Nuovi orizzonti dall innovazione tecnologica in laboratorio: la conta differenziale delle cellule

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Lisa Venturini
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Associazione Regionale Allevatori della Lombardia Via Kennedy, 30 Crema CR www.aral.

0373-897011 Associazione Regionale Allevatori della Lombardia Nuovi orizzonti dall

1 Associazione Regionale Allevatori della Lombardia Via Kennedy, 30 Crema CR Tel Associazione Regionale Allevatori della Lombardia Nuovi orizzonti dall innovazione tecnologica in laboratorio: la conta differenziale delle cellule RELATORE : Diego Vairani Responsabile settore latte Laboratorio A.R.A.L.

2 ARAL Svolge funzioni tecniche ed operative per il miglioramento del settore agrozootecnico; Rappresenta i propri soci nei diversi ambiti regionali e nazionali e ne coordina le attività; Promuove, gestisce ed effettua servizi di assistenza tecnica per gli allevatori/caseifici; Sostiene la ricerca, coordina ed organizza attività di interesse per la comunità zootecnica; Effettua prove per i settori lattiero-caseario e agroalimentare;

3 Il nostro Laboratorio Controlli Funzionali Latte qualità Microbiologia Agroalimentare

4 Latte qualità Ci occupiamo della determinazione del contenuto di grasso, proteine, cellule somatiche, carica batterica totale, sostanze inibenti, numero di spore di clostridi (Legge Regionale 17 del 13/06/76 Regione Lombardia, ai fini del pagamento del latte secondo qualità)

5 Controlli Funzionali Ci occupiamo della determinazione dei parametri chimici del latte - contenuto percentuale di grasso e proteine, lattosio e numero di cellule somatiche, come richiesto dal Regolamento dei Controlli funzionali (DM del 24/05/1967 e successive modifiche)

6 Controlli Funzionali Rappresenta il principale servizio offerto dall ARAL alle APA della Lombardia e stima un numero di campioni analizzati pari a circa campioni/anno.

8 Capacità di svolgere la Professionalità nostra attività con Competenza ed efficienza

9 Organizzazione Logistica

10 ORGANIZZAZIONE-LOGISTICA - SINERGIA: Tecnici, controllori e Laboratorio collaborano a servizio degli allevatori. Importante che ci sia un filo che unisce sempre chi opera in stalla e chi lavora in laboratorio o in ufficio; - DISPONIBILITA : laboratorio lavora dalle ore 6:00 alle ore 20:00 con orario continuato (due turni di lavoro); - RUOLI: tutti concorrono per garantire un servizio di eccellenza: controllori, tecnici, autisti, analisti, addetti di laboratorio, informatici e impiegati;

ORGANIZZAZIONE-LOGISTICA - TRACCIABILITA : dal prelievo al trasporto, dall accettazione allo stoccaggio, dall analisi all emissione del Rapporto Prova.

11 ORGANIZZAZIONE-LOGISTICA - TRACCIABILITA : dal prelievo al trasporto, dall accettazione allo stoccaggio, dall analisi all emissione del Rapporto Prova. Tutto il processo è tracciato grazie anche all utilizzo dei codici a barre e dei software utilizzati (alcuni creati ad hoc da A.R.A.L.); - PRESENZA: siamo presenti in tutta Regione Lombardia grazie ad una rete di recapiti e ai nostri 5 furgoni che ritirano i campioni ogni giorno;

12 ORGANIZZAZIONE-LOGISTICA Punti in verde, sedi provinciali e recapiti. Punti in blu, caseifici. Punti in rosso, IZS, Università, CNR.

13 Lavoro

14 Investimenti Tecnologia

15 Come eravamo...

16 Cosa offrivamo ai nostri clienti? GRASSO PROTENIE LATTOSIO CELLULE SOMATICHE

17 Come siamo oggi...

18 NUOVA TECNOLOGIA : VELOCITA NELL ANALISI 500 CAMPIONI/ORA

19 NUOVA TECNOLOGIA : ANALISI PIU ACCURATE

20 NUOVA TECNOLOGIA : ANALISI DI NUOVI PARAMETRI : Caseine - Progetto BRUCA avviato ad ottobre milioni di campioni raccolti e analizzati in tre anni - Parametro utile per la selezione e per il pagamento della qualità del latte

21 NUOVA TECNOLOGIA : ANALISI DI NUOVI PARAMETRI : Acidi Grassi - Progetto LATTOMEGA: Acidi grassi nel latte, prospettive di miglioramento genetico nelle bovine - 2 milioni di campioni raccolti e analizzati in tre anni - Grazie al progetto abbiamo dimostrato la possibilità di effettuare selezione per caratteri presenti naturalmente nel latte tra i quali gli ACIDI GRASSI

22 NUOVA TECNOLOGIA : ANALISI DI NUOVI PARAMETRI : BHBA (Beta idrossibutirrato) acetone - Progetto avviato nel 2013 in sinergia con i nostri tecnici - 2 milioni di campioni raccolti e analizzati in tre anni - Parametro utile per un indicazione statistica del problema chetosi presente negli allevamenti

23 NUOVA TECNOLOGIA : ANALISI DI NUOVI PARAMETRI Valorizzazione dei Controlli Funzionali

24 Come saremo... CombiFoss TM 7

25 CombiFoss TM 7 La settima generazione di CombiFoss TM Uno strumento nuovo che ci offre l opportunità di analizzare simultaneamente le cellule somatiche totali e differenziali

26 CombiFoss TM 7

27 CombiFoss TM 7 Sostituite camere e pompe Rinsing e Sheat con un nuovo sistema

28 CombiFoss TM 7 Circuito idraulico riprogettato in funzione di una minor manutenzione

29 CombiFoss TM 7 Nuova unità di incubazione (1 minuto)

30 e di una nuova soluzione tampone CombiFoss TM 7 Sviluppata una nuova chimica per colorare le cellule con l utilizzo dell arancio di acridina

31 CombiFoss TM 7 Nuova unità di conteggio a sorgente laser e 3 detector per la conta differenziale

Test 07 500 DHI samples 12000 10000 R² = 1 8000

39 Test DHI samples R² =

40 conteggi da 0 a 100 conteggi da 100 a FOM 5000 FOM 7DC FOM 5000 FOM 7DC conteggi da 200 a 300 conteggi da 300 a FOM 5000 FOM 7DC FOM 5000 FOM 7DC

41 Numero SENZACONSERVANTE AZIDIOL BRONYSOLV camp. BZ ARAL differenza BZ ARAL differenza BZ ARAL differenza

42 STD SVIZZERO LOW STD SVIZZE HIGH n BZ ARAL n BZ ARAL MEDIA MEDIA

MATERIALE AIA lotto RTCCS120717 lettura lettura lettura campione riferimento 1 2 3

43 MATERIALE AIA lotto RTCCS lettura lettura lettura campione riferimento A B C D E

45 Analisi cellule differenziali: n 2 Progetti su latte vaccino

46 PROGETTO ASCIUTTA SELETTIVA (da settembre 2017) Analisi cellule differenziali quattro quarti Aziende controllate da UNI MI (Prof. Zecconi)

47 PROGETTO ASCIUTTA SELETTIVA:

48 PROGETTO ASCIUTTA SELETTIVA: Prelievo 4X4, ritiro campioni presso la stalle, consegna campioni presso UNI MI per analisi batteriologica, ritiro campioni presso UNI MI, consegna campioni in ARAL per analisi cellule differenziali, invio dati al Prof. Zecconi, elaborazione dati.

49 PROGETTO ASCIUTTA SELETTIVA: - 11 Aziende Animali controllati - 4 prelievi dei quattro quarti per ciascun animale controllato

50 PROGETTO «ESITI CELLULE DIFFERENZIALI» Individuate n 4 Aziende lombarde ubicate a Como, Varese, Monza Brianza e Pavia (oltre i 100 capi) : analisi cellule totali e differenziali per 3 mesi, con controllo settimanale (Dott. Zanini)

52 Raccolta dati e costruzione database con dati qualitativi e riproduttivi

53 PROGETTO «ESITI CELLULE DIFFERENZIALI» DAL 2 SETTEMBRE AL 22 DICEMBRE 2017

54 NUMERI SIGNIFICATIVI: - 4 Aziende capi - Oltre 40 visite in stalla

55 - Raccolti dati produttivi, data parto, numero di lattazione, razza - Scopo della prova: verificare e interpretare gli esiti analitici secondo le indicazioni fornite dal costruttore (FOSS)

57 Indicatori sintetici sull andamento sanitario della mandria: Contenuto in cellule somatiche del latte di massa o dei diversi gruppi produttivi Percentuale di vacche con un contenuto di cellule somatiche inferiore a , Linear Score <4, cellule somatiche per ml al momento del CF, le cosiddette «Sane» (obiettivo 73% su tutta la mandria) Nuove Infezioni/indice dinamico (relativo agli ultimi due controlli funzionali utili): la percentuale delle Nuove Infezioni prende in considerazione le bovine presenti in entrambi i controlli e rappresenta la % di bovine che al primo controllo erano «sane» ed al controllo successivo presentano un contenuto di cellule somatiche maggiore del limite di La percentuale si calcola dividendo le nuove infette fratto le sane più le nuove infette (obiettivo 8%)

000 e Cellule Differenziali inferiore ai parametri indicati per i giorni di lattazione BARRA ROSSA: le

58 Il grafico riassume i controlli a scadenza settimanale, azienda A BARRA BLU: percentuale delle bovine «Sane», con contenuto di Cellule Somatiche totali inferiore a e Cellule Differenziali inferiore ai parametri indicati per i giorni di lattazione BARRA ROSSA: le bovine a «Rischio» che hanno un contenuto in cellule somatiche inferiore a ma con Cellule Differenziale maggiore dei parametri individuati.

Azienda B : interpretazione secondo modello di predizione Foss percentuale delle bovine «Sane», con contenuto di Cellule Somatiche totali inferiore a 200.

000 e Cellule Differenziali superiore ai parametri indicati percentuale delle bovine «trattabili», con contenuto di Cellule Somatiche totali superiore a 200.

59 Azienda B : interpretazione secondo modello di predizione Foss percentuale delle bovine «Sane», con contenuto di Cellule Somatiche totali inferiore a e Cellule Differenziali inferiore ai parametri indicati percentuale delle bovine «a rischio», con contenuto di Cellule Somatiche totali inferiore a e Cellule Differenziali superiore ai parametri indicati percentuale delle bovine «trattabili», con contenuto di Cellule Somatiche totali superiore a e Cellule Differenziali inferiore ai parametri indicati percentuale delle bovine «Infette», con contenuto di Cellule Somatiche totali superiore a e Cellule Differenziali superiore ai parametri indicati

CONSIDERAZIONI FINALI Con l utilizzo della conta differenziale cellule e

CF, si ha un indicazione della percentuale di bovine «Sane», in tempi stretti

meglio i dati di questo nuovo parametro: questo è emerso anche nel meeting

60 CONSIDERAZIONI FINALI Con l utilizzo della conta differenziale cellule e delle cellule somatiche si ha una fotografia di tutti i soggetti presenti al CF, si ha un indicazione della percentuale di bovine «Sane», in tempi stretti Diversi laboratori nel mondo stanno lavorando per poter interpretare al meglio i dati di questo nuovo parametro: questo è emerso anche nel meeting svolto il giorno 08 febbraio in Nuova Zelanda in occasione della Conferenza annuale ICAR

61 OBBIETTIVO ARAL (a breve termine) Offrire all allevatore non semplicemente un nuovo dato o un nuovo parametro ma dimostrare che il conteggio differenziale delle cellule può essere uno strumento diagnostico di grandissima utilità... CI ASPETTA ANCORA TANTO LAVORO DA FARE!

62 GRAZIE per l attenzione

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