CARATTERIZZAZIONE MOLECOLARE E PERCORSO DI COUNSELLING MULTIDISCIPLINARE IN PAZIENTI ITALIANI AFFETTI DA SCLEROSI LATERALE AMIOTROFICA

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1 CARATTERIZZAZIONE MOLECOLARE E PERCORSO DI COUNSELLING MULTIDISCIPLINARE IN PAZIENTI ITALIANI AFFETTI DA SCLEROSI LATERALE AMIOTROFICA L. Mosca 1, C. Tarlarini 1, A. Marconi 2, S. Pozzi 2, G. Rossi 2, V. Sansone 2, C. Lunetta 2, S. Penco 1 lorena.mosca@ospedaleniguarda.it 1 Dipartimento di Medicina di Laboratorio, SS Genetica Medica, ASST Grande Ospedale Metropolitano Niguarda, Milano 2 NEuroMuscular Omnicentre, Fondazione Serena Onlus, Milano Parole Chiave: SLA, Genetica Molecolare, Consulenza Genetica Introduzione La Sclerosi Laterale Amiotrofica (SLA) è una patologia neurodegenerativa, propria dell età adulta, caratterizzata dalla degenerazione dei motoneuroni con conseguente paralisi progressiva della muscolatura scheletrica e morte entro 3/5 anni dall esordio. Incidenza annuale: / Prevalenza: 3-5/ Rapporto M:F = 2:1 Età media di esordio: 55/65 anni (5% < 30 anni) Sito esordio: 2/3 spinale (arti) FTD: 5-15% No cura 1/3 bulbare (linguaggio, deglutizione) Alsultan AA, et al. Degenerative Neurological and Neuromuscular Disease 2016;6: %: forma sporadica (SALS) 5-10%: forma familiare (FALS) SOD1, FUS, TARDBP e C9ORF72 sono i geni più frequentemente mutati e spiegano circa il 60% dei casi FALS e il 15% dei casi SALS.

2 SLA = Malattia Complessa Materiali e Metodi 500 pazienti consecutivi SLA italiani (7% FALS e 93% SALS) Diagnosi di SLA secondo criteri El Escorial Percorso di counselling genetico: fase pre- e post-test Estrazione DNA da sangue periferico QIAcube (QIAGEN) Controllo qualità DNA: rapporto λ260/ λ280 + elettroforesi gel agarosio SOD1 - TARDBP - FUS Sequenziamento Diretto C9ORF72 2 metodiche per ciascun paziente Analisi della Lunghezza del Frammento RP-PCR FALS Mutazioni nel 65.7% dei casi Risultati: Analisi Genetica Mutazioni causative identificate nel 14% dei pazienti SLA Età media esordio: 52±10 anni Durata media malattia: 2.4 anni 1 paziente con doppia mutazione (C9ORF72 e Ala382Thr in TARDBP) SALS Mutazioni nel 10.5% dei casi Età media esordio: 57±11 anni Durata media malattia: 3 anni 2 pazienti con mutazione omz 1 paziente con mutazione de novo in FUS 1 paziente con doppia mutazione (C9ORF72 e Arg491Cys in FUS)

3 Risultati: Eterogeneità Fenotipica E stata osservata un ampia variabilità fenotipica (età d esordio, sede d esordio, velocità di progressione della malattia) sia inter- che intra-familiare. Tale variabilità può coinvolgere mutazioni in tutti i quattro geni analizzati. Risultati: Casi con Doppia Mutazione Probando: FALS, F, 44 AA, esordio arti superiori Probando: C9ORF72 + Ala382Thr in TARDBP Madre wt... padre??? Nessun sintomo Probando: SALS, F, 65 AA, esordio bulbare Probando: segni di demenza frontotemporale (FTD) C9ORF72 + Arg491Cys in FUS (mutazione nuova) Padre del probando: sola FTD wt wt Risultati: Origine Geografica dei Portatori SOD1 TARDBP FUS C9ORF72

4 Percorso di Counselling Multidisciplinare Il test genetico è sempre stato offerto nell ambito di un percorso classico di consulenza genetica, costituito da due fasi (pre- e post test) e dalla presenza del solo genetista. Questo è sicuramente un approccio corretto, ma, in seguito all esperienza fatta finora e ad una serie di fattori propri della patologia, si è sentita l esigenza di elaborare qualcosa di più integrato e specifico. Non dobbiamo infatti dimenticare che la SLA è una malattia complessa (e non monogenica) e, il fatto che sia invalidante ed incurabile spesso ha effetti psicologici devastanti sia sui pazienti che sui loro familiari. Inoltre ad oggi non esistono linee guida per la consulenza genetica, ma solo dei suggerimenti riportati da Chiò et al.(2014). Approccio Multidisciplinare offerto per ora a 63 pazienti J Neurol Neurosurg Psychiatry 2014;85: Dati preliminari ottenuti dai test psicologici (MQQL; CBA-H; IPQ; IES-R) ci dicono che complessivamente i pazienti rispondono bene al test genetico, indipendentemente dall esito (positivo o negativo).

5 Conclusioni Casistica analizzata: caratteristiche cliniche e frequenze di mutazione in accordo con i dati di letteratura Mutazione nel 14% dei casi SLA: FALS = 65.7% SALS = 10.5% Criticità: scarsa correlazione genotipo-fenotipo inter- e intra-familiare (4 geni) Grosse difficoltà per il genetista: non è in alcun modo possibile fare predizioni sul fenotipo clinico e sull evoluzione della malattia basandosi sulla mutazione identificata nel paziente!!! Identificazione di due casi con doppia mutazione Modello di Couselling Multidisciplinare: Risorsa importante per pazienti e familiari Condivisione/confronto nel team Organizzazione complessa Grazie a: