BOZZA DI METODICA ANALITICA PER LA DETERMINAZIONE DI OCRATOSSINA A NEL VINO ANALISI HPLC, CURVA DI TARATURA
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1 ANALISI HPLC, CURVA DI TARATURA Curva di taratura ocratossina A a concentrazioni comprese tra 0.2 ng/ml e 5 ng/ml (iniezioni in triplicato)
2 ANALISI HPLC, CURVA DI TARATURA Il limite di determinazione corrisponde a quello calcolato diviso il fattore di concentrazione nel caso particolare circa 0.05 µ g/l (50 ppt) Trattazione della curva di taratura con modulistica interna ARPAT. Particolare: determinazione limiti di rilevabilità e limite di determinazione
3 BOZZA DI METODICA ANALITICA PER LA DETERMINAZIONE DI ANALISI HPLC, CURVA DI TARATURA Cromatogramma relativo ad aliquota di prova di vino rosso (ring test UIV)
4 PARTECIPAZIONE A CIRCUITI INTERLABORATORIO RING TEST UIV (anno ) Ocratossina A Media Scarto tipo Riproducibilità Ripetibilità varianza u.d.m ANNO MESE Tipo Vino: µg/l Febbraio Rosato µg/l Aprile Rosso secco µg/l Giugno Rosso secco µg/l Luglio Rosato µg/l Agosto Rosato frizzante RISULTATI ARPAT DIP. PROV.le DI LIVORNO Ring UIV Ocratossina A Criterio di accettabilità: Z-score inferiore a 2 metodo I replica z-scores II replica z-scores ANNO MESE Tipo Vino: Febbraio Rosato Aprile Rosso secco Giugno Rosso secco Agosto Rosato frizzante
5 PARAMETRI STATISTICI: ESATTEZZA (Recupero) RISULTATI ARPAT DIP. PROV.le DI LIVORNO Ring UIV Dip LI 1 replica Concentrazione Ocratossina A (ng/ml) Dip LI 2 replica Dip LI media Ring Media Esattezza (recupero) 81% 90% 102% 105% Regolamento (CE) n. 401/ della Commissione del 23 febbraio relativo ai metodi di campionamento e di analisi per il controllo ufficiale dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari 4.3. Prescrizioni specifiche Criteri di rendimento Se a livello comunitario non è prescritto alcun metodo specifico per la determinazione dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari, i laboratori sono liberi di applicare il metodo di loro scelta, a condizione che esso rispetti i criteri seguenti b) Criteri di rendimento per l ocratossina A Tenore µg/kg RSD r % Ocratossina A RSD R % Recupero % < 1 < 40 < Valori coerenti con le disposizioni normative 1-10 < 20 <
6 PARAMETRI STATISTICI: INCERTEZZA Media RISULTATI ARPAT DIP. PROV.le DI LIVORNO Ring UIV Concentrazione Ocratossina A (ng/ml) Riproducibilità scarto tipo Incertezza RSD R 31% 32% 32% 12% 21% Regolamento (CE) n. 401/ della Commissione del 23 febbraio relativo ai metodi di campionamento e di analisi per il controllo ufficiale dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari 4.3. Prescrizioni specifiche Criteri di rendimento Se a livello comunitario non è prescritto alcun metodo specifico per la determinazione dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari, i laboratori sono liberi di applicare il metodo di loro scelta, a condizione che esso rispetti i criteri seguenti b) Criteri di rendimento per l ocratossina A Tenore µg/kg RSD r % Ocratossina A RSD R % Recupero % Valori coerenti con le disposizioni normative < < 40 < 20 < 60 < Dubbio??
7 PARAMETRI STATISTICI: INCERTEZZA Regolamento (CE) n. 401/ della Commissione del 23 febbraio relativo ai metodi di campionamento e di analisi per il controllo ufficiale dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari h) Note relative ai criteri di rendimento per le micotossine - I limiti di rilevazione dei metodi impiegati non sono indicati, dato che i valori di precisione sono espressi per le concentrazioni che presentano interesse. - I valori di precisione sono calcolati partendo dall equazione di Horwitz, ovvero: RSDR = 2(1-0,5logC) dove: - RSDR è la deviazione standard relativa, calcolata in base a risultati ottenuti _ in condizioni di riproducibilità [(sr/x ) 100]- C è il tasso di concentrazione (ovvero 1 = 100g/100g, 0,001 = mg/kg)si tratta di un equazione generale di precisione che si è dimostrata indipendente dagli analiti e dalla matrice e dipendente unicamente dalla concentrazione per la maggior parte dei metodi d analisi consueti.
8 PARAMETRI STATISTICI: INCERTEZZA Regolamento (CE) n. 401/ della Commissione del 23 febbraio relativo ai metodi di campionamento e di analisi per il controllo ufficiale dei tenori di micotossine nei prodotti alimentari 4.4. Stima dell incertezza della misura, calcolo del tasso di recupero ed espressione dei risultati (1) Il risultato analitico viene riportato in forma corretta o meno per il recupero. Devono essere indicati il modo in cui è stato espresso il risultato analitico e il livello di recupero. Il risultato analitico corretto per il recupero è utilizzato per verificare la conformità. Il risultato analitico deve essere riportato come x +/ U, dove x è il risultato analitico e U l incertezza di misura estesa. U è l incertezza di misura estesa, calcolata utilizzando un fattore di copertura 2 corrispondente ad un livello di fiducia del 95 % circa. (omissis) Tali norme di interpretazione del risultato analitico ai fini dell accettazione o del rifiuto della partita si applicano al risultato analitico ottenuto sul campione destinato al controllo ufficiale. Nel caso di analisi a fini di ricorso o arbitraggio si applica la normativa nazionale.
9 PARAMETRI STATISTICI: INCERTEZZA
10 PARAMETRI STATISTICI: INCERTEZZA NECESSITA DI DEFINIZIONE DI NORME DI DECISIONE
11 SICUREZZA DECONTAMINAZIONE E CONDIZIONI AMBIENTALI
12 Decontaminare tutto quanto venuto in contatto con micotossine con soluzioni commerciali di ipoclorito Inoltre Le micotossine ed in particolare le aflatossine tendono a caricarsi elettrostaticamente ed a disperdersi nell ambiente Per cui Non utilizzare materiali di riferimento solidi
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