Agoaspirato midollare e Biopsia osteomidollare. Carla Giordano
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- Gioacchino Giannini
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1 Agoaspirato midollare e Biopsia osteomidollare Carla Giordano
2 EMOPOIESI III settimana di sviluppo embrionale: sacco vitellino III mese di sviluppo : alcune cellule emopoietiche migrano nel fegato V mese di sviluppo fetale: inizia l ematopoiesi nel midollo osseo Alla nascita il midollo osseo è la principale sede dell ematopoiesi
3 Nell adulto normale il midollo emopoietio è quello localizzato a livello di vertebre, costole, sterno, cranio, pelvi, epifisi del femore e dell omero. Nelle altre ossa il midollo emopoietico è sostituito da cellule adipose.
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5 Microambiente midollare Componenti CELLULE Fibroblasti e miofibroblasti Adipociti Endoteli Macrofagi T-linfociti Osteoblasti Cellule endostali PROTEINE Collagene (reticolo) Fibronectina Laminina Proteoglicani CITOCHINE Fattori di crescita Proteine inibitorie Funzioni Impalcatura midollare, riserve nutritizie, contatto con l emopoiesi, produzione di proteine regolatorie, regolazione del traffico midollare, osteogenesi Contatto intercellulare, contatto tra cellule e proteine regolatorie, homing cellulare Proliferazione, differenziazione, feed-back negativo dell emopoiesi
6 Agoaspirato midollare L agoaspirato midollare è il prelievo di ml di sangue midollare tramite una siringa, inserita su idoneo ago. Il sangue può essere strisciato su un vetrino e colorato per un analisi citologica. Le cellule prelevate tramite agoaspirato possono essere utilizzate anche per analisi citofluorimetriche (esame immunofenotipico), citogenetiche (studio del cariotipo) e di biologia molecolare (estrazione di acidi nucleici e PCR).
7 Le sedi di esecuzione dell aspirato midollare sono: 1) Le creste iliache posteriori 2) Le creste iliache anteriori 3) Il corpo dello sterno (II spazio intercostale)
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10 Quali informazioni dall agoaspirato midollare? Cellularità Polimorfismo (popolazioni cellulari abnormi? Blasti?) Numero di megacariociti Rapporto granulo/eritrocitario Mielogramma
11 Agoaspirato midollare normale: notare il pleomorfismo cellulare
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14 Valori percentuali delle cellule del sangue midollare : mielogramma
15 Aspirato midollare. Indicazioni L esecuzione dell agoaspirato midollare presuppone che il paziente sia stato studiato clinicamente e abbia eseguito precedentemente un esame emocromocitometrico. Lo scopo dell agoaspirato è quello di valutare se le alterazioni riscontrate nel sangue periferico abbiano un eziologia primitiva midollare (tutte le condizioni in cui si sospetti una compromissione primitiva o secondaria dell emopoiesi)
16 Principali indicazioni all esecuzione di un agoaspirato midollare 1) grave anemia con reticolocitopenia 2) grave leucopenia e piastrinopenia 3) grave leucocitosi con o senza blastosi periferica 4) componente proteica monoclonale
17 Agoaspirato midollare normale Leucemia mieloide acuta: notare le cellule blastiche tutte uguali, con ampio rapporto nucleo/citoplasma
18 Agoaspirato midollare normale Leucemia mieloide cronica: elementi mieloidi in diverso stadio di maturazione
19 Eritroblasti, notare il citoplasma intensamente basofilo Agoaspirato midollare normale Policitemia vera
20 Agoaspirato midollare normale Mieloma multiplo: midollo caratterizzato da un elevata percentuale di plasmacellule
21 Limiti dell agoaspirato midollare L agoaspirato midollare non da informazioni circa il microambiente midollare e i rapporti topografici tra cellule emopoietiche e microambiente stesso. Aplasia midollare Fibrosi midollare Marcata ipercellularità midollare Leucemia a cellule capellute Punctio sicca o dry tap
22 Biopsia osteo-midollare Prelievo di un tassello di tessuto osseo (per essere significativa almeno 2 cm) per la valutazione del tessuto midollare e adiposo.
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24 Inclusione in resina Inclusione in paraffina previa decalcificazione
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26 Isola eritroide con, al centro, un macrofago
27 Quali informazioni dalla BOM? 1. Cellularità midollare 2. Modificazioni quali-quantitative dell emopoiesi 3. Modificazioni della topografia midollare 4. Presenza di popolazioni cellulari abnormi 5. Alterazioni del microambiente stromale
28 Quali informazioni dalla BOM? 1. Cellularità midollare
29 Cellularità midollare Il rapporto tra tessuto adiposo/cellule emopoietiche varia in funzione dell età: 1 decennio 1:4 2 decennio 1:3 3 decennio 1:1 7 decennio 2:1
30 Donna, 36 anni: aplasia midollare
31 Uomo, 82 anni: biopsia midollare normale
32 Leucemia mieloide acuta: il midollo emopoietico è sostituitoda un tappeto di cellule blastiche
33 Leucemia mieloide acuta: notare l assenza di adipociti
34 Leucemia mieloide acuta Agobiopsia osteomidollare Agoaspirato midollare
35 Quali informazioni dalla BOM? 2. Modificazioni quali-quantitative dell emopoiesi. Valori normali nella BOM: Granulo-eritro 2:1; 3:1 Megacariociti 1% circa Plasmacellule 5-10%, perivasali Linfociti 5-20%; T/B= 4:1; CD4/CD8= 1:3 Noduli linfoidi 2-8% dei casi Sideroblasti 25-30% dei precursori eritroidi contengono 1-3 granuli di emosiderina
36 Mielodisplasia. Rapporto granulo-eritrocitario=1; macrocitosi; aumento dei megacariociti che appaiono displastici (pleomorfi e con nuclei privi di lobature)
37 Mielofibrosi idioptica Midollo iperplastico, con numerosi megacariociti abnormi (pleomorfi, multinucleati, nuclei perivi di lobature)
38 Linfoma follicolare Accumulo nodulare di piccoli linfociti in sede peritrabecolare
39 Principali marcatori cellulari utilizzati nella BOM Serie rossa Emoglobina A, Glicoforina A e C Serie granulopoietica Mieloperossidasi (MPO) Serie piastrinopoietica Fattore VIII, CD61 Serie monocito-macrofagica CD68/PGM1, lisozima Plasmacellule CD38, CD138, catene k/λ, CD56 Linfociti B CD20, CD79a, PAX5 Linfociti T CD3, CD4, CD8 Mastociti Triptasi Blasti: CD34 Metastasi: antigeni tumorali
40 Leucemia mieloide acuta. Il midollo emopoietico è sostituito da un tappeto di cellule blastiche che risultano positive alla reazione istoenzimatica per la mieloperossidasi
41 Mieloma multiplo Il 60% delle cellule risulta positivo alla reazione immunoistochimica per il CD138
42 Quali informazioni dalla BOM? 3.Modificazioni della topografia midollare: anomalie rispetto alle fisiologiche localizzazioni delle serie midollari. Serie granulocitaria Isola eritroide con macrofago centrale capillare Megacariocita Trabecola ossea Plasmacellule
43 Quali informazioni dalla BOM? 4. Alterazioni del microambiente fibrosi stromale osteosclerosi
44 Quali informazioni dalla BOM? 5. Presenza di popolazioni cellulari abnormi Metastasi di carcinoma duttale della mammella
45 Principali indicazioni alla biopsia osteomidollare dry tap midollare o aspirato midollare con cellularità ridotta valutazione della fibrosi midollare in corso di malattie mieloproliferative croniche stadiazione di malattia linfoproliferativa coinvolgimento midollare in corso di neoplasie
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