Beniamino Trombetta, PhD Dipartimento di Biologia e Biotecnologie «Charles Darwin»
|
|
- Serafino Vitale
- 7 anni fa
- Visualizzazioni
Transcript
1 Beniamino Trombetta, PhD Dipartimento di Biologia e Biotecnologie «Charles Darwin» beniamino.trombetta@uniroma1.it
2 Individuare in modo UNIVOCO un individuo (parentela, reati, ecc) da una data traccia biologica. La traccia biologica viene repertata e inviata in laboratorio. La molecola utilizzata per l identificazione personale è il DNA.
3 CARATTERISTICHE DEL DNA Cellula Cromosoma (molecola di DNA impacchettata ) Nucleo Molecola di DNA distesa A T T G A C T A
4 CARATTERISTICHE DEL DNA Le basi non sono altro che «compos2 chimici» organizza2 in una sequenza lineare A T A T G C T L appaiamento segue regole precise Avere la sequenza di un pezzo di DNA significa sapere quale è l ordine dei compos2 chimici che formano la molecola. L unità di misura del DNA è data dal numero di nucleo2di
5 IL GENOMA UMANO Il genoma umano che contiene 3,2 x 10^9 basi è stati sequenziato nel 2001
6 NASCITA DELLA GENETICA FORENSE (L Eureka di Sir Alec Jeffreys) Analisi del DNA sui tecnici di laboratorio Si accorse dell esistenza di differenze e somiglianze riproducibili VNTR: numero variabile di ripetizioni seriali (tandem repeats) (da 9 a 40bp che possono essere ripetute anche centinaia o migliaia di volte, dimensione da 500 a bp)
7 Jeffreys e coll. avevano scoperto che esistono nel DNA umano delle regioni (minisatelliti/vntr= Variable Number Tandem Repeat) 1)..ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG.. 2)..TAGACTGAATGC TAGACTGAATGC TAGACTGAATGC.. vengono ripetute in tandem numerose volte e sono presenti in più loci sui cromosomi. Inoltre, il numero di ripetizioni è altamente variabile nei diversi individui
8 Jeffreys e coll. avevano scoperto che esistono nel DNA umano delle regioni (minisatelliti/vntr= Variable Number Tandem Repeat) INDIVIDUO 1)..ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG.. INDIVIDUO 2)..ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG.. INDIVIDUO 3)..ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG ATCTGACTTACG..
9 ANALISI Fase 1: digestione del DNA Si utilizzano gli enzimi di restrizione. Sono delle forbici molecolari che tagliano (digeriscono) il DNA su entrambi i filamenti in corrispondenza di sequenze specifiche. Numero e lunghezza dei frammenti dipendono dalla frequenza della sequenza sul DNA (sequenze più corte: statisticamente più frequenti).
10 Fase 2: separazione del DNA I frammenti di DNA vengono separati in base alla loro lunghezza attraverso un campo elettrico (elettrofresi). Successione di bande Frammento più lungo Frammento più corto
11 Fase 3: Identificazione del DNA DNA denaturati (singola elica) separati per elettroforesi e trasferiti su una membrana porosa poi immersa nella soluzione con la sonda marcata (tracciante) Southern blotting Il filamento singolo della sonda riconosce la sequenza complementare sul DNA e vi si lega. Una sequenza di DNA può fungere da sonda per identificare segmenti di DNA che hanno sequenza nucleotidica identica o molto simile in base al principio della complementarità delle basi.
12 Lo sviluppo della genetica forense Il DNA fingerprinting Introdotto da Alec Jeffreys Il DNA viene estratto, digerito con enzimi di restrizione, sottoposto ad elettroforesi, denaturato e trasferito su membrana. Quindi viene utilizzata una sonda multi-locus core minisatellite marcata con radioattivo per l ibridazione. Il segnale radioattivo viene rivelato mediante esposizione di una lastra sensibile ai raggi X
13 UN CONCETTO FONDAMENTALE Il dubbio è fastidioso, ma la certezza è degli imbecilli Voltaire SCIENTIFICO ESATTO L approccio è scientifico solo se permette di valutare l indeterminazione associata alle nostre ipotesi Esclusione certa, ma mai certezza assoluta
14 Colin Pitchfork (Leichester, 1983) Il primo caso: il signor Colin Pitchfork 1983: Lynda Mann, 15 anni, viene violentata e uccisa nel Leichestershire (UK) 1986: Dawn Ashworth, 15 anni, viene violentata e uccisa nella stessa zona Il modus operandi nei due delitti era lo stesso ed il gruppo sanguigno (gruppo A), determinato dalle tracce di liquido seminale, era il medesimo (ci volle molto tempo per ottenere un buon profilo di DNA visto il poco materiale a disposizione). 1986: Richard Buckland, un ragazzo del posto, venne incriminato dei due delitti, ma l analisi del DNA mediante fingerprinting rivelò successivamente che egli era innocente. Circa 5000 individui nel Leichestershire possedevano il gruppo sanguigno A. Si organizzò uno screening di massa ed in nessun caso il DNA fingerprinting dei 5000 individui corrispondeva a quello dell assassino. 1987: una persona del posto rivelò che un amico, un certo Colin Pitchfork, gli aveva chiesto di partecipare allo screening in sua vece in cambio di denaro. Il signor Pitchfork venne invitato a donare il sangue ed il profilo del suo DNA risultò identico a quello del DNA raccolto sulla scena dei due delitti. Ci vollero 4 anni per trovare il colpevole (un problema che rimaneva: servivano grandi quantità di DNA)
15 Grandi quantità di DNA
16 1983 La seconda svolta «Ho scoperto la PCR perché avevo tutto quello che mi serviva: una macchina nuova, il serbatoio pieno, un paio di scarpe comode e la donna che amavo che dormiva al mio fianco» Ballano nudi nel campo della mente, (mentre andava a fare SURF)
17 Amplificazione PCR Reazione a Catena della Polimerasi Metodo per amplificare rapidamente un singolo frammento di DNA da una miscela complessa Cicli ripetuti di: 1. Denaturazione al calore 2. Primers (oligonucleotidi) 3. Polimerizzazione con polimerasi Taq (resistente al calore)
18 La PCR supera questo problema
19 Cambia il marcatore molecolare (Non più VNTR ma STR) Con l introduzione della PCR diventa possibile analizzare loci specifici leggermente diversi dai precedenti. AATG 7 repeats 8 repeats
20 Caratteristiche degli STR Alto tasso di mutazione = elevata variabilità nelle popolazioni umane Piccoli frammenti = possibile lavorare anche su campioni degradati o su DNA antico Conoscenza esatta delle frequenze alleliche nelle popolazioni umane = probabilità di match
21 Campione XY Campione YZ Sesso Femminile Sesso Maschile TH TH D21S D21S D18S D18S vwa vwa FGA FGA D8S D8S TPOX 8-8 TPOX CSF1PO CSF1PO D16S D16S D7S D7S D13S D13S D5S D5S D3S D3S D19S D19S D2S D2S
22 La ragione dell uso di primers fluorescenti è legata al fatto che l analisi degli amplificati viene fatta con un sistema automatizzato (Altro Grande Vantaggio!!) di elettroforesi capillare che consente di distinguere gli amplificati sulla base del colore.
23
24 Sample injection Sample separation Ar + LASER (488 nm) Mixture of dye-labeled PCR product from Multiplex PCR reaction Fluorescence ABI Prism spectrograph Sample Detection CCD Panel Color Separation Il capillare, che contiene una soluzione polimerizzante, è dotato di una finestrella attraverso la quale il laser eccita ad una precisa lunghezza d onda il campione di DNA marcato con un determinato fluoroforo che ne permette l identificazione. Capillary
25 Le bande, la cui dimensione dipende dal numero di ripetizioni, vengono trasformate in picchi.
26 COMPARAZIONE DI PROFILI GENETICI Esclusione Compatibilità
27 PowerPlex ESX 17
28 Familial Searching
29 Palladineve: il gatto che incastrò il killer grazie alla PCR Il 3 ottobre 1994, Prince Edward Island, Canada scompare una donna di 32 anni, successivamente ritrovata morta seppellita in una buca poco profonda. Era il cadavere di Shirley Douglas. Le indagini si concentrarono su una giacca intrisa di sangue. Il sangue era della vittima, ma sulla giacca vengono individuate 27 peli bianchi. Grazie alla PCR il poco DNA dei peli fu amplificato e analizzato: risultò essere di un gatto. L ex convivente della vittima, Douglas Bremish, era tra i sospettati e viveva con un gatto di nome palla di neve Il DNA estratto dai peli di palla di neve presenta un profilo DNA uguale a quello ottenuto dai peli ritrovati nella macchina della vittima L ex marito viene incriminato nel giro di pochissimo tempo e messo alle strette confessa l omicidio I peli di Palla di neve costituirono un precedente tanto che il dipartimento di giustizia statunitense stanziò ben 265mila dollari per creare un database genetico nazionale dei gatti nel caso in cui si fossero trovati altri peli di gatto sulle scene dei crimini.
30
BIOCHIMICA MOLECOLARE CLINICA
Corso di Laurea Magistrale in BIOLOGIA CELLULARE e MOLECOLARE E SCIENZE BIOMEDICHE A.A. 2016 2017 BIOCHIMICA MOLECOLARE CLINICA Principi e tecniche molecolari per la diagnosi di patologie umane Prof. Patrizia
DettagliMetodologie citogenetiche. Metodologie molecolari. Formulare la domanda Utilizzare la metodica appropriata
In base al potere di risoluzione della tecnica Metodologie citogenetiche Metodologie molecolari Formulare la domanda Utilizzare la metodica appropriata 1 DNA RNA PROTEINE DNA Cromosomi (cariotipo, FISH,
DettagliLa variabilità genetica: tipi e metodi per studiarla e misurarla
La variabilità genetica: tipi e metodi per studiarla e misurarla La variabilità genetica (V.G.) 1. V.G. somatica 2. V.G. gametica intraindividuo 3. V.G. gametica intrapopolazione (polimorfismo) 4. V.G.
DettagliANALISI MOLECOLARE DEL GENOMA
ANALISI MOLECOLARE DEL GENOMA Come sono disposti i geni nel genoma? MAPPA GENETICA: un set ordinato di geni sul cromosoma, la distanza tra i quali è espressa in unità di ricombinazione genetica (centimorgan)
DettagliFORENSE TERAPIA GENICA
FORENSE TERAPIA GENICA Lezione16 Variabilità genetica nelle scienze forensi A cosa serve? *Identificare individui che hanno commesso dei crimini *Predire la popolazione di origine di un DNA (es. Africano,
DettagliTecnologia del DNA ricombinante
Tecnologia del DNA ricombinante Scoperte rivoluzionarie che hanno permesso lo studio del genoma e della funzione dei singoli geni Implicazioni enormi nel progresso della medicina: comprensione malattie
DettagliPolymerase chain reaction - PCR. Biotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale
Prof.ssa Tiziana Pepe Polymerase chain reaction - PCR Biotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale Dip. di Medicina Veterinaria e Produzioni animali tiziana.pepe@unina.it Metodologia
DettagliIL DNA fingerprinting
IL DNA fingerprinting It has long been an axiom of mine that the little things are infinitely the most important Sherlock Holmes IL DNA fingerprinting è attualmente la tecnica più potente per identificare
DettagliBiotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale
Prof.ssa Tiziana Pepe Tecniche molecolari Biotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale Dip. di Medicina Veterinaria e Produzioni animali tiziana.pepe@unina.it Tecniche molecolari
DettagliIL SEQUENZIAMENTO DEL DNA. Obiettivo: ottenere la sequenza nucleotidica di un frammento di DNA.
IL SEQUENZIAMENTO DEL DNA Obiettivo: ottenere la sequenza nucleotidica di un frammento di DNA. Il DNA può essere sequenziato generando frammenti di DNA la cui lunghezza dipende dall ultima base della sequenza.
DettagliOrganizzazione del Genoma
Organizzazione del Genoma Grazie alla complementarietà delle basi, la doppia elica del DNA ha la capacità di separare (denaturazione), e poi riunire (rinaturazione), i due filamenti senza rompere i legami
DettagliUtilizzo di marcatori molecolari in evoluzione e conservazione
Utilizzo di marcatori molecolari in evoluzione e conservazione Un marcatore genetico è qualsiasi elemento con una base genetica, in genere identificabile con facilità, che permette di caratterizzare un
DettagliIl Sequenziamento Tecniche e Strategie
Il Sequenziamento Tecniche e Strategie Metodi per il sequenziamento del DNA Metodo della degradazione chimica (Maxam & Gilbert, 1977) La sequenza di una molecola di ds DNA viene determinata mediante trattamento
DettagliPatologie da analizzare
Fasi cruciali Scelta della patologia da analizzare Scelta del campione da analizzare Scelta dell approccio da utilizzare Scelta della tecnica da utilizzare Analisi statistica del dati Conferme con approcci
DettagliStudio pilota per la creazione e l utilizzo di un database contenente i profili genetici di una popolazione controllata di cani
MSRCTE 01/11 Studio pilota per la creazione e l utilizzo di un database contenente i profili genetici di una popolazione controllata di cani C. Cammà Reparto Ricerca e Sviluppo Biotecnologie Obiettivo
DettagliLa GENETICA DELLE POPOLAZIONI. studia con modelli matematici, a livello di gruppi di individui, variabilità genetica
La GENETICA DELLE POPOLAZIONI studia con modelli matematici, a livello di gruppi di individui, la variabilità genetica che è l unico tipo di variabilità rilevante per l evoluzione La variabilità genetica
DettagliGenome variability part II
Genome variability part II I MARCATORI POLIMORFICI 1. RFLPs Restriction Fragment Lenght Polymorphism (bi-allelic).tipizzabili mediante PCR or Southern based screening. Studi di associazione. 2. SNPs Single
DettagliMarcatori molecolari
Marcatori molecolari Caratteristiche e applicazioni Luca Gianfranceschi e Rosanna Marino 1 I marcatori molecolari Strumento per l analisi genetica Strumento Molecolari Analisi genetica Marcatori non oggetto
DettagliTecnologia del DNA e la genomica. Dr ssa Elisa Mazzoni, Ph.D Biologia Applicata a.a Università di Ferrara
Tecnologia del DNA e la genomica Dr ssa Elisa Mazzoni, Ph.D Biologia Applicata a.a 2018-2019 Università di Ferrara Alcune Tecnologie del DNA Estrazione del DNA Taglio del DNA con enzimi di restrizione
DettagliBiotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale
Prof.ssa Tiziana Pepe Evoluzioni della tecnica PCR Biotecnologie applicate all ispezione degli alimenti di origine animale Dip. di Medicina Veterinaria e Produzioni animali tiziana.pepe@unina.it Nested
DettagliTecnologia del DNA e la genomica
Tecnologia del DNA e la genomica DNA ricombinante La tecnologia del DNA ricombinante permette di unire in laboratorio il DNA di organismi diversi Permette di manipolare il DNA di un organismo allo scopo
DettagliPolimorfismi LEZIONE 3. By NA 1
Polimorfismi LEZIONE 3 By NA 1 Polimorfismo Variazione presente nella popolazione con una frequenza superiore a 1% Variazioni nell aspetto By NA 2 Polimorfismo proteico Variazione presente nella popolazione
DettagliPCR allele-specifica Ibridazione con sonde allele-specifiche (ASO) PCR Real-time con sonde TaqMan Saggio OLA (Oligo Ligation Assay)
Tecniche per l analisi di singole variazioni: PCR allele-specifica Ibridazione con sonde allele-specifiche (ASO) PCR Real-time con sonde TaqMan Saggio OLA (Oligo Ligation Assay) alcuni SNP (ca. 10%) sono
DettagliLe biotecnologie. Sadava et al. Biologia La scienza della vita Zanichelli editore 2010
Le biotecnologie 1 Cosa sono le biotecnologie? Le biotecnologie sono tutte quelle tecniche utilizzate (fin dall antichità) per produrre sostanze specifiche a partire da organismi viventi o da loro derivati.
DettagliMappe fisiche. Si basano sulla localizzazione fisica delle molecole di DNA
Mappe fisiche Si basano sulla localizzazione fisica delle molecole di DNA Costruzione di una mappa fisica diversi metodi - Mappe a bassa risoluzione - Mappe ad alta risoluzione Risoluzione= distanza a
DettagliIl Sequenziamento Tecniche e Strategie
Il Sequenziamento Tecniche e Strategie Metodi per il sequenziamento del DNA Metodo della degradazione chimica (Maxam & Gilbert, 1977) La sequenza di una molecola di ds DNA viene determinata mediante trattamento
DettagliSintesi chimica del DNA
Sintesi chimica del DNA Sintesi chimica di oligonucleotidi Per la sintesi vengono utilizzati fosforamidi dei vari nucleotidi. La fosforamide contiene un buon gruppo uscente che promuove la reazione di
DettagliDESCRIZIONE DEI DIFFERENTI METODI MOLECOLARI DISPONIBILI PER LA RILEVAZIONE DI HPV E L L IDENTIFICAZIONE DEI GENOTIPI
DESCRIZIONE DEI DIFFERENTI METODI MOLECOLARI DISPONIBILI PER LA RILEVAZIONE DI HPV E L L IDENTIFICAZIONE DEI GENOTIPI Relatore:Paola Alberizzi-TLBM Responsabile:Dr.ssa Barbara Dal Bello INTRODUZIONE L
Dettagli7. Gruppi genici e sequenza ripetute
7. Gruppi genici e sequenza ripetute contiene materiale protetto da copyright, ad esclusivo uso personale; non è consentita diffusione ed utilizzo di tipo commerciale La duplicazione e la delezione di
DettagliCome facciamo ad isolare un gene da un organismo? Utilizziamo una libreria ovvero una collezione dei geni del genoma del cromosoma di un organismo
Come facciamo ad isolare un gene da un organismo? Utilizziamo una libreria ovvero una collezione dei geni del genoma del cromosoma di un organismo GENOMA di alcuni organismi viventi raffigurato come libri
DettagliLA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI PCR
LA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI PCR INTRODUZIONE Tecnica ideata da Mullis e collaboratori nel 1984 La possibilita' di disporre di quantità virtualmente illimitate di un determinato frammento di DNA,
DettagliELETTROFORESI SU GEL
ELETTROFORESI SU GEL ELETTROFORESI SU GEL Metodo per separare le molecole (DNA, RNA, proteine, etc.) sulla base di proprieta fisiche o chimiche quali: (1)dimensioni (2)forma (3)carica elettrica L'AGAROSIO
Dettaglia) DENATURAZIONE b) APPAIAMENTO c) SINTESI
La PCR è una tecnica biomolecolare messa a punto da Mullis et al. (1986) che perme6e l amplificazione esponenziale in vitro di sequenze di acidi nucleici. La reazione di PCR illustrata in figura prevede
DettagliLa struttura della cromatina
La struttura della cromatina Istoni e nucleosomi La cromatina Il DNA all interno del nucleo eucariotico è associato a delle proteine. Il complesso DNA-proteina si chiama cromatina. Se nuclei interfasici
DettagliBiotecnologie. Screening delle genoteche con le sonde geniche
Biotecnologie Screening delle genoteche con le sonde geniche Giancarlo Dessì http://www.giand.it Licenza Creative Commons BY-NC-SA (BY: attribuzione, NC: uso non commerciale, SA: condividi allo stesso
DettagliPCR. (Reazione a Catena della Polimerasi) Kary Mullis
POLYMERASE CHAIN REACTION - PCR PCR Polymerase Chain Reaction (Reazione a Catena della Polimerasi) Kary Mullis Premio Nobel per la Chimica nel 1993, Kary Mullis è divenuto una leggenda per la scoperta
DettagliI marcatori molecolari. Dipartimento di Scienze Agronomiche e Genetica Vegetale Agraria Corso di Genetica Agraria Giovanna Attene
I marcatori molecolari Dipartimento di Scienze Agronomiche e Genetica Vegetale Agraria Corso di Genetica Agraria Giovanna Attene Marcatori molecolari del DNA I marcatori molecolari sono sequenze di DNA
Dettaglilaboratorio biotecnologie zootecniche BAA/LM 3CFU
laboratorio biotecnologie zootecniche BAA/LM 3CFU Calendario accademico Inizio delle Lezioni: 6 Marzo 2012 Fine delle Lezioni : 5 Giugno 2012 Inizio vacanze di Pasqua: 6 Aprile Fine vacanze di Pasqua:
DettagliLA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI
Polymerase Chain Reaction LA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI e LE SUE APPLICAZIONI Prima diagnosi molecolare sul DNA 1978 *Primo ormone umano ricombinante (insulina) *Premio Nobel agli scopritori degli
DettagliIl Programma Proteine Vegetali in Friuli Venezia Giulia
Il Programma Proteine Vegetali in Friuli Venezia Giulia CONTAMINAZIONE ACCIDENTALE DA OGM ED APPLICAZIONE DI MARCATORI MOLECOLARI PER L IDENTIFICAZIONE VARIETALE IN SOIA. Piera De Pauli,, Francesca Canciani
DettagliAmplificazione mediante PCR (Polymerase Chain Reaction) del DNA estratto dalla saliva.
OBIETTIVO DEL LAVORO SPERIMENTALE: TIPIZZAZIONE DEI CROMOSOMI SESSUALI X e Y Amplificazione mediante PCR (Polymerase Chain Reaction) del DNA estratto dalla saliva. Cromosoma X Cromosoma y La tipizzazione
DettagliRELAZIONE DI CONSULENZA TECNICA MEDICO-LEGALE EXTRAGIUDIZIALE IN TEMA DI RAPPORTO DI FILIAZIONE
Dott. XXXXXXXXXXXXX Medico chirurgo Specialista in xxxxxxxxxxxxxxxx Via xxxxxxxxxxxxx XXXXXXXXXXXXXXXX --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
DettagliLezione 4. Il sequenziamento del DNA, Sanger
Lezione 4 Il sequenziamento del DNA, Sanger Schema della lezione Polymerase chain reaction (PCR) Dal prodotto di PCR al sequenziamento di Sanger Lettura dei prodotti di sequenziamento con sequenziatori
DettagliLa mappatura dei geni umani. SCOPO conoscere la localizzazione dei geni per identificarne la struttura e la funzione
La mappatura dei geni umani SCOPO conoscere la localizzazione dei geni per identificarne la struttura e la funzione Un grande impulso alla costruzione di mappe genetiche è stato dato da le tecniche della
Dettagli0,8% riesce a separare un range di dimensioni da circa 500 bp a circa bp.
L elettroforesi è una tecnica che utilizza un campo elettrico per separare e visualizzare frammenti di DNA in base al loro peso molecolare ed alla loro carica. Gli acidi nucleici, migrano sempre verso
DettagliProgetto :TRIFOGLIO UNIVERSITA CATTOLICA DEL SACRO CUORE Piacenza. O.G.M. Vegetali
Progetto :TRIFOGLIO UNIVERSITA CATTOLICA DEL SACRO CUORE Piacenza O.G.M. Vegetali Identificazione di un O.G.M. e metodi di analisi del DNA transgenico Marco Nani 5BL Liceo Scientifico Mattei di Fiorenzuola
DettagliI marcatori molecolari. Dipartimento di Agraria Sez. di Agronomia, Coltivazioni Erbacee e Genetica Corso di Genetica Agraria Giovanna Attene
I marcatori molecolari Dipartimento di Agraria Sez. di Agronomia, Coltivazioni Erbacee e Genetica Corso di Genetica Agraria Giovanna Attene Marcatori molecolari del DNA I marcatori molecolari sono sequenze
Dettagli2. DUPLICAZIONE DNA. 1. COMPOSIZIONE e STRUTTURA 3. CROMOSOMI
2. DUPLICAZIONE DNA 1. COMPOSIZIONE e STRUTTURA 3. CROMOSOMI 1 1. COMPOSIZIONE e STRUTTURA Ma che cos è il DNA? è un contenitore di informazioni... scritte come sequenza di basi azotate 2 Acidi Nucleici:
DettagliGENOMICA. = conoscenza del DNA. Creazione banche banchedati datidel del DNA. Conoscenza di difenomeni biologici
GENOMICA = conoscenza del DNA Conoscenza di difenomeni biologici Creazione banche banchedati datidel del DNA DNA Prevenzione e cura curadi dimalattie (screening del (screening DNA del per DNA malattie
DettagliTECNICHE DI BIOLOGIA MOLECOLARE. LA REAZIONE POLIMERASICA A CATENA Principi teorici e aspetti pratici
TECNICHE DI BIOLOGIA MOLECOLARE LA REAZIONE POLIMERASICA A CATENA Principi teorici e aspetti pratici POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) 1955 A. Kronembreg e coll. (Stanford University) scoprono la DNA-polimerasi
DettagliPolimorfismi e la variazione genetica
Polimorfismi e la variazione genetica Variazione individuale nel DNA (con frequenza 1% nella popolazione) SNP (single nucleotide polymorphism)è definito come una variazione a livello di un singolo paio
DettagliAZIENDA OSPEDALIERA UNIVERSITARIA INTEGRATA - VERONA (D.Lgs. n. 517/ Art. 3 L.R.Veneto n. 18/2009) D I M T
1 Allegato 1 D I M T PROCEDURA APERTA PER LA FORNITURA QUINQUENNALE PER IL DIPARTIMENTO INTERAZIENDALE DI MEDICINA TRASFUSIONALE DI PRODOTTI PER LA TIPIZZAZIONE GENOMICA A BASSA E ALTA RISOLUZIONE SUDDIVISA
DettagliPermette di monitorare in tempo reale l andamento della reazione ed effettuare una quantizzazione del frammento amplificato
Permette di monitorare in tempo reale l andamento della reazione ed effettuare una quantizzazione del frammento amplificato Lo strumento è composto da:! Un sistema ottico per eccitare il marcatore fluorescente
DettagliIL SISTEMA TOSCANO PER IL CONTROLLO E LA SALVAGUARDIA DELLE ACQUE DI BALNEAZIONE E DELL AMBIENTE MARINO
IL SISTEMA TOSCANO PER IL CONTROLLO E LA SALVAGUARDIA DELLE ACQUE DI BALNEAZIONE E DELL AMBIENTE MARINO Livorno, 4 maggio 2018 Sala Ferretti, Fortezza Vecchia Le novità per gestione della stagione balneare
DettagliBioinformatica. Analisi del genoma
Bioinformatica Analisi del genoma GABRIELLA TRUCCO CREMA, 5 APRILE 2017 Cosa è il genoma? Insieme delle informazioni biologiche, depositate nella sequenza di DNA, necessarie alla costruzione e mantenimento
DettagliLA PCR E LE SUE VARIANTI. Quaderno di laboratorio. a cura di PRESS FIRENZE UNIVERSITY
LA PCR E LE SUE VARIANTI Quaderno di laboratorio a cura di an GE LA scia LP I, ale SSIO me N GO N I FIRENZE UNIVERSITY PRESS manuali scienze 2 pianeta redi comitato scientifico renato fani david caramelli
DettagliMARCATORI MOLECOLARI
MARCATORI MOLECOLARI MARCATORI ENZIMATICI A B D E C Marcatori biochimici: (A) fosfo-gluco-mutasi (PGM); (B) lipoossigenasi (LOX) in soia; (C) esterasi (EXT) in poa pratense; (D,E) rappresentazioni schematiche
DettagliCaratterizzazione genetica ed assegnazione geografica di testuggini (Testudo hermanni) di origine ignota
Caratterizzazione genetica ed assegnazione geografica di testuggini (Testudo hermanni) di origine ignota Scopo: caratterizzare geneticamente testuggini provenienti da sequestri per identificare animali
DettagliVettori derivati dal fago λ: batteriofagi filamentosi M13
Vettori derivati dal fago λ: batteriofagi filamentosi M13 A. Phage display: esibizione della proteina clonata in M13 ed esposta sulla superficie del batteriofago (facile screening dei ricombinanti) mediante
DettagliLa tecnologia Seegene per la diagnosi delle Malattie Sessualmente Trasmesse in Real Time PCR
La diagnostica molecolare delle malattie sessualmente trasmesse (non HIV): nuovi percorsi di appropriatezza analitica e clinica. La tecnologia Seegene per la diagnosi delle Malattie Sessualmente Trasmesse
DettagliCORSO INTEGRATO DI GENETICA a.a. 2011-2012. Genetica molecolare in medicina: Analisi di Mutazioni. Cristina Bombieri 7 dicembre 2011
CORSO INTEGRATO DI GENETICA a.a. 2011-2012 Genetica molecolare in medicina: Analisi di Mutazioni Cristina Bombieri 7 dicembre 2011 GENETICA MOLECOLARE IN MEDICINA SVILUPPI SCIENTIFICI Mappatura gene Identificazione
DettagliApplicazione della biologia molecolare nella valutazione del benessere del cavallo
UNIVERSITA DEGLI STUDI DI PERUGIA FACOLTA DI MEDICINA VETERINARIA Centro di Studio del Cavallo Sportivo Applicazione della biologia molecolare nella valutazione del benessere del cavallo Andrea Verini
DettagliWORKLOAD molecolare. Valutazione del carico di lavoro tempo uomo laboratorio genetica molecolare
WORKLOAD molecolare Valutazione del carico di lavoro tempo uomo laboratorio genetica molecolare Analisi valutate ESTRAZIONE DNA MANUALE/SEMIAUTOMATICA LAPUCCI ESTRAZIONE DNA AUTOMATICA-LAPUCCI reazione
DettagliTema C Capitolo 12 Le biotecnologie
1. Biotecnologie di ieri e di oggi 2. Come si fanno gli OGM? 3. La «prova del DNA» 4. A che cosa servono gli OGM? 5. La «fotocopiatrice genetica» 6. Gli anticorpi monoclonali 1 Biotecnologie di ieri e
DettagliIl biomonitoraggio ambientale attraverso lo studio della regolazione genica della risposta allo stress Silvia Franzellitti
Seminario per il corso misure con biomarcatori A.A. 2005-2006 Il biomonitoraggio ambientale attraverso lo studio della regolazione genica della risposta allo stress Silvia Franzellitti Perