Organo Ufficiale della Società Italiana di Allergologia ed Immunologia Pediatrica

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1 Organo Ufficiale della Società Italiana di Allergologia ed Immunologia Pediatrica Direttore Editoriale e Scientifico Alberto E.Tozzi Comitato di Redazione Giuseppe Baviera, Clementina Canessa, Bianca Lattanzi, Marina Macchiaiolo, Umberto Pelosi, Neri Pucci Direttore Responsabile Patrizia Alma Pacini Segreteria Scientifica Manuela Moncada Editore Pacini Editore S.p.A. - Via Gherardesca Pisa Copyright by Società Italiana di Allergologia ed Immunologia Pediatrica aprile 2011 anno XXV Consiglio Direttivo SIAIP Presidente Luciana Indinnimeo Past President Francesco Paravati Vice Presidente Michele Miraglia del Giudice Tesoriere Iride Dello Iacono Consiglieri Salvatore Barberi, Umberto Pelosi, Giuseppe Pingitore, Giampaolo Ricci Segretario Salvatore Barberi Revisori dei conti Rachele Antignani, Gian Luigi Marseglia

2 Sommario RIAP 02 editoriale 00 News 2 PAI Food allergy: riding the second wave of the allergy epidemic Susan Prescott, Katrina J. Allen Allergie Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce A cura della Commissione Allergia Alimentare della SIAIP Alberto Martelli, Loredana Chini, Iride Dello Iacono, Annalisa Ferlisi, Paolo Meglio, Giovanna Monti, Maria Carmela Verga Allergia alla Tropomiosina: dalla diagnosi molecolare alla pratica clinica A cura della Commissione Diagnostica della SIAIP Stefania La Grutta, Mauro Calvani, Marcello Bergamini, Neri Pucci, Riccardo Asero Autori stranieri o argomenti internazionali Relazione medico-famiglie o punto di vista delle famiglie Autore/i di età inferiore a 40 anni Revisione sistematica Materiale iconografico Critical Appraised Topic Contributo originale Caso clinico Commissione SIAIP immunologia La profilassi anti-infettiva nelle immunodeficienze primitive a cura della Commissione Immunologia della SIAIP Viviana Moschese, Carlo Capristo, Fabio Cardinale, Michele Fiore, Silvana Martino, Baldassarre Martire, Annarosa Soresina aprile 2011 anno XXV Vaccini Patologie autoimmuni nelle pre-adolescenti italiane e vaccinazione anti-hpv a cura della Commissione Vaccini della SIAIP Marta Ciofi degli Atti, Chiara Azzari, Giorgio Bartolozzi, Susanna Esposito, Gaetano Maria Fara, Milena Lo Giudice, Caterina Rizzo 52 Rivista 39 stampata su carta TCF (Total Chlorine Free) e verniciata idro.

3 : editoriale Rivista di Immunologia e Allergologia Pediatrica 02/ La siaip in cammino Alla fine del mio primo anno di presidenza desidero condividere con Voi alcune osservazioni, riflessioni e commenti, soprattutto alla luce dei recenti eventi che hanno caratterizzato l anno 2010 e l inizio di questo anno. Il primo sguardo è rivolto alla attuale situazione economica che in tutto il mondo è contrassegnata da una fase di ripresa lenta e di difficoltà economica per le famiglie di ogni censo. La riforma dell Università in Italia rappresenta l altro evento sul quale vale la pena fare qualche riflessione. Non c è alcun dubbio che il mondo accademico attuale ha bisogno di un vigoroso processo riformatore e la riforma, a mio avviso, necessita di essere implementata al più presto, non solo per contrastare il declino scientifico, ma anche per fare emergere tutte le energie sane che oggi esistono nel nostro mondo accademico. È iniziato un nuovo percorso e saranno necessarie numerose correzioni in itinere. In questo momento il ruolo delle società scientifiche come la SIAIP è fondamentale, ma solo per chi crede in quello che sta facendo. È difficile pensare che una comunità di uomini e donne impegnati nella formazione professionale e per il bene dei bambini, non viva con sofferenza i momenti attuali, contrassegnati da interessi contrapposti che tendono a complicare la relazione medico-paziente, ad offuscare il ruolo del medico come curatore ed avvocato della salute e della felicità del suo piccolo paziente e della sua famiglia. È estremamente importante che un associazione sappia gestire la conoscenza nel miglior modo possibile; sia in grado di sviluppare la cultura dell apprendimento, le competenze e le capacità degli individui che ne fanno parte; capisca i propri punti di forza e di debolezza rispetto agli altri; gestisca le relazioni interne ed esterne, con incontri regolari e periodici. Dobbiamo definire e promuovere la figura dell Immuno-Allergologo Pediatra sia sul territorio che nei servizi ospedalieri e universitari di II e III livello. L immunoallergologo pediatra deve sempre più interfacciarsi tra il bambino e la società, nella politica sanitaria, e nella gestione psicologica del piccolo paziente. Le malattie allergiche sono ormai un problema sociale di notevole impatto ed è necessario aumentare le collaborazioni con le società scientifiche affini, nazionali ed internazionali, con la Società Italiana di Pediatria e realizzare meeting congiunti. Si deve parlare sempre più di integrazione tra le specialità, per una ricerca più efficace ed efficiente. L attività della SIAIP non può prescindere dalla collaborazione con le associazioni di pazienti e con il mondo della scuola, favorendo in questo ambito l intervento e la coordinazione delle sedi regionali. La formazione e l aggiornamento continuo sono i cardini della nostra attività, con particolare attenzione al contesto sociale in cui si esercita la nostra professione. È in tale contesto che bisogna immettere le acquisizioni dalla ricerca, opportunamente vagliate dalle sperimentazioni cliniche e dai dati della medicina basata sulle evidenze, pur sempre attenti alla relazione con il bambino e la sua famiglia. Solo così sarà possibile ricavare maggiori risorse finanziarie, scientifiche, e soprattutto umane. Un caro saluto da Luciana Indinnimeo 1

4 : editoriale news Rivista di Immunologia e Allergologia Pediatrica 02/ a cura di Manuela Moncada Asma e basso peso alla nascita Svezia Un lavoro sull effetto combinato del fumo in casa nel periodo prenatale e del peso alla nascita. Questo studio è il primo che espressamente analizza l interazione tra basso peso alla nascita e fumo dei genitori. Si tratta di uno studio di coorte eseguito in Svezia nel quale è stato valutato il rischio di asma alla luce dei suddetti fattori nei ragazzi all età di anni. Lo studio include oltre 2000 bambini nei quali l associazione tra fumo e asma si è dimostrata decisamente più forte nei bimbi di basso peso alla nascita che in quelli di peso normale. Va considerato che il fumo stesso rappresenta un fattore di rischio per il basso peso alla nascita e che l effetto infiammatorio del fumo ha probabilmente un effetto maggiore sulle vie aeree ancora immature del bambino. L implicazione per la prevenzione è ovvia. Bjerg A, Hedman L, Perzanowski M, Lundbäck B, Rönmark E. A Strong Synergism of Low Birth Weight and Prenatal Smoking on Asthma in Schoolchildren. Pediatrics Asma e età gestazionale Svezia Ancora Svezia, questa volta su nati pretermine. Anche in questo caso si tratta di un grande studio di coorte (oltre soggetti) per i quali sono state raccolte informazioni sul peso alla nascita e sulla prescrizione di farmaci antiasmatici direttamente dalle farmacie. L originalità dello studio è l analisi dei dati della coorte nell età giovane adulta per la quale non erano disponibili dati rilevanti. Lo studio dimostra che i soggetti con età gestazionale tra 23 e 27 settimane avevano da adulti un rischio di avere avuto prescrizione di farmaci antiasmatici di circa 2 volte e mezza. I soggetti con età gestazionale maggiore invece non avevano un rischio aumentato. Crump C, Winkleby MA, Sundquist J, Sundquist K. Risk of Asthma in Young Adults Who Were Born Preterm: A Swedish National Cohort Study. Pediatrics Fenotipi e wheezing Olanda I bambini che presentano wheezing possono evolvere verso differenti fenotipi con associazioni diverse con asma, manifestazioni diverse di atopia e iperreattività bronchiale. Lo studio in questione fa una revisione dei pattern di associazione osservati in due diverse coorti seguite per i primi 8 anni di vita con lo scopo di stabilire se i fenotipi osservati sono replicabili. Il risultato dello studio è che l associazione con asma, atopia, iperreattività bronchiale e funzione polmonare è molto simile tra le due coorti. Ancora un dato che suggerisce come sia importante studiare approfonditamente l interazione tra genetica e esposizioni ambientali per spiegare l origine dell asma. Savenije OE, Granell R, Caudri D, Koppelman GH, Smit HA, Wijga A, de Jongste JC, Brunekreef B, Sterne JA, Postma DS, Henderson J, Kerkhof M. Comparison of childhood wheezing phenotypes in 2 birth cohorts: ALSPAC and PIAMA. J Allergy Clin Immunol

5 : rubrica pai Rivista di Immunologia e Allergologia Pediatrica 02/ Gli Autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interesse rispetto agli argomenti trattati nell articolo. 3

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11 : allergie Rivista di Immunologia e Allergologia Pediatrica 02/ Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce A cura della Commissione Allergia Alimentare della SIAIP Alberto Martelli 1 (coordinatore), Loredana Chini 2, Iride Dello Iacono 3, Annalisa Ferlisi 4, Paolo Meglio 5, Giovanna Monti 6, Maria Carmela Verga 7 Parole chiave: allergia al pesce, cross-reattività, Test di Provocazione Orale (TPO) Abstract Introduzione. Il pesce costituisce una frequente causa di allergia alimentare. Ad oggi non ci sono indicazioni univoche sul comportamento da adottare nei confronti dei pazienti con sospetta Allergia alle Proteine del Pesce (APP). È stato valutato l approccio diagnostico/terapeutico seguito nei principali centri allergologici italiani. Materiali e metodi. È stata condotta un indagine sul comportamento degli allergologi pediatri italiani in 91 Centri Allergologici (CA), somministrando un questionario a risposta multipla. Sulle risposte, anonime, è stata effettuata l analisi statistica. Risultati. Sono pervenuti 68 questionari. Oltre il 60% dei CA segue pazienti di età superiore a 14 anni. Nei CA accedono numerosi pazienti con sospetto di Allergia Alimentare (AA), a fronte di un bassissimo numero di diagnosi confermate. Il pesce più frequentemente responsabile di APP è il merluzzo. Il numero ed il tipo di test diagnostici che gli allergologi praticano per valutare la sensibilizzazione ad alimenti è variabile. Nel 75,8% dei casi viene praticato Prick by Prick (PbP) con alimento fresco crudo e cotto, ma solo nel 9% viene praticato il Test di Provocazione Orale. Le prescrizioni dietetiche non sono uniformi. Solo nel 18,2% dei CA è stato elaborato un protocollo diagnostico/terapeutico per l APP. Conclusioni. L indagine ha fatto emergere una diffusa eterogeneità di comportamento. È opportuno arrivare a definire un percorso coordinato e condiviso nella diagnosi e nel trattamento dell APP. 1 Divisione Pediatria. Ospedale Santa Corona. Garbagnate Milanese; 2 Allergologia-Immunologia Pediatrica, Policlinico Tor Vergata, Università di Roma Tor Vergata, Roma; 3 Unità Operativa di Pediatria ed Allergologia Pediatrica. Ospedale Fatebenefratelli, Benevento; 4 Istituto di Biomedicina e Immunologia Molecolare CNR-Palermo; 5 Pediatra di famiglia, ASL RMC, Roma; 6 Dipartimento di Pediatria, Ospedale Regina Margherita, Torino; 7 Pediatra di famiglia, A.S.L. Salerno iridedello@hotmail.com Gli Autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interesse rispetto agli argomenti trattati nell articolo. 9

12 Background Il pesce occupa un importante posto nell alimentazione umana, rappresentando una fonte proteica molto preziosa ma, nello stesso tempo, costituisce una delle più frequenti cause di allergia alimentare 1-3. Il pesce, infatti, è il terzo più frequente allergene dopo uovo e latte vaccino nella maggior parte dei paesi europei 4. La comparsa di sintomi allergici non è causata solo dall ingestione dell alimento ittico ma può essere indotta anche dall inalazione di vapori di cottura o dalla manipolazione del pesce sia in ambiente domestico e sia, più frequentemente, in sede occupazionale. Poiché la maggior parte dei pazienti allergici al pesce non tollera il merluzzo, l allergia a questa specie ittica viene abitualmente considerata come paradigmatica dell allergia al pesce in generale. L ipersensibilità al merluzzo, infatti, è stata ampiamente studiata: nel 1975 Elsayed 5 descrisse la struttura primaria del principale allergene del merluzzo, Gad c I, proteina stabile al calore e alla digestione, precedentemente conosciuto come Cod M 6. Tale allergene, che è stato ulteriormente caratterizzato da Jenkis, è una proteina sarcoplasmatica con un PM che varia da 10 a 13 kda, appartenente al gruppo delle proteine muscolari trasportanti il Ca, ed è nota come parvalbumina. Essa può essere suddivisa in due distinte isoforme, alfa e beta e quest ultima, nel pesce, è considerata un pan-allergene cross-reattivo 7. Sebbene a oggi siano state purificate e caratterizzate 39 parvalbumine che agiscono come allergeni, allo stato attuale siamo in grado di determinarne solo due: -rgad c1 Gadus callarias (parvalbumina del merluzzo); -rcyp c1 Cyprinus carpio (parvalbumina della carpa). È stato dimostrato che la parvalbumina è presente nel muscolo bianco della maggior parte delle specie ittiche; per tale motivo può esistere cross-reattività allergenica tra le varie specie la cui frequenza, secondo Sicherer, si aggira intorno al 50% 8. Tuttavia, pazienti allergici al merluzzo possono ingerire alcune altre specie di pesce senza presentare reazioni avverse, come dimostrato da vari Autori Tra i lavori più recenti, volti a valutare la cross-reattività tra diverse specie di pesci, quello di Van Do et al. 13 ha studiato il profilo allergenico nei confronti di 9 comuni specie ittiche di 10 pazienti, 8 donne e 2 uomini, di età compresa tra 21 e 55 anni, con anamnesi di reazioni sistemiche dopo contatto con il merluzzo, in almeno due occasioni. Le conclusioni cui gli Autori giungono, sono che il merluzzo, il salmone, il merlano nero, l aringa e il pesce lupo contengono gli allergeni cross-reattivi più potenti, mentre l halibut, la passera nera, il tonno e lo sgombro sono i pesci verso i quali vi è una minore incidenza di sensibilizzazione. Se ne potrebbe dedurre che queste ultime specie potrebbero più facilmente essere tollerate, ma purtroppo il limite di questo lavoro è che i pazienti esaminati, non essendo stati sottoposti a Test di provocazione Orale (TPO), sono stati valutati solo tenendo conto della loro sensibilizzazione. Ciò non consente di concludere che la cross-reattività, osservata in vitro, trovi riscontro in una co-sensibilizzazione in vivo. Nel 2005 è stato pubblicato un lavoro sulla parvalbumina del tonno, il cui scopo era quello di individuare i motivi dei risultati contrastanti emersi dai precedenti studi. Infatti, mentre in alcuni era stata dimostrata l assenza del panallergene in questa specie ittica, in altri, al contrario, ne era stata confermata la presenza, accanto, tuttavia, a una bassa allergenicità. Gli Autori confermarono, quindi, che la parvalbumina è presente nel muscolo bianco del dorso, mentre è assente nel muscolo rosso. Vi è, inoltre, anche un ineguale distribuzione, dovuta al fatto che il muscolo bianco anteriore contiene più parvalbumina rispetto al muscolo bianco posteriore, mentre la quantità di parvalbumina si riduce dalla regione dorsale a quella caudale. Quest ultima osservazione, riportata anche per il merluzzo, potrebbe spiegare la scarsa reattività dei Prick by Prick effettuati con il tonno fresco e/o degli SPT e/o della ricerca delle IgEs, qualora gli estratti vengano preparati con quella porzione del muscolo del tonno che contiene una quantità insufficiente di parvalbumina 14. Il principale allergene del merluzzo, la parvalbumina, è una proteina stabile al calore e alla digestione e può essere suddiviso in due isoforme, alfa e beta e quest ultima, nel pesce, è considerata un panallergene cross-reattivo. 10 Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce

13 Lim et al., nel 2008, hanno pubblicato uno studio volto a valutare il profilo allergenico di quattro pesci tropicali, comunemente consumati nelle nazioni asiatiche, all epoca dello svezzamento, studiandone la cross-reattività delle IgE nei confronti di Gad c 1. Gli Autori hanno dimostrato che 9/10 pazienti risultano sensibilizzati a più di un pesce e che tutti mostrano IgEs nei confronti della parvalbumina del merluzzo, nonostante che in tutti i bambini esaminati manchi una precedente esposizione. Le loro conclusioni sono state che i test commerciali per il merluzzo possono essere utilizzati per studiare la sensibilizzazione anche nei confronti dei pesci tropicali 15. Recentemente Griesmeier et al. hanno studiato la crossreattività delle IgE per le parvalbumine purificate del merluzzo e del rombo giallo, dimostrando che la loro elevata allergenicità, a fronte di quella più bassa nei confronti del pescespada, è imputabile alla maggiore ricchezza di muscolo rosso in quest ultima specie 16. Pensando erroneamente una cross-reattività, la maggior parte delle persone con allergia al pesce evita anche i frutti di mare. L infondatezza di questo comportamento consiste nel fatto che l allergia ai frutti di mare (crostacei e molluschi, inclusi i cefalopodi) è una reazione rivolta principalmente verso un panallergene, la tropomiosina, che è diversa strutturalmente dalla parvalbumina e che non cross-reagisce con essa. Sebbene, quindi, alcuni soggetti con allergie alimentari multiple possano manifestare allergia sia verso il pesce, sia verso i frutti di mare, la risposta immunitaria allergica non è rivolta verso gli stessi allergeni. Ne consegue, pertanto, che i soggetti con l una o l altra allergia, ovvero al pesce o ai frutti di mare, non necessitano routinariamente di evitare l altro alimento. Alla luce di quanto fin qui detto, quale comportamento dobbiamo adottare di fronte ad un bambino che abbia presentato una reazione avversa a un tipo di pesce? Le soluzioni, poiché purtroppo, a tutt oggi, l analisi della letteratura non consente di rispondere univocamente al quesito, potrebbero essere due: consigliare l astensione da ogni tipo di pesce, alla luce della possibile cross-reattività tra le varie parvalbumine; prospettare la possibilità di introdurre nella dieta di un bambino allergico ad un tipo di pesce, un pesce di altra specie, verificandone la tolleranza con un TPO in ambiente adeguato. Obiettivo del nostro studio è stato quello di valutare l approccio diagnostico e terapeutico che i principali centri allergologici italiani adottano nei confronti di bambini con Allergia alle Proteine del Pesce (APP). L allergia ai frutti di mare è una reazione rivolta principalmente verso un panallergene, la tropomiosina, diverso strutturalmente dalla parvalbumina e che non crossreagisce con essa. Materiali e metodi È stata condotta un indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani operanti nei 91 Centri Allergologici (CA) registrati al 31/8/2010 sul sito web della SIAIP. Lo studio ha previsto la somministrazione di un questionario a risposta multipla, pubblicato su un sito internet specializzato, da compilare in maniera anonima. Era consentita una sola risposta, tranne che alle domande n. 6 e n. 11, relative rispettivamente ai test diagnostici utilizzati per porre diagnosi di Allergia Alimentare (AA) e alla esclusione dalla dieta dei vari tipi di pesce. Le domande contenute nel questionario erano finalizzate a : a. definire la tipologia e l organizzazione del CA; b. quantificare gli accessi per sospetto di AA, le diagnosi di AA e, specificamente, di APP; c. definire l iter diagnostico seguito nei casi di sospetta APP e il successivo follow-up; d. conoscere i comportamenti prescrittivi relativi alla dieta di eliminazione; e. rilevare eventuali discordanze tra i comportamenti degli allergologi pediatri operanti nello stesso CA. L indagine è stata condotta tra giugno e settembre Su tutte le risposte è stata effettuata un analisi di statistica descrittiva, sia sul totale dei CA, sia sui Centri, suddivisi in base alla localizzazione geografica (Nord, Centro, Sud). Relativamente alla domanda 6 (test diagnostici), è stata eseguita un analisi statistica descrittiva anche per gruppi di risposte (clusters di test diagnostici). Relativamente ai centri da cui sono pervenuti più questionari, è stata rilevata la discordanza interna del percorso diagnostico-terapeutico. A. Martelli et al. 11

