Revisione: 05 Data emissione: 21/07/2015 GUIDA AL CAMPIONAMENTO

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1 Codice interno Allegato 2 alla P018 Revisione: 05 ata emissione: 21/07/2015 GUIA AL CAMPIONAMENTO REAZIONE T VERIFICA RSQ APPROVAZIONE T Pozzoli Massimiliano Bianchi Mascia Pozzoli Massimiliano LISTA ELLE REVISIONI N ATA MOTIVO ELLA REVISIONE 00 10/06/2008 Prima emissione 01 15/06/2010 Modifica layout 02 08/06/2012 Modalità campionamento ricerca Legionella 03 10/12/2012 Modifica paragrafo E (campionamento acqua per Legionella) 04 14/11/2014 Riesame e aggiornamento 05 21/07/2015 Revisione tabella fanghi terreni e rifiuti Il presente allegato, a disposizione del laboratorio e fornito al cliente su esplicita richiesta, vuole essere una linea guida base per tutto quel personale che abbia le competenze tecniche per l esecuzione dei campionamenti e rappresenta un sunto della procedura adottata dal laboratorio. Nella prima parte sono indicati i contenitori da utilizzare e i quantitativi da prelevare in relazione alle prove da eseguire e alle matrici da sottoporre ad analisi, nella seconda parte sono dettagliate le operazioni necessarie per l esecuzione corretta del campionamento. Su richiesta del cliente il laboratorio mette a disposizione i contenitori necessari; si invita a contattare il laboratorio per indicazioni chiare circa i contenitori più appropriati da utilizzare per il campionamento qualora quest ultimi non vengano direttamente forniti dal laboratorio. Per eventuali prove non previste nel presente allegato o comunque per richieste e chiarimenti in merito alle operazioni di campionamento si invitano i clienti a contattare il laboratorio. Per ogni chiarimento in merito al campionamento potete contattare il laboratorio al numero CONTENITORI A UTILIZZARE Acque destinate al consumo umano, acque naturali, acque di piscina Prova Tipo di Volume Modalità di camp. Parametri microbiologici (Batteri coliformi, Escherichiacoli, Enterococchi intestinali, Cariche batteriche) Pseudomonas Stafilococchi Salmonella Legionella Parametri chimici e chimico - fisici (Anioni, Cloro, Azoto ammoniacale Colore, Conducibilità, ph, Odore, Solidi, Torbidità,) Parametri chimici e chimico - fisici Ossidabilità Contenitori in vetro o PET completamente riempiti 500 ml (100ml per parametro) 500 ml (250ml per parametro) A A 1000 ml A ml E Lasciare almeno 2 cm di aria nel ml B Contenitori in vetro scuro 250 ml B Specie metalliche Contenitori in PET 500 ml B Idrocarburi totali Contenitore in vetro 2000 ml B Idrocarburi policiclici aromatici IPA Contenitore in vetro scuro 2000 ml B Antiparassitari Contenitore in vetro 2000 ml B Policlorobifenili PCB Contenitore in vetro 2000 ml B Sostanze organiche volatili Acque di scarico Contenitore in vetro con tappo a smeriglio 250 ml B Pagina 1 di 5

2 Prova Tipo di Volume Modalità di camp. Parametri microbiologici (Batteri coliformi, Escherichiacoli, Enterococchi intestinali, Cariche batteriche) Test di tossicità Parametri fisici e chimico-fisici (Colore, Conducibilità, ph, Solidi) Parametri chimici (Anioni, Fenoli, Aldeidi, Tensioattivi, Cianuri, Solfuri, Solfiti, Cloro, CO, Azoto Totale, Azoto Organico, N-NO 2, N-NO 3, Fosforo Totale) Contenitori sterili monouso o in vetro sterilizzati contenenti Contenitore in vetro o PET perfettamente pulito 500 ml A Lasciare almeno 2 cm di aria nel 1000 ml C Le analisi vengono effettuate solo nei giorni Martedì, Mercoledì e Giovedì: consegnare entro 16 ore dal campionamento. senza lasciare bolle Contenitore in vetro o PET 1000 ml C senza lasciare bolle BO Contenitori in PET 500 ml C senza lasciare bolle Specie metalliche Contenitori in PET 500 ml C Idrocarburi totali, grassi e oli Contenitore in vetro 1000 ml C Idrocarburi policiclici aromatici IPA Contenitore in vetro scuro 1000 ml C Antiparassitari Contenitore in vetro 1000 ml C Sostanze organiche volatili Contenitore in vetro con tappo a smeriglio 250 ml C senza lasciare bolle Fanghi, terreni, rifiuti Prova Tipo di Volume Modalità di camp. Classificazione rifiuti liquidi (Metalli, parametri chimico-fisici, sostanze organiche, anioni, sostanze organiche volatili) Classificazione rifiuti solidi (Metalli, parametri chimico-fisici, sostanze organiche, anioni, sostanze organiche volatili) Contenitori in PET o in vetro Contenitori in PET o in vetro 250 ml 250 g Rifiuti solidi, prove eluizione, Eluati Contenitori in vetro 500 g Aggregati C1 Contenitore in PET (Sacco) 5 Kg Aggregati C2-C3 Contenitore in PET (Sacco) 10 Kg Aggregati C4-C5 Contenitore in PET (Sacco) 2 Kg Fanghi Contenitore in PET o in vetro 250 g Terreni (Metalli, parametri chimico-fisici, sostanze organiche, anioni, prove di eluizione, sostanze organiche volatili) Contenitore in vetro 500 g Terreno (C<12 e BTEX) Contenitore in vetro 500 g Pagina 2 di 5

