BILIRUBINA. Eme ossigenasi. Biliverdina reduttasi

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Erico Montanari
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1 BILIRUBINA Importante indicatore della malattia epatica Prodotto del catabolismo dell EME (80% emoglobine, 20% altre emoproteine) Pigmenti biliari: bilirubina (giallo), biliverdina (verde) Impartiscono il colore alla bile Eme ossigenasi Biliverdina reduttasi

2 Le globine sono proteine coniugate: hanno bisogno del ferro per legare REVERSIBILMENTE l O 2 Gruppo prostetico: composto legato permanentemente a una proteina e che partecipa alla sua funzione (esempio: l eme = PROTOPORFIRINA IX + FERRO) Porfirina

3 CONIUGAZIONE DELLA BILIRUBINA

BILIRUBINA Molecola scarsamente solubile Circola nel sangue associata all albumina (non-coniugata, indiretta) (non passa nel glomerulo) Nel fegato viene coniugata all acido glucuronico, diventa

4 BILIRUBINA Molecola scarsamente solubile Circola nel sangue associata all albumina (non-coniugata, indiretta) (non passa nel glomerulo) Nel fegato viene coniugata all acido glucuronico, diventa solubile (coniugata, diretta)(può passare nel glomerulo e nelle urine) Viene secreta con la bile Nell intestino viene trasformata dai batteri in urobilinogeno (incolore) L urobilinogeno va incontro a circolazione entero-epatica e viene eliminato con le urine Ossidato a stercobilina e urobilina nelle feci ed escreto

5 Bilirubinuria La bilirubina NON è normalmente presente nelle urine La sua presenza indica Eccesso del catabolismo dell eme Un ostacolo intraepatico o extraepatico al passaggio della bile Una interruzione della circolazione entero-epatica (vedi marcatori della malattia epatica) Emolisi Danno epatico ( epatiti virali, alcool, farmaci, avvelenamento da metalli pesanti) Ittero ostruttivo (calcoli, tumori vie biliari o pancreas, cirrosi epatica) Urine color marsala scuro Recentemente, considerato parametro poco utile per la previsione di danno epatico, ma aiuta a monitorarne la progressione

6 Urobilinogeno Normalmente presente nelle urine v.n. = 0,5-2 mg/dl Valori inferiori: malattia epatica Se più alto: cirrosi o epatite La sua misurazione si richiede per : Ittero (colore giallo della pelle e degli occhi) Nausea, vomito Urine scure Dolore e gonfiore dell addome Prurito Aumenta nelle urine a seguito di metabolismo alterato della bilirubina (circolazione enteroepatica alterata)

7 L'urobilinogeno può essere dosato nelle urine utilizzando il reagente aldeidico di Ehrlich (p-dimetilamminobenzaldeide) per reazione con l urobilinogeno produce un composto di colore rosso Intensità del colore proporzionale alla quantità di urobilinogeno presente

8 ANALISI DEL SEDIMENTO

14 Cilindri jalini Cilindri leucocitari

20 Può essere associato ad un CITOFLURIMETRO Può essere collegato ad un CITOMETRO A FLUSSO

21 CITOMETRIA A FLUSSO

22 PROTEINE PLASMATICHE ELETTROFORESI o PROTIDOGRAMMA fornisce informazioni sulla funzione epatica

24 Il plasma contiene più di 300 proteine diverse Tranne immunoglobuline e complemento sono di origine epatica Molte hanno un ruolo specifico Mantenimento della pressione osmotica colloidale (albumina) Trasporto (trasportatori di lipidi, ormoni, bilirubina, ferro) Difesa immunitaria Immunoglobuline Sistema del complemento Coagulazione e fibrinolisi Molte compaiono nel plasma a seguito di una condizione patologica Enzimi tissutali Marcatori tumorali

25 L analisi si effettua sul siero (assente il fibrinogeno, 4% delle proteine plasmatiche) L elettroforesi separa le proteine sieriche in modo quantitativo e qualitativo Identifica 6 diverse frazioni Albumina Alfa1 globuline Alfa 2 globuline Beta 1 globuline Beta 2 globuline Gamma globuline Per ottenere una stima migliore, è necessario applicare un metodo di riconoscimento immunologico, più specifico Poco utile, e pertanto obsoleta, la misurazione delle proteine totali

26 Tracciato di un elettroforesi sieroproteica A) Gel di agarosio B) Elettroforesi capillare C) Migrazione delle principali proteine sieriche Elettroforesi su membrana, colorazione con rosso Ponceau

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