14 Tab. I. Risultati - Tabella riassuntiva. Questionari n Centro di Allergologia n N. Pediatri/Allergologi - Media= 2,1 Range= 1-5 Mediana= 2,5 Moda= 3,0 Domanda 3 Età pazienti Risposte A B C D E F 4 Pazienti/sett Diagnosi/sett Tests Tpo Diagnosi APP Tipo pesce TPO conferma Altri tipi di pesce TPO altri tipi di pesce Tpo spt Crostacei - molluschi Rivalutazione Protocollo Per valutare l eventuale relazione tra esecuzione del TPO per conferma diagnostica e n. di pazienti/settimana, numero di tests e numero di pediatri/allergologi che seguono pazienti con AA è stata eseguita un analisi di correlazione. 45,6% fino a 18 anni e il 16,2% segue pazienti di ogni età (Fig. 1). Poiché oltre il 60% dei CA segue Risultati Sono pervenuti 68 questionari da 62/91 Centri ai quali questi erano stati inviati. La numerosità non consente di considerare il campione come rappresentativo di tutti i CA registrati sul sito web della SIAIP. I risultati sono riportati sinteticamente nella tabella riassuntiva (Tab. I). Per ogni domanda sono riportati, nelle etichette dei dati o in tabella, in valore assoluto e in percentuale, i risultati relativi sia alla totalità dei CA, sia ai CA suddivisi in base alla localizzazione geografica (nord, centro, sud). Nei CA analizzati operano mediamente 2,1 allergologi pediatri che seguono bambini con AA (range = 1-5). Solo il 38,2% segue pazienti fino a 14 anni: il Fig Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce

15 pazienti di età superiore a 14 anni, se ne deduce che l assistenza, per questa patologia, viene frequentemente estesa oltre l età pediatrica. Fig. 2. Nel 36,8% dei CA afferiscono fino a 5 pazienti/ settimana con sospetto di AA, nel 63,3% dei CA più di 5 (Fig. 2). Nell 83,6% dei CA ogni settimana vengono confermate tra 0 e 5 diagnosi di AA (Fig. 3). I test utilizzati per valutare la sensibilizzazione ad alimenti sono: SPT con estratti commerciali (95,6%), Prick by Prick con alimento fresco crudo (94,1%), Prick by Prick (PbP) con alimento cotto (73,5%), ricerca delle IgEs con Uni Cap (66,2%), ricerca delle IgEs con metodi diversi da Uni Cap (32,4%), ricerca delle IgEs verso molecole (29,4%) (Fig. 4). Inoltre, il 39,4% degli allergologi pratica 4 test, il 33,3% ne pratica 3 o meno, mentre il 30,9% ne pratica 5 o più. Un alta percentuale di allergologi (75,8%) pratica PbP con alimento fresco crudo e con alimento cotto (Tab. II - Fig. 5). Il TPO viene eseguito nel 76,5% dei CA (Fig. 6). Le APP sono poco frequenti: il 97,1% dei CA pone tra 0 e 5 diagnosi di APP al mese (Fig. 7). Il pesce che è risultato più frequentemente responsabile di reazioni allergiche è il merluzzo (75%) (Fig. 8). Molto più raramente l allergia è dovuta ad altre specie come la sogliola (4,4%) il tonno (5,9%); da segnalare che il 5,9% degli allergologi Fig. 4. Tab. II. Fig. 3. Tests Diagnostici - Clusters a = 4 Tests b = alimento crudo+cotto c = /< 3 tests d = /> 5 tests Moda= Mediana=4 A. Martelli et al. 13

16 Fig. 5. Fig. 7. Fig. 6. Fig. 8. inserisce i gamberi tra i pesci frequentemente responsabili di reazione avversa, e questo conferma che, abbastanza comunemente, i crostacei vengono erroneamente considerati, anche dai sanitari, come appartenenti alle specie ittiche. Solo nel 9% dei CA viene praticato il TPO per confermare l APP. Nel 67% dei casi esso viene, invece, riservato ai casi dubbi; nel 23,9% dei casi esso non viene mai praticato (Fig. 9). Per quanto riguarda le prescrizioni dietetiche, solo il 5,9% degli allergologi, di fronte alla conferma diagnostica di allergia nei confronti di una determinata specie ittica, esclude ogni tipo di pesce. Il 76,5% lascia nella dieta i pesci tollerati fino a quel momento e il 51,5% esegue test allergologici verso i pesci non ancora introdotti (fig. 10). Il TPO in ambiente protetto per confermare even- 14 Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce

17 Fig. 11. Fig. 9. allergologi pratica il TPO solo se essi non sono stati assunti di recente, il 17,1% lo pratica sempre e solo l 1,7% non lo pratica mai (Fig. 12). Il 44,8% degli allergologi consente l assunzione di crostacei e molluschi, ma il 50,7% li escluderebbe dalla dieta, a meno che il bambino non li abbia mangiati recentemente senza problemi (Fig. 13). Fig. 10. tuali reazioni nei confronti di altri tipi di pesce, viene praticato sempre nel 39,7% dei casi e nel 47,1% solo in caso di positività degli SPTs e/o dei PBP e/o delle IgEs (Fig. 11). In caso di SPT positivi per pesci assunti precedentemente senza manifestazioni cliniche, l 81% degli Fig. 12. A. Martelli et al. 15

18 Fig. 14. Fig. 13. Il 44,8% degli allergologi rivaluta il bambino dopo 1 anno (Fig. 14), il 38,8% dopo 1-5 anni e ben il 16,4% considera che la rivalutazione sia inutile perché si ritiene che l allergia al pesce duri tutta la vita. Solo nel 18,2% dei CA è stato elaborato, anche se informalmente, un protocollo diagnostico/terapeutico per l APP (Fig. 15). Da 5 CA sono pervenuti più questionari. Dall analisi delle risposte degli allergologi operanti in uno stesso CA, si rilevano comportamenti diversi soprattutto per quanto riguarda il TPO effettuato per la conferma diagnostica e le indicazioni dietetiche relative ai pesci non responsabili dell allergia (in 3/5 CA) (Tab. III). È stata eseguita un analisi di correlazione sull esecuzione del TPO (dom. 10), inserendo come variabili indipendenti il n. di pazienti/settimana, il n. di test praticati, e il n. di allergologi che seguono pazienti con AA. Esiste una correlazione positiva, statisticamente significativa, tra esecuzione del TPO e n. di allergologi operanti nel centro (Tab. IV), mentre non c è correlazione né con il numero di pazienti che Fig Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce

19 afferiscono al CA, né con il n. di test diagnostici praticati preliminarmente. Questionario sul comportamento degli allergologi pediatri nei confronti di pazienti con allergia al pesce Centro di Allergologia Pediatrica di: Allergologi/Pediatri che seguono pazienti con allergie alimentari : n. 3) Qual è l età dei pazienti che afferiscono al tuo Centro di Allergologia? a) 0-14 anni b) 0-18 anni c) Pazienti di ogni età 4) Quanti pazienti /settimana afferiscono con sospetto di Allergia Alimentare? a) 0-5 b) 6-10 c) d) > 20 5) Quante diagnosi di Allergia Alimentare/settimana vengono poste? a) 0-5 b) 6-10 c) ) Per valutare la sensibilizzazione ad alimenti utilizzi: (barrare uno o più test) a) SPT con estratti commerciali b) Prick by Prick con alimento fresco crudo c) Prick by Prick con alimento cotto d) Ricerca IgEs con Uni Cap e) Ricerca di IgEs con metodi diversi da Uni Cap f) Ricerca IgEs verso molecole 7) Presso il tuo Centro viene eseguito il test di provocazione orale con alimento (TPO) per porre diagnosi di Allergia Alimentare? a) Sì b) No c) Solo nei pazienti con IgEs negative 8) Quante diagnosi di Allergia al Pesce effettui ogni mese? a) 0-5 b) 6-10 c) d) > 20 9) Sapresti dire quale pesce, nella tua casistica, è più frequentemente responsabile di reazioni allergiche? a) Merluzzo b) Sogliola c) Tonno d) Pesce Spada e) Rombo f) Altro: 10) Di fronte ad un paziente con anamnesi suggestiva di reazione immediata e conferma di IgEs positive per un tipo di pesce, effettui TPO per conferma diagnostica? a) Sì, sempre b) Sì, nei casi clinicamente dubbi c) No, mai 11) Una volta confermata l allergia ad un tipo di pesce: a) Escludi ogni tipo di pesce dalla dieta del bambino fino a nuova rivalutazione b) Lasci nella dieta gli altri pesci che finora il bambino ha tollerato senza problemi c) Effettui SPT, Pbp ed IgEs verso altri tipi di pesce che, finora, il bambino non ha mai introdotto nella dieta 12) Se decidi di saggiare altri tipi di pesce, che il bambino non ha mai assunto finora, lo fai mediante TPO in ambiente protetto? a) Sì sempre b) Si, solo per i pesci verso cui è SPT, PbP e/o IgEs positivo c) Si, solo per i pesci verso cui è SPT, PbP e/o IgEs negativo 13) Saggi, in ambiente protetto, tramite TPO, i pesci per i quali il bambino è SPT positivo, ma che ha sempre mangiato senza manifestazioni cliniche? a) Sì sempre b) Si, ma solo se non li ha assunti recentemente senza presentare manifestazioni cliniche c) Mai A. Martelli et al. 17

20 14) Per maggiore prudenza eviteresti anche crostacei e molluschi? a) Sì sempre b) Si, a meno che non li abbia mangiati recentemente senza problemi c) No mai 15) Una volta che hai posto una diagnosi di Allergia al Pesce, dopo quanto tempo pensi di rivalutare il paziente? a) Dopo 1 anno b) Dopo 1-5 anni c) È inutile perché l allergia al pesce dura tutta la vita 16) Nel tuo Centro di Allergologia Pediatrica è stato elaborato, anche informalmente, un protocollo diagnostico/terapeutico per l Allergia alle Proteine del Pesce condiviso da tutti i medici? a) Sì b) No Discordanza interna N. 4 Centri hanno inviato 2 questionari, 1 centro ne ha inviati 3. Relativamente ad alcune domande, è stato registrato il numero di Centri i cui allergologi/ pediatri hanno dato risposte differenti (Tab. III). In nessuno dei 5 Centri è stato elaborato un protocollo diagnostico/terapeutico condiviso per l allergia alle proteine del pesce. Tab. III. Domanda N. Centri con discordanza interna 6 1/5 7 1/5 10 3/5 11 3/5 12 1/5 13 1/5 14 1/5 15 2/5 Inferenza statistica: correlazione. È stata eseguita una regressione lineare sul TPO (domanda 10), inserendo come variabili indipendenti il numero di pazienti/settimana, il numero di test praticati, il numero di allergologi che seguono pazienti con AA. Esiste una correlazione positiva, statisticamente significativa, tra esecuzione del TPO e numero di allergologi operanti nel centro (Tab. IV). Tab. IV. TPO Covarianza Coefficiente di correlazione di Pearson N. pazienti 0,04 0,11 n.s. N. tests -0,01 0,02 n.s. N. allergologi 0,26 0,45 P<0.01 Conclusioni Se consideriamo l alto numero di pazienti con sospetto di AA che accede ai CA, a fronte di un bassissimo numero di diagnosi confermate, possiamo ritenere che il sospetto di AA rappresenti attualmente un problema clinico importante, che comporta l utilizzo di rilevanti risorse economiche e umane. Per quanto riguarda l APP, inoltre, l indagine conoscitiva da noi condotta ha fatto emergere molte criticità e difformità di comportamento nel percorso diagnosticoterapeutico adottato dagli allergologi italiani: In generale nel percorso diagnostico dell AA, molto spesso si praticano, indiscriminatamente, più test diagnostici volti a valutare lo stesso parametro, ossia il livello delle IgE specifiche: SPT con estratti, PbP con alimento, IgEs con UniCap, IgEs con metodi diversi da UniCap. Solo 1 / 3 degli allergologi ne pratica 3 o meno, più frequentemente ne vengono praticati 4 ed, in un 1 / 3 dei casi, 5 o più. La maggior parte degli allergologi testa gli alimenti sia crudi e sia cotti; questo comportamento, tuttavia, nei confronti dell APP, non è stigmatizzabile, essendo la parvalbumina, principale allergene del pesce, una proteina termostabile oltre che resistente alla digestione. Per quanto riguarda il TPO, gold-standard per la diagnosi di AA, nel 76% dei casi esso viene praticato nei vari CA; tale percentuale, tuttavia, scende drasticamente qualora si tratti di confermare una 18 Indagine conoscitiva sul comportamento degli allergologi pediatri italiani nei confronti di bambini con allergia al pesce

21 sospetta allergia al pesce: infatti, solo il 9% degli allergologi lo esegue sempre mentre il 24% non lo pratica mai. La percentuale di TPO praticati non sembra essere correlata né con il numero di accessi al CA, né con il maggiore o minore numero di test diagnostici effettuati preliminarmente. Il fattore che maggiormente sembra influenzare la disponibilità a praticare un TPO è il numero di allergologi che operano nel centro: ciò è comprensibile, considerando l impegno necessario per eseguire un test che, in primis, richiede adeguate risorse umane. Per quanto riguarda le raccomandazioni dietetiche, raramente queste sono molto restrittive: la maggior parte degli allergologi consente che il bambino assuma altri tipi di pesce, con o senza l effettuazione preliminare dei test diagnostici e/o del TPO. Tuttavia, non è irrilevante la percentuale di allergologi che esclude dalla dieta ogni tipo di pesce (5,9%), come pure il fatto che il 16% degli allergologi ritenga superflua la rivalutazione periodica dei pazienti, una volta posta la diagnosi di APP. L 82% dei CA non adotta un protocollo diagnostico/terapeutico condiviso e, nei pochissimi centri da cui sono pervenuti i questionari di più allergologi, si riscontra spesso un diverso comportamento degli operatori nei momenti più critici del percorso diagnostico- terapeutico. In conclusione il nostro studio sottolinea l opportunità di creare una rete di comunicazione permanente tra i Centri Allergologici italiani e di promuovere un confronto sulle problematiche relative alla diagnosi e al trattamento dell APP, finalizzato a definire un percorso condiviso e coordinato che consenta una maggiore uniformità di comportamento e una più adeguata ottimizzazione delle risorse, umane ed economiche. Bibliografia 1 Aas K. Fish allergy and the cod fish allergen model. In: Brostoff J, Challacombe SJ, eds. Food allergy and intolerance. London: Baillière Tindall 1987, pp Elsayed S. Fish allergy and the cod fish allergen model. In: Brostoff J, Challacombe SJ, eds. Food allergy and intolerance. 2nd ed. London: Saunders 2002, pp Sampson HA. Update on food allergy. J Allergy Clin Immunol 2004;113: Sicherer SH, Sampson HA. Food allergy. J Allergy Clin Immunol 2006;117:S Elsayed S, Bennich H. The primary structure of allergen M from cod. Scand J Immunol 1975;4: Aas K. Fish allergy and the cod fish allergen model. In: Brostoff J, Challacombe SJ, eds. Food allergy and intolerance. London: Baillière Tindall 1987, pp Jenkins JA, Breiteneder H, Mills ENC. Evolutionary distance from human homologs reflects allergenicity of animal food proteins. J Allergy Clin Immunol 2007;120: Sicherer SH. Clinical implications of cross-reactive food allergens. J Allergy Clin Immunol 2001;108: Bernhisel-Broadbent J, Scanlon SM, Sampson HA. Fish hypersensitivity, I: in vitro and oral challenge results in fish-allergic patients. J Allergy Clin Immunol 1992;89: Helbling A, Haydel R Jr, McCants ML, et al. Fish allergy: is cross-reactivity among fish species relevant? Doubleblind placebo-controlled food challenge studies of fish allergic adults. Ann Allergy Asthma Immunol 1999;83: Aas K. Studies of hypersensitivity to fish: allergological and serological differentiation between various species of fish. Int Arch Allergy 1996;30: De Martino M, Novembre E, Galli L, et al. Allergy to different fish species in cod-allergic children: in vivo and in vitro studies. J Allergy Clin Immunol 1990;86: Van Do T, Elsayed S, Florvaag E, et al. Allergy to fish parvalbumins: Studies on the cross-reactivity of allergens from 9 commonly consumed fish. J Allergy Clin Immunol 2005;116: Lim DL, Neo KH, Goh DL, et al. Missing parvalbumin: implications in diagnostic testing for tuna allergy. J Allergy Clin Immunol 2005;115: Lim DL, Neo KH, Yi FC, et al. Parvalbumin the major tropical fish allergen. Pediatr Allergy Immunol 2008;19: Griesmeier U, Vazquez-Cortés S, Bublin M, et al. Expression levels of parvalbumins determine allergenicity of fish species. Allergy 2010:65: A. Martelli et al. 19

22 : allergie Rivista di Immunologia e Allergologia Pediatrica 02/ Allergia alla Tropomiosina: dalla diagnosi molecolare alla pratica clinica a cura della Commissione Diagnostica della SIAIP Stefania La Grutta 1, Mauro Calvani 2 (coordinatore), Marcello Bergamini 3, Neri Pucci 4, Riccardo Asero 5 Parole chiave: Tropomiosina, cross-reattività, diagnosi Abstract La tropomiosina è l allergene maggiore dei crostacei ed è il principale allergene responsabile della cross-reattività molecolare e clinica per ingestione tra crostacei e molluschi e per via inalatoria con altri invertebrati, come gli acari della polvere e gli insetti. L allergia alla tropomiosina va ricercata in tutti i bambini che presentano una sensibilizzazione allergica ai crostacei ed ai molluschi, in quelli con una sensibilizzazione allergica alla Blattella e all Anisakis ed infine nei pazienti sensibilizzati agli Acari della polvere, qualora si voglia effettuare ITS. Per la diagnosi di allergia alla tropomiosina si suggerisce di utilizzare l indagine molecolare dopo la esecuzione degli SPT e della ricerca delle IgE specifiche per i singoli alimenti o inalanti. Con la biologia molecolare è oggi possibile la ricerca delle singole IgE specifiche di alcune tropomiosine quali ad esempio quella dell Anisakis, della Blattella germanica, dell Acaro della polvere, e dei gamberetti. Introduzione La Tropomiosina è l allergene maggiore dei crostacei ed è il principale allergene responsabile della crossreattività molecolare e clinica per ingestione tra crostacei e molluschi e per via inalatoria con altri invertebrati, come gli acari della polvere e gli insetti. I crostacei (gamberi, mazzancolle, aragoste, granchi) ed i molluschi (cozze o mitili, vongole, telline, cannolicchi, ostriche, fasolari, seppie, calamari e polpi) sono prodotti ittici spesso presenti sulle nostre tavole, reperibili nel mercato attraverso la grande distribuzione, che possono provenire da attività di pesca in mare o in acque dolci, ma anche da attività di acquacoltura o maricoltura. Il consumo domestico di questi prodotti è variabile in base alle tradizioni alimentari dei differenti paesi e per le diverse specie. Si registrano valori molto elevati in Europa in particolare in Portogallo, dove il consumo medio annuo pro capite di polpi colloca questo paese al terzo posto nella graduatoria mondiale, dopo Islanda e Giappone. Tra i paesi europei, in Germania crostacei e molluschi costituiscono il 15% dell intero consumo annuo di prodotti ittici, mentre sia in Spagna (mitili, calamari, polpi) che in Francia (mitili, ostriche, capesante atlantiche), congelati e/o cotti rappresentano un consumo minore, corrispondente a circa il 12-17% dell intero consumo ittico per l anno 1 U.O.S. Ambiente e Salute, ARPA Sicilia, Scuola di Specializzazione in Pediatria, Università di Palermo; 2 UOC di Pediatria ed Ematologia pediatrica, Ambulatorio Pediatrico-Allergologico, Azienda Ospedaliera S. Camillo-Forlanini, Roma; 3 Pediatra di famiglia, Ferrara: 4 UO di Allergologia, Ospedale A. Meyer, Firenze; 5 Ambulatorio di Allergologia, Clinica San Carlo, Paderno Dugnano, Milano lagruttastefania@libero.it 20 Gli Autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interesse rispetto agli argomenti trattati nell articolo.

23 Scheda: cosa è utile sapere sulla Tropomiosina nella pratica clinica. Why: perché è importante conoscere la tropomiosina La Tropomiosina è l allergene maggiore dei crostacei ed è il principale allergene responsabile della cross-reattività molecolare e clinica per ingestione tra crostacei e molluschi e per via inalatoria con altri invertebrati, come gli acari della polvere e gli insetti. Who: chi sono i soggetti nei quali posso ritrovare allergia alla tropomiosina L allergia alla tropomiosina deve essere sospettata: In tutti i bambini che presentano una sensibilizzazione allergica ai crostacei ed ai molluschi. In bambini con una sensibilizzazione allergica agli acari della polvere o agli acari minori, agli artropodi (Blattella e Chironomidi) e all Anisakis. What: che cosa cercare: l importanza della cross-reattività Nei bambini con sospetta allergia ai crostacei e ai molluschi richiedere il dosaggio delle IgE specifiche per la tropomiosina del gamberetto o se possibile del/dei singoli crostacei. Se positivi per l acaro della polvere, richiedere anche il dosaggio della tropomiosina dell acaro (Der p 10). Nei bambini con allergia all acaro della polvere da sottoporre a ITS, richiedere l indagine molecolare per accertarsi che la sensibilizzazione allergica verso l acaro sia dovuta ad una sensibilizzazione agli allergeni maggiori (Der p 1 o Der p 2) e non alla tropomiosina (Der p 10). Nel caso si riscontri la positività per il Der p 10 sarà utile ricercare nella anamnesi una possibile allergia, anche subclinica verso i crostacei e i molluschi, ed eventualmente anche la presenza di una sensibilizzazione. Nel caso si sospetti una allergia alla Blattella o una Anisakis, sarà indicato integrare gli SPT o la ricerca delle IgE specifiche con la determinazione molecolare, quando concomiti una allergia all acaro della polvere o ai crostacei, per verificare se la sensibilizzazione sia diretta verso gli allergeni maggiori dell Anisakis (Ani S 1 e Ani S 7) o della Blattella germanica (Bla g 1 e Bla g 2) o risulti come conseguenza di una cross-reattività legata alle rispettive tropomiosine (Ani S 3 e Bla g 7). Which: quali mezzi diagnostici in uso Utilizzare l indagine molecolare per la ricerca della tropomiosina sempre solo in seconda battuta, ovvero dopo la esecuzione degli SPT (indagine più semplice, più sensibile, meno invasiva e meno costosa) o della ricerca delle IgE specifiche per i singoli alimenti o inalanti (indagine più sensibile e meno costosa). Con la biologia molecolare è oggi possibile la ricerca delle singole IgE specifiche solo nei confronti del rder p 10 (d 205 Phadia) e del rpen a 1 (f351 Phadia) mentre con il Test ISAC è possibile ricercare contemporaneamente le IgE specifiche nei confronti di 6 tropomiosine, la rani s 3 dell Anisakis, la nbla g 7 della Blattella germanica, la rder p 10 dell acaro della polvere, e tre tropomiosine dei gamberetti la epen a 1, la npen i 1, la npen m 1 rispettivamente del Penaeus aztecus, del Penaeus indicus e del Penaeus monodon In Italia il ritmo dei consumi domestici di questi prodotti mostra per l anno 2009 un aumento per alcuni crostacei (gamberi e mazzancolle) e molluschi (vongole, polpi) 1. I dati ISTAT 2006 ottenuti da un campione di famiglie italiane mediante un intervista telefonica con questionario, per rilevare gli acquisti settimanali di alcune categorie di alimenti, stimano che il consumo di crostacei e molluschi è molto ridotto nelle fascia di età < 20 anni, costituita da circa l 1% dei consumatori. Sulla base di tali informazioni è abbastanza difficile calcolare nel bambino il consumo (kg) procapite/anno di molluschi e crostacei rispetto all adulto, per il quale viceversa è possibile registrare un range di consumo di 1,5-5,1 kg procapite /anno ( (Istituto Nazionale di Statistica) 2. Dati Europei derivati dalle informazioni presenti nel database globale dell Autorità Europea per la Sicurezza Alimentare (EFSA) stimano che la percentuale dei giorni di consumo nei quali si superano i 100 g di crostacei e molluschi è stata 0,5-3% (Spagna), 9% (Irlanda), 13% (Italia), 14% (Finlandia), 18% (Germania), 19% (Regno Unito), 24% (Francia) e 48% (Belgio), mentre la percentuale dei giorni di consumo nei quali si superano i 200 g di crostacei e molluschi è stata 2% (Italia), 2,5% (Francia), 4% (Irlanda), 7% (Regno Unito), 11% (Belgio) e il 15% (Germania) 3. I crostacei ed i molluschi costituiscono una importante fonte nutrizionale di zinco, rame, glucosamina cloridrato e iodio, che tuttavia varia in base alla modalità con la quale vengono consumati, cioè se vivi, refrigerati, congelati o sottoposti a conservazione. Il consumo di questi prodotti ittici ed il riconoscimento del loro valore nutrizionale, oltre all avvento di nuovi stili alimentari, caratterizzati da alto consumo di crostacei e molluschi in differenti tipologie di prodotto (fresco, surgelato, trasformato) ha implicato la comparsa con maggiore frequenza di reazioni allergiche tra i consumatori. Pur prendendo atto che i tassi di prevalenza S. La Grutta et al. 21

24 Tab. I. Relazione tassonomica tra le varie specie dove è stata dimostrata o supposta una cross reattività con la Phylum Classe Ordine Famiglia Specie Arthropoda Crostacea Decapoda Crangonidae Penaeus aztecus Penaeus monodon Penaeus indicus Metapenaeus ensis Metapenaeus indicus Homardae Homarus americanus Palinuridae Palinuris stipsoni Palinuris homarus Canridae Charybdis feriatus Procambarus clarkia Arachnida Sarcoptiformes Pyroglyphidae Dermatophagoides pteronyssinus Dermatophagoides farinae Glycyphagidae Lepidoglyphus descructor Blomia tropicalis Insecta Blattaria Blattidae Blattella germanica Periplaneta americana Thysanura Lepisma saccarina Diptera Chironomidae Chironomus thummi thummi Chironomus plumosus Nematoda Nematode Anisakis Mollusca Gastropoda Pulmonata Helicidae Helix pomatia Helix aspersa Eobamia vermiculata Archeogastropoda Patellidae Turbo cornutus Patella vulgate Bivalvia (o Lamellibranchi) Anisomyaria Donacidae Donax serra Fissurelidae Mizuyopecten yessoensis Mytilioida Mytilidae Mytilus edulis Perna canaliculus Perna viridis Ostreoida Ostreidae Ostra edulis Crassostrea gigas Cephalopoda Octopoda Octopodidae Octopus vulgaris n.d.: non disponibile, da Bessot JC et al., Decapoda Loliginidae Todares pacificus Loligo vulgaris 22 Allergia alla Tropomiosina: dalla diagnosi molecolare alla pratica clinica