3 MOALITA I CAMPIONAMENTO. Eseguire sempre il campionamento di tipo B o C (per le analisi chimiche) prima, poi procedere con il tipo A / E (per analisi microbiologiche). Non introdurre nella stessa borsa acque calde e fredde. Registrare eventuali anomalie rilevate durante il campionamento e comunicarle al laboratorio in fase di consegna dei campioni. Modalità A PER ANALISI MICROBIOLOGICA ACQUA 1. Smontare eventuali parti in plastica (filtri, tubi, rompi getto,etc.). 2. Aprire il rubinetto e far scorrere l acqua per almeno 2 minuti 3. Chiudere il rubinetto e scaldarlo accuratamente per 30 secondi con flambatore 4. Riaprire il rubinetto e far scorrere l acqua per altri 30 secondi 5. Prelevare l acqua negli appositi contenitori sterili evitando che la parte interna del tappo il collo interno della bottiglia e l acqua stessa vengano a contatto con qualunque fonte di contaminazione 6. Nel caso di acque provenienti da bacini o vasche privi di rubinetto (piscine, laghi, fiumi, acque di scarico, etc.) campionare direttamente dalla vasca facendo attenzione a non contaminare il campione, possibilmente indossare guanti monouso. 7. Conservare il campione tra i 2-8 C. 8. Consegnare il campione al laboratorio entro e non oltre le 16 ore dal campionamento ed entro il mercoledì alle ore 17,00 Modalità B- PER ANALISI CHIMICA ACQUA ESTINATA ALCONSUMO UMANO, NATURALE E I PISCINA 1. Smontare eventuali parti in plastica (filtri, tubi, rompi getto,etc.). 2. Aprire il rubinetto e far scorrere l acqua per almeno 2 minuti Nel caso di acque provenienti da bacini o vasche privi di rubinetto (piscine, laghi, fiumi, acque di scarico, etc.) campionare direttamente dalla vasca 3. Risciacquare i contenitori con l acqua da campionare almeno due volte. 4. Prelevare l acqua negli appositi contenitori evitando che la parte interna del tappo il collo interno della bottiglia l acqua stessa vengano a contatto con qualunque fonte di contaminazione.riempire i contenitori completamente e comunque secondo le indicazioni di cui alla pag. 1 del presente allegato. 5. Conservare il campione tra i 2-8 C. 6. Consegnare il campione al laboratorio entro e non oltre le 16 ore dal campionamento e entro il giovedì alle ore 17,00. Modalità C PER ANALISI CHIMICA ACQUA I SCARICO 1. Riempire un da litri con l acqua da prelevare dopo averlo risciacquato almeno due volte attingendo direttamente dalla vasca o dal rubinetto. 2. Se è previsto un campionamento medio raccogliere ad intervalli regolari uguali volumi di acqua nel. 3. Agitare e trasferire le varie aliquote nel contenitori specifici sciacquati almeno due volte con l acqua da campionare evitando ogni tipo di contaminazione. 4. Conservare il campione tra i 2-8 C per BO tra 0-4 C 5. Consegnare il campione al laboratorio entro e non oltre le 16 ore dal campionamento e entro il giovedì alle ore 18,00. Modalità - PER TUTTE LE ANALISI I FANGHI RIFIUTI E TERRENI 1. Se l analisi è da condurre su un punto preciso prelevare direttamente il campione. 2. Nel caso di fusti, bidoni o cumuli effettuare un campionamento medio su più punti 3. Nel caso di analisi di terreni per la caratterizzazione di siti contaminati scartare in campo con l ausilio di un setaccio la frazione maggiore di 2 cm. 4. Riempire i contenitori appropriati seguendo gli accorgimenti di cui alla pag. 1 del presente documento evitando ogni tipo di contaminazione. Modalità E PER LA RICERCA I LEGIONELLA NELL ACQUA Il campionamento di acqua per la ricerca di Legionella può essere effettuato sul circuito dell acqua calda o su quello dell acqua fredda ed il prelievo può avvenire da rubinetto, doccia, serbatoio di accumulo o ricircolo. In tutti questi casi adottare la seguente procedura di campionamento: Pagina 3 di 5

4 - senza flambare e senza smontare parti meccaniche (es. bulbo doccia o rompi getto rubinetto), aprire il rubinetto (o la doccia) e far scorrere l acqua per secondi; - prelevare l acqua in apposito sterile evitando che la parte interna del tappo, il collo interno della bottiglia e l acqua stessa vengano a contatto con qualunque fonte di contaminazione, riempiendo il completamente senza lasciare spazio di testa; - aprire di nuovo il rubinetto e raccogliere altra acqua in un secondo per la misura della temperatura utilizzando un apposito termometro regolarmente tarato; - in presenza di impianto di clorazione effettuare anche la misura del cloro libero; - annotare le informazioni relative al campionamento e i valori di cloro e temperatura sul relativo verbale di prelievo. Trasporto e conservazione dei campioni: Trasportare i campioni tra i 2-8 C al riparo dalla luce solare. ALIMENTI 1.1 Prove microbiologiche Se i campioni non vengono ritirati già preconfezionati, prelevare utilizzando guanti, arnesi e contenitori sterili un quantitativo sufficiente e rappresentativo di campione (almeno 100 gr), riporre in borsa frigo e trasportare tra 1 5 C. 1.2 Prove chimiche Nel caso in cui l alimento non sia già preconfezionato, procedere prelevando una quantità sufficiente e il più possibile rappresentativa del campiona (almeno 100 g) utilizzando guanti, arnesi e contenitori puliti (non necessariamente sterili), riporre in borsa frigo e trasportare tra 1-5 C. TAMPONI SUPERFICI PER ANALISI MICROBIOLOGICA (norma ISO ultima revisione) Al fine di evitare qualsiasi contaminazione del campione indossare guanti sterili durante il prelievo. N.B. Contattare preventivamente il laboratorio per avere chiare indicazioni circa i materiali più idonei da utilizzare in relazione al tipo di superficie da campionare ed al microorganismo da rilevare (piastre, terreni, tamponi, diluenti ecc.) Metodo della piastra a contatto Premere la superficie di agar della piastra a contatto, saldamente e senza qualsiasi movimento laterale, contro la superficie da analizzare per un tempo di 10 secondi e imprimendo una pressione ottenuta con una massa di 500 g. Chiudere immediatamente le piastre a contatto dopo il prelievo e, prevenendo qualsiasi forma di contaminazione, trasportarle al laboratorio preferibilmente entro 4 ore dal campionamento. Non utilizzare il metodo della piastra a contatto per la ricerca specifica di microrganismi patogeni Metodo del tampone Estrarre il tampone dal suo involucro sterile e immergerne la punta nella fiala contenente il liquido per diluizione. Premere la punta del tampone contro la parete della fiala per rimuovere il liquido in eccesso. Collocare la punta del tampone sulla superficie da analizzare e campionare con l apposito delimitatore di superficie sterile un area da 20 cm^2 a 100 cm^2 in due direzioni perpendicolari tra loro, ruotando il tampone tra il pollice e l indice. Rompere sterilmente l asta del tampone nella fiala contenente il liquido di diluizione. Trasportare i tamponi in borsa frigo tra 1-4 C preferibilmente entro 4 ore dal campionamento Metodo della spugna Aprire la busta di plastica contenente la spugna e bagnare la spugna con una quantità sufficiente di diluente sterile (9/10 ml di diluente). Evitare di bagnare la spugna nel caso si proceda al campionamento di superfici umide. Rimuovere asetticamente la spugna dalla busta di plastica utilizzando delle pinzette sterili o una mano ricoperta con un guanto sterile. Campionare, con l apposito delimitatore sterile, la superficie scelta in due direzioni perpendicolari tra loro, cambiando il lato della spugna. A campionamento terminato riporre la spugna nella busta di plastica e trasportare il campione in laboratorio. Pagina 4 di 5

5 Se si utilizzano i metodi del tampone o della spugna per dimostrare la presenza/assenza di specifici microrganismi (es. Salmonella spp. o Listeria monocytogenes), campionare un area di almeno 100 cm^2 o più. 2.3 TAMPONI IN EPOSITI PER RICERCA LEGIONELLA (ddg Regione Lombardia n del 24/2/2009) Rubinetti, docce, diffusore condizionatore Indossando guanti sterili, estrarre il tampone dal suo involucro sterile ed introdurlo e sfregarlo all interno del rubinetto o bulbo doccia. Terminato il campionamento rompere il tampone nel suo, facendo in modo che rimanga immerso in almeno 5 ml di acqua proveniente dallo stesso punto di prelievo Filtro UTA condizionatore Con l utilizzo di guanti sterili rimuovere il filtro dal condizionatore (eventualmente estrarlo dall apposita grata di contenimento) e riporlo in un sacchetto sterile. Trasportare i campioni in laboratorio in borsa frigo tra 2-8 C. Pagina 5 di 5