Un Biomarcatore per lo Screening e la Diagnosi del Carcinoma Cervicale

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1 p16ink4a Un Biomarcatore per lo Screening e la Diagnosi del Carcinoma Cervicale 16 Corso Nazionale per Tecnici di Laboratorio Biomedico Riccione Pietro Fiorentino

2 Overview dell azienda mtm laboratories AG Heidelberg Fondata nel 1999 come distaccamento del Centro Tedesco per la Ricerca sul Cancro (DKFZ) Equipe prof. Zur Hausen (premio Nobel Medicina 2008) Azienda certificata Iso per lo sviluppo e la produzione di test diagnostici in-vitro (IVD) per la rivelazione precoce e la diagnosi del cancro Headquarter in Heidelberg, Germany, con filiali negli Stati Uniti, Parigi, Madrid e Milano 2 Westborough, MA

3 Overview dell azienda mtm laboratories é un azienda di prodotti diagnostici Focalizzata su test di diagnostica In-Vitro per lo screening e la diagnostica del cancro Questo ci ha permesso di ottenere : Marker Identification Marker Validation GMP/QSR Developm. Manufacturing Pivotal Trials Commercialization La certificazione ISO 9001 e 13485; Una presenza importante sul mercato europeo e statunitense 3

4 Patogenesi del CxCa 4

5 Marcatore ideale: CxCa Screening 5

6 Necessità Aumento della Sensibilità e Specificità Nello Screening e nel Management delle lesioni Accuratezza diagnostica Marcatore tumorale Risposta cellulare Indipendente dal genotipo Indipendente dall età della paziente Oggettivo, indipendente dall osservatore Necessità di un bio-marcatore Si tratta di tecnologie più accurate di quelle attuali nell identificazione di pazienti con una lesione di alto grado già conclamata 6

7 p16ink4a Un marcatore della risposta cellulare

8 p16ink4a Un bio-marcatore promettente p16ink4a, una proteina coinvolta nel controllo del ciclo cellulare L iper-espressione della p16ink4a può essere utilizzata come bio-marcatore per le lesioni pre-cancerose e cancerose della cervice Legame diretto tra l iper-espressione della p16ink4a ed il processo patogenetico della displasia cervicale Permette di misurare l attività cancerogena del Human Papilloma Viruses (HPV) a livello cellulare 8

9 Meccanismo Molecolare persistent HPV infection 9

10 Benefici della p16ink4a Misura la malattia invece del rischio Relativo alle cellule umane Indipendente dall età Indipendente da tipo virale ad alto rischio (HR-HPV) Un marcatore sensibile e specifico per la malattia esistente Indica la PRESENZA della malattia, invece di indicare il rischio di sviluppare la malattia nel tempo 10

11 CINtec p16ink4a Vs HC2 HPV CINtec Cytology Sens ASC-US LSIL 11 Spec hc2 HPV Sens Spec CIN % 63.2% 90.1% 37.8% CIN % 58.6% 88.9% 35.3% CIN % 37.3% 95.7% 18.5% CIN % 32.2% 95.9% 15.9% Studio Pan Europeo 2008

12 CINtec p16ink4a Vs ISH e PCR 12 CINtec p16 Cytology HR-HPV (ISH) HR-HPV (PCR) Sensitivity (%) Specificity (%) PPV (%) NPV (%) Fujii et al., Virchows Arch 2008, Vol

13 Applicazioni extra-gyn p16ink4a La nota correlazione con l infezione da HPV-HR la rende utile nella diagnostica di patologie di diverse sedi anatomiche. Varie segnalazioni in letteratura fanno riferimento all utilizzo della p16ink4a nello studio delle lesioni epiteliali pre-neoplastiche e neoplastiche, dell area testa - collo, della vescica,dello stesso carcinoma squamoso del cavo orale,delle alte vie respiratorie e della mammella. 13

14 Prodotti mtm

15 Prodotti CINtec 15

16 Prodotti CINtec Basati sulla proprietà del clone E6H4TM sviluppato in particolare per l applicazione citologica e istologica su tessuto cervicale Kits di immunoreazione con reagenti e procedure validate per fornire risultati consistenti di immunocolorazione GMP garantisce la produzione con affidabilità di ogni singolo lotto Marchio CE in Europa Classificato come Class 1 IVDs negli USA 16

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18 Kit CINtec Histology IHC Kit sviluppato per la rivelazione dell iper-espressione della p16ink4a nelle biopsie cervicali Validato per l applicazione su sezioni in paraffina, fissate in formalina Interpretazione in parallelo con i vetrini colorati in H&E 18

19 Kit CINtec Histology Immuno-reazione specifica fortemente diffusa della p16ink4a nelle lesioni cervicali displastiche CIN 1 19 CIN 2 CIN 3

20 p16ink4a IHC aumenta la riproducibilità della diagnosi delle lesioni cervicali e a riconoscere le lesioni CIN nascoste 25x 25x 400x 400x Diagnosi di consenso: nessuna lesione Lesione di alto grado individuata con la p16ink4a IHC 20

21 Kit CINtec Histology Più di 50 pubblicazioni scientifiche dimostrano: Una sensibilità virtuale del 100% per le lesioni CIN3 (Cervical Intraepithelial Neoplasia 3) e una specificità molto elevata per i casi negativi Aumento significativo della riproducibilità intra-osservatore e dell accuratezza diagnostica. Se utilizzata affiancata all H&E dopo la diagnosi iniziale 21

22 The negative predictive value of p16 to assess the Outcome of Cervical Intraepithelial Neoplasia 1 in the Uterine Cervix Int J Gynecol Pathol Jul; 26(3):

23 Kit CINtec Histology Kit CINtec Histology Dà un contributo affiancato all H&E nell interpretazioni di casi difficili quali: Metaplasia atipica immatura CIN Casi ghiandolari Casi di HR-HPV Scarse atipie su margini di resezione chirurgica 23

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25 Kit CINtec Cytology Applicazione dei criteri morfologici sulle cellule immuno-reattive Displasia lieve 25 Displasia grave

26 Kit CINtec Cytology Migliora la capacità di identificare le cellule displastiche Compatibile con gli strisci convenzionali e i preparati di citologia in fase liquida Striscio convenzionale 26 Citologia in fase liquida

27 Kit CINtec Cytology Numerose pubblicazioni in riviste internazionali e studi di valutazione interna hanno dimostrato il valore aggiunto del test applicato al risultato iniziale del Pap Test: Sensibilità paragonabile al test di tipizzazione dell HPV per l identificazione delle lesioni displastiche di alto grado Elevata specificità nell individuazionie di pazienti negative Potenziale utilizzo per il triage, sia di casi equivoci (ASCUS) che di lesioni di basso grado (LSIL) 27

28 Kit CINtec Cytology Kit CINtec Cytology Insieme al Pap Test, rappresenta un utile supporto per l interpretazione di casi difficili: 28 Citologia ripetuta Triage delle ASC-US Triage delle LSIL Atipie ghiandolari

29 Riassunto Perchè usare CINtec p16ink4a -) Test altamente Specifico -) Facilità d uso e alta riproducibilità -) Costi contenuti -) Consulenza e training morfologico 29