25 tropomiosina del gamberetto. Nome Molecola allergenica Identità (%) con la Tropomiosina di Gamberetto Via di esposizione Gamberetto scuro Pen a 1 99 Ingestione Gambero gigante o mazzancolla imperiale Pen m 1 99 Ingestione Mazzancolla bianca tropicale Pen i 1 99 Ingestione Gamberone Met e 1 99 Ingestione Gamberetto bianco Met i 1 99 Ingestione Aragosta Homa a 1 98 Ingestione Inalazione Aragosta Pan s 1 98 Ingestione Pan h 1 98 Ingestione Granchio Cha f 1 92 Ingestione Gambero n.d. Ingestione Acaro della polvere Der p Inalazione Acaro della polvere Der f Inalazione Acari delle derrate Lep d Inalazione Acaro tropicale Blo t Inalazione Scarafaggio Bla g 7 82 Inalazione Scarafaggio Per a 7 82 Inalazione Pesciolino d argento Lep s 1 67 Inalazione Tafano Chi t 1 78 Inalazione Chironomus plumosus Chi p 78 Inalazione Anisakis Ani s 3 74 Ingestione Lumaca Hela TM 61 Ingestione Lumaca Hela a 1 61 Ingestione Lumaca n.d. Ingestione Lumaca di mare con guscio spinoso Tur c 1 57 Ingestione Patella n.d. Ingestione Tellina Don s Ingestion Capasanta (Pettine) n.d. 62 Ingestione Cozza Myt e 57 Ingestione Cozza Per ca Inalazione Cozza Per v 1 Ingestione Ostrica Cra g 1 65 Ingestione Ostrica gigante Cra g Ingestione Polpo Oct v, Oct v 1 Ingestione Calamaro Tod p Ingestione Seppia Lol v Ingestione S. La Grutta et al. 23

26 di allergia a crostacei e molluschi sono notevolmente più bassi nei bambini rispetto agli adulti, con valori rispettivamente di 0,5% vs. 2,5%, la problematica di comprensione e di gestione dei rischi allergologici e non allergologici (tossici da biotossine), connessi all adozione di stili nutrizionali diversi, con precoce o eccessiva introduzione di crostacei e molluschi nella dieta dei bambini, rimane complessa 4. Ciò è ancora più importante se consideriamo i soggetti con patologia allergica respiratoria (asma con o senza rinite), che costituiscono un gruppo ad alto rischio di reazioni di ipersensibilità grave con reazioni anafilattiche fatali. Tropomiosina in natura e cross reattività Le Tropomiosine appartengono a una famiglia di proteine altamente conservate e strettamente correlate con isoforme multiple (almeno 18) presenti nelle cellule muscolari e non muscolari di tutte le specie di vertebrati e invertebrati, che insieme alla miosina e alla actina, contribuiscono alla contrazione muscolare, al trasporto di mrna ed al supporto meccanico della cellula. Le Tropomiosine nella loro struttura nativa contengono un residuo di 7 aminoacidi, che spesso si ripete in modo ininterrotto all interno della molecola. Assumono spesso una struttura di alfa elica, con due molecole che si avvolgono l una sull altra formando un dimero che le rende molto resistenti al calore e anzi la bollitura può liberarle nel vapore acqueo, dove è stato riscontrato ad esempio l allergene Pen i 1 non modificato. Digitando tropomiosina su un motore di ricerca per allergeni ( si estraggono 390 item, relativi a altrettante molecole isolate a oggi. Questa numerosità non stupisce affatto, anzi probabilmente sottostima la reale diffusione di questo allergene. La tropomiosina costituisce infatti un panallergene comune a due phylum del regno animale, quello degli artropodi e quello dei molluschi (Tab. I). Gli artropodi costituiscono di gran lunga la più numerosa categoria di animali, sia come specie che come diversità, contribuendo con le oltre specie identificate a circa l 80% di tutte le specie animali conosciute 5. La Tropomiosina è quindi uno dei principali componenti allergenici termostabili responsabile della cross-reattività tra crostacei, acari, insetti e nematodi, ed è quindi considerato il principale panallergene invertebrato che sensibilizza per via inalatoria o per ingestione individui predisposti. In natura, oltre alle Tropomiosine allergizzanti degli invertebrati, crostacei (gamberi, aragoste, granchi, gamberi), aracnidi (acari della polvere, ecc.), insetti (blatte, ecc.), e molluschi (calamari), esistono anche le tropomiosine non allergeniche dei vertebrati. Nella Tabella II sono riassunte alcune caratteristiche delle principali Tropomiosine di invertebrati (Tab. II). La tropomiosina del gambero (Pen a 1) è stato il primo allergene dei gamberetti ad essere identificato già nei primi anni 80 da Hoffman et al., che avevano individuato nei gamberi un allergene legante le IgE, successivamente identificato come tropomiosina dei gamberetti marroni da Lehrer et al. 6 7 La tropomiosina del gambero nel suo stato nativo è una proteina muscolare, un omodimero arrotolato con PM di 36 kda comprendente due molecole di alfa-elica avvolte l una sull altra. Dal punto di vista molecolare Pen a 1 è stata prodotta come proteina ricombinante, presenta una sequenza di aminoacidi altamente conservata tra i diversi organismi invertebrati e la sua natura cross-reattiva lo definisce come un pan-allergene degli invertebrati Giacché circa l 80% dei soggetti allergici ai gamberetti mostra reattività verso questa proteina, che lega più del 75% di tutte le IgE specifiche anti-gambero, la tropomiosina è considerata l allergene maggiore nei gamberetti e nei molluschi Oltre a ciò, l alto grado di identità di sequenza tra le tropomiosine delle differenti specie conferma che essa è il principale panallergene responsabile della cross-reattività tra i crostacei e tra quest ultimi (Metapenaeus ensis, Met e 1, tropomiosina del gambero) ed i molluschi (Todarodes pacificus, Tod p 1, tropomiosina del calamaro). Infine in conseguenza dell elevato grado di conservazione della struttura la tropomiosina è anche un importante allergene pan-cross sensibilizzante tra tutte le classi di artropodi, crostacei, aracnidi e insetti. A riprova di questa caratteristica, Jeong et al. hanno clonato la tropomiosina del Chironomus kiiensis (Chi k 10) appartenente alla classe degli insetti, ottenendo un segmento di 285 aminoacidi, con un PM di circa 32,531 kda. Tale proteina presenta un elevata omologia di sequenza con la tropomiosina di altri insetti, la Drosophila melanogaster (89,1%) e la Periplaneta americana (86,3%), ed anche con quella di altri due importanti gruppi di artropodi, come ad esempio il Palinurus stipsoni (aragosta) (78,9%) della classe dei crostacei ed il D. pteronyssinus della classe degli aracnidi (76,5%) 13. Per di più gli Autori hanno identificato mediante immunoblotting alcune bande comprese tra 70 e 80 kda, presumibilmente i dime- 24 Allergia alla Tropomiosina: dalla diagnosi molecolare alla pratica clinica