Toxoplasma gondii. Giovanni Di Bonaventura, BSc, PhD Dipartimento di Scienze Biomediche Università G. d Annunzio Chieti

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Raffaela Visconti
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1 Toxoplasma gondii Giovanni Di Bonaventura, BSc, PhD Dipartimento di Scienze Biomediche Università G. d Annunzio Chieti

2 Toxoplasmosi - Epidemiologia Toxoplasma gondii (Phylum: Apicomplexa, Classe: Sporozoea) unica specie del genere in grado di parassitare gran parte delle specie a sangue caldo, incluso l uomo, causando la toxoplasmosi. Dati di prevalenza sierologica indicano che la toxoplasmosi è una delle infezioni umane più comuni nel mondo: Alta prevalenza in Francia (consumo di carne cruda o poco cotta) ed in America Centrale (randagismo, clima favorevole alla sopravvivenza di oocisti). In Italia, la sieroprevalenza (40-80%) aumenta con l età indicando la continuità del rischio di contagio. Il gatto (Felidae) è l unico ospite definitivo per gli stadi sessuali del parassita e rappresenta quindi il principale serbatoio di infezione. L uomo, sede della riproduzione asessuata, è uno dei possibili (roditori, uccelli, suini) ospiti intermedi.

Dati di prevalenza sierologica indicano che la toxoplasmosi è una delle infezioni umane più comuni nel mondo: Alta prevalenza in Francia (consumo di carne cruda o poco cotta) ed in America Centrale

3 Toxoplasmosi - Epidemiologia T. gondii viene trasmesso all uomo generalmente tramite tre modalità: 1) ingestione di carne infetta (soprattutto di maiale o montone) cruda o non adeguatamente cotta o carne venuta a contatto con carne infetta; 2) ingestione accidentale di oocisti derivanti da feci di gatto o dalla lettiera o dal terreno (autoinoculazione da attività di giardinaggio, frutta o verdura non lavate, acqua non filtrata); 3) trasmissione materno-fetale per via transplacentare (o trasfusionale, rara).

montone) cruda o non adeguatamente cotta o carne venuta a contatto con carne infetta; 2) ingestione accidentale di oocisti

4 Ciclo vitale

5 Ciclo vitale indiretto (gatto-uomo) Trasmissione materno-fetale Trasmissione trasfusionale PREMUNIZIONE Tachizoiti (pseudocisti) (organi S.R.E.) Bradizoiti (cisti) (m. scheletrici, SNC, occhio) Merozoiti (FASE PARASSITEMICA) Sporocisti (GATTO) Acidità gastrica Sporozoiti ENDODUOGENESI ASESSUATA (epitelio intestinale) UOMO

scheletrici, SNC, occhio) Merozoiti (FASE PARASSITEMICA) Sporocisti (GATTO)

6 Tachizoite (pseudocisti) Forma infettante intracellulare (vacuolo parassitoforo) Caratteristica della fase acuta (parassitemica) Responsabile della trasmissione materno-fetale e trasfusionale Ultrastruttura: Semilunare, 6-8 µm Monostrato citoscheletrico microtubulare interrotto a livello dell anello polare Complesso apicale (Apicomplexa): conoide micronemi, ropthries (fz. lisosomiale)

Ultrastruttura: Semilunare, 6-8 µm Monostrato citoscheletrico microtubulare interrotto a livello

7 Bradizoite (cisti) A localizzazione cardiaca, cerebrale, oculare (retinica), muscolare, scheletrica Caratteristica della fase cronica A lentissima replicazione Contenuti in un vacuolo parassitoforo a doppia membrana: m. interna (frastagliata, dal parassita) m. esterna (regolare, dalla cellula ospite)

lentissima replicazione Contenuti in un vacuolo parassitoforo a doppia

8 Patogenesi sindromi cliniche Fase acuta: tachizoiti in pseudocisti (leucociti) Generalmente asintomatica, raramente (10-20%) si presenta come linfoadenite febbrile benigna selflimited (sindrome mononucleosica-simile) Efficace risposta immune Fase cronica: bradizoiti in cisti (cuore, cervello, occhio, polmone, muscolo, scheletro) In caso di immunocompromissione (HIV, iatrogena): riattivazione in sede perivascolare (ascessi cerebrali, corioretinite necrotica, manifestazioni cliniche della toxoplasmosi congenita) meningo-encefalite in soggetti HIV+

cisti (cuore, cervello, occhio, polmone, muscolo, scheletro) In caso di immunocompromissione (HIV, iatrogena): riattivazione in sede

9 Toxoplasmosi congenita Infezione transplacentare: nel primo trimestre: più grave (ma rara perché abortiva) nel secondo e terzo trimestre: subclinica (ma frequente, 90%) Tetrade di Sabin calcificazioni endocraniche idrocefalo corioretinite (anche tardiva, conseguente cecità) convulsioni

subclinica (ma frequente, 90%) Tetrade di Sabin calcificazioni

10 Diagnosi di laboratorio Osservazione microscopica diretta del parassita nel campione (lavaggio broncoalveolare, biopsia linfonodale, muscolo). Scarsa sensibilità. Prova biologica in cavia (topo): inoculazione intraperitoneale di sangue od altri liquidi corporei. Il topo viene valutato per la presenza di T. gondii nel liquido peritoneale dopo 6-10 giorni dall inoculazione; in caso di negatività, esame sierologico (sangue da coda o cuore) dopo 4 6 settimane dall inoculazione. Analisi molecolare del genoma tramite PCR, soprattutto nella diagnosi di infezioni connatali in utero. Sierologia: Diretta (test tintoriale - dye-test - di Sabin-Feldman), agglutinazione diretta) od indiretta (ELISA, agglutinazione al lattice, agglutinazione indiretta, IFA, fissazione del Complemento) IgM, IgA in diagnosi fetale (da funicolocentesi)

gondii nel liquido peritoneale dopo 6-10 giorni dall inoculazione; in caso di negatività, esame sierologico (sangue da coda o cuore) dopo 4 6 settimane dall inoculazione.

11 Diagnosi sierologica di Toxo Inattendibile in pts immunodeficienti (AIDS) (diagnosi presuntiva) possibile infezione disseminata in assenza di titolo anticorpale Generalmente, IgM e IgG aumentano simultaneamente IgG, persiste per anni IgM, non evidenziabile dopo il trattamento Titoli elevati di IgM sono indicativi per una recente infezione in un soggetto immunocompetente Negatività per IgG o IgM esclude la diagnosi entrambe debbono essere + in fase acuta In caso di positività per IgG, allora determinare IgM IgM+ test conferma toxoplasmosi acuta o infezione in corso (la titolazione di IgM ha bassa specificità; inoltre, IgM possono persistere per oltre 1 anno)

recente infezione in un soggetto immunocompetente Negatività per IgG o IgM esclude la diagnosi entrambe debbono essere + in fase acuta In caso di positività per IgG,

12 Diagnosi sierologica di Toxo

13 Diagnosi microscopica A: Giemsa di liquido peritoneale da cavia. Tachizoiti di T. gondii, a forma semilunare e dotati di un prominente nucleo in sede centrale. A B, C: tessuto cerebrale colorato con ematossilinaeosina. Cisti di T. gondii contenente numerosi bradizoiti. B C

gondii, a forma semilunare e dotati di un prominente nucleo in sede

14 Terapia Soggetti immunocompetenti (non in gestazione): Non necessaria (forme self-limited entro alcune settimane) A scopo profilattico per corioretinite in ragazzi. Donne in gestazione o soggetti immunocompromessi: pirimetamina + sulfamidico spiramicina, in caso di sieroconversione durante la gravidanza Neonati: Trattare immediatamente con pirimetamina per prevenire o ridurre l insorgenza del quadro clinico

Donne in gestazione o soggetti immunocompromessi: pirimetamina + sulfamidico spiramicina, in caso di

15 Prevenzione Prevenire l infezione da oocisti secrete dai gatti: lavare la frutta e gli ortaggi prima del consumo prevenire il contatto di mosche e scarafaggi con il cibo disinfettare adeguatamente la lettiera del gatto utilizzare guanti durante il giardinaggio Prevenire l infezione da carni, uova e latte cottura adeguata; non bere latte non pastorizzato non toccare le mucosa di bocca o occhi mentre si maneggia la carne cruda Prevenire l infezione al feto screening per identificare le donne a rischio screening neonatale (ecografia, funicolo- ed amniocentesi) Prevenire l infezione da trasfusione di sangue o da trapianto d organo non prelevare prodotti ematici da donatori sieropositivi per riceventi sieronegativi.

pastorizzato non toccare le mucosa di bocca o occhi mentre si maneggia la carne cruda Prevenire l infezione al feto screening per identificare le donne a rischio screening

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