omogenea, minimo reflusso con Valsalva sin. F a. 38 Appendicectomia a 11 anni Menarca a 13 anni Non EPO né IUD Cicli regolari (24 gg, durata 6 gg, flusso abbondante, non dismenorrea); non spotting A 30 anni ISC operativa per utero setto ECOGRAFIA: mioma sottosieroso post (6 x 8 mm) Ovaio dx 32 x 17 mm regolare, ovaio sin 24 x 18 mm regolare

Esame spermatologicomicroscopia elettronica a trasmissione (TEM) dall esame

strutturali caratteristici delle tre principali patologie spermatiche.

malformati, nuclei sferici-ellittici con cromatina non condensata, residui

irregolari con cromatina in disfacimento, membrane plasmatiche frammentate).

dislocate o carenti ed i mitocondri malformati e disassemblati sono difetti

Il quadro seminologico del paziente è severamente compromesso. V 2,5 ml ph 7.

4 Esame spermatologicomicroscopia elettronica a trasmissione (TEM) dall esame microscopico rileviamo che la totalità degli spermatozoi presenta difetti strutturali caratteristici delle tre principali patologie spermatiche. Osserviamo infatti: apoptosi (cromatina marginata), immaturità (acrosomi malformati, nuclei sferici-ellittici con cromatina non condensata, residui citoplasmatici) e soprattutto necrosi (acrosomi assenti o reagiti, nuclei irregolari con cromatina in disfacimento, membrane plasmatiche frammentate). Gli assonemi spesso alterati ed avvolti, le strutture assonemali accessorie dislocate o carenti ed i mitocondri malformati e disassemblati sono difetti della coda che in parte incidono sulla motilità. Il quadro seminologico del paziente è severamente compromesso. V 2,5 ml ph 7.2 N 0,325 mil/ml. Motilità assente (100%) Terapia : Dec 0,1 0,5 + GF 375 ICSI (marzo 2006) Pick-up: 4 follicoli > 16 mm Esito : 4 MII fertilizzati 0

ICSI da TESE a fresco (settembre 2006) Soppressione: Suprefact 0,4

Induzione: in 11^ con Gonasi Pick-up: in 13^ : 4 ovociti 3 iniettati da

33^ post ET: gravidanza singola evolutiva (BCF +) N ovociti

5 ICSI da TESE a fresco (settembre 2006) Soppressione: Suprefact 0,4 Stimolazione: Gonal F 450 UI per 7 gg poi GF Menogon 300 Induzione: in 11^ con Gonasi Pick-up: in 13^ : 4 ovociti 3 iniettati da TESE a fresco (rarissimi spermatozoi normomotili) 14^ post ET: BHCG ^ post ET: gravidanza singola evolutiva (BCF +) N ovociti fertilizzati: 1 N ovociti clivati: 1 N embrioni trasferiti: 1 Gravidanza a termine : maschio sano

DISCUSSIONE In caso di astenozoospermia assoluta i risultati della ICSI tradizionale sono molto scarsi anche per la difficoltà di distinguere in vivo gli spermatozoi immobili non vitali da quelli

6 DISCUSSIONE In caso di astenozoospermia assoluta i risultati della ICSI tradizionale sono molto scarsi anche per la difficoltà di distinguere in vivo gli spermatozoi immobili non vitali da quelli vitali potenzialmente microiniettabili. Nagy et al, 1995 Dal momento che la vitalità spermatica è una condizione imprescindibile per la fertilizzazione sono state proposte diverse tecniche per selezionare spermatozoi immobili ma vitali, tuttavia queste o sono di non provata efficacia (HOS test) o sono molto costose come la selezione Laser-Assistita (LAISS) e la microscopia a birifrangenza. Gerber et al, 2008 L utilizzo di spermatozoi mobili recuperati da TESE si è dimostrata efficace e può costituire una valida opzione confermando i dati riportati in letteratura dove nella più ampia casistica su 47 cicli si è ottenuta una Fertilization Rate del 66% con una Pregnancy Rate del 38.3%. (Kovacich et al, 2006).

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