Le Cellule Staminali

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1 Le Cellule Staminali nell Insufficienza Epatica Pietro Andreone Dipartimento di Medicina Clinica Università di Bologna Meeting Unisalute Le Cellule Staminali e il loro impiego attuale nella clinica Bologna, 30 Settembre 2011

2 Sopravvivenza della Cirrosi Epatica D Amico G et al, J Hepatol 2006

3 Mortalità per Insufficienza Epatica ed Epatocarcinoma in Italia Incidenza: 32/ abitanti decessi per anno 55 decessi al giorno Dati ISTAT

4 Terapia dell Insufficienza Epatica Opzione standard: Trapianto di Fegato In fase di sviluppo: Supporti Bioartificiali In fase di ricerca: Trapianto Cellulare Cellule Staminali

5 Terapia dell Insufficienza Epatica Trapianto di Fegato disponibilità limitata rigetto complicanze chirurgiche infezioni tumori

6 Trapianto di Fegato in Italia Dati Centro Nazionale Trapianti

7 Terapia dell Insufficienza Epatica Supporti Bioartificiali MARS Prometeus BAL

8 Terapia dell Insufficienza Epatica Terapia Cellulare (Trapianto di Epatociti) meno invasiva scarsa o nulla immunosoppressione indicazioni limitate malattie genetiche/metaboliche insufficienza epatica acuta

9 Terapia dell Insufficienza Epatica Cellule Staminali auto-rinnovamento elevata capacità proliferativa e differenziativa

10 Classificazione Potenza differenziativa + Totipotenti Pluripotenti Zigote Blastocisti Embrionali - Multipotenti Progenitori Feto e Adulto

11 Cellule Staminali Embrionali Ottenute da: Aborti prima del 3 trimestre Embrioni soprannumerari Principali problemi all utilizzo: Etici Comportamento biologico poco prevedibile Ottime candidate per i supporti bioartificiali Limitato utilizzo in vivo per il rischio di comparsa di teratomi

12 Cellule Staminali residenti Fausto N. Liver Regeneration. Hepatology 2006

13 Cellule Ovali o Progenitori Epatici Diffondono dai Canali di Hering negli spazi portali Proliferano quando gli epatociti sono inibiti Marcatori di superficie: CK7,14,19 (biliociti) CK8, CK18 (epatociti) c-kit,cd34 (staminali midollari) OV6 AFP GGT Canali di Hering Alison MR. Hepatic Stem Cells: from inside and outside the liver? Cell Prolif 2004

14 Tessuto epatico sano Marcatura per citocheratina 7

15 Cirrosi Epatica V Marcatura per citocheratina 7

16 Nel danno cronico le cellule parenchimali sono inibite progressiva riduzione dell efficienza replicativa per accorciamento dei telomeri fibrosi HCC cirrosi

17 Science 1999 Nature 2000 NEJM 2002

18 Cellule Staminali Midollari XY Cellule Y+; CK18+ XX HCV recipient Cellule di origine midollare nel fegato trapiantato: Epatociti (0.5-1%) Miofibroblasti (60%) Macrofagi (30%) Cellule endoteliali (?) Transplanted Female Liver Forbes et al. Gastroenterology 2004

19

20 Reinfusione di Cellule Staminali Midollari nella Cirrosi 14 studi non controllati pubblicati tra il 2006 e 2011 Solo 2 con più di 10 pazienti 130 pazienti trattati La maggiorparte impiegano cellule staminali midollari CD34+ raccolte dopo GCSF e leucoaferesi di cellule la dose più frequentemente utilizzata Via di reinfusione: di solito vena porta o arteria epatica

21 Lo Studio di Bologna Intrahepatic Reinfusion of CD133+ Stem Cells in Cirrhotic Patients (Cirrhosis133) This study is currently recruiting participants Verified by University of Bologna, October 2010 First Received: December 2, 2009 Last Updated: October 28, 2010 History of Changes Sponsor: University of Bologna Information provided by: University of Bologna ClinicalTrials.gov Identifier: NCT Phase I/II Study

22 Lo Studio di Bologna Mobilization phase Reinfusion phase G-CSF CD133+ selection and G-CSF 15 µg/kg/d purification in Milan 5 µg/kg/d 1 week 4-5 days 4 weeks 3 days follow-up 3 months follow up Screening Leukoapheresis Out-patient Injection into the hepatic artery In-patient

23 Lo Studio di Bologna 12 pazienti consecutivi, MELD No Epatocarcinoma e Trombosi Portale Progressivo aumento delle dosi di cellule CD133+ reinfuse (ogni 3 pazienti) Dose iniziale cellule/kg Dose massima cellule/kg

24 Lo Studio di Bologna: risultati preliminari Patient Ethiology Mobilization Apheresis N. of CD133 + isolated Intrahepatic reinfusion Cohort (N. of CD133 + reinfused) 01 viral yes yes yes I (50.000/Kg) 02 alcoholic yes yes yes I (50.000/Kg) 03 viral yes yes yes I (50.000/Kg) 04 viral no no / / II ( /Kg) 05 viral yes yes no II ( /Kg) 06 viral yes yes yes II ( /Kg) 07 viral yes Yes yes II ( /Kg)

25 Lo Studio di Bologna: risultati preliminari MELD Mean M GCSF Reinfusion

26 Al momento le capacità rigenerative di Prometeo erano superiori!

27 Dept. of Medicine University of Bologna Stefania Lorenzini Paolo Caraceni Lucia Brodosi Massimo Domenicali Stefano Gitto Mauro Bernardi Francesco Losinno Cristina Rossi Andrea Casadei Romeo Canini Dept. Of Radiology University of Bologna MRC, Centre for Inflammation Research The Queen s Medical Research Institute University of Edinburgh, UK Stuart J Forbes John P Iredale Institute of Hematology L & A Seràgnoli University of Bologna Maria Rosa Motta Lucia Catani Michele Baccarani Immunohematology and Blood Bank Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna Valeria Giudice Pasquale Paolo Pagliaro Cell Factory, Fondazione IRCCS Ca Granda Ospedale Maggiore, Policlinico Milano Rosaria Giordano Tiziana Montemurro Lorenza Lazzari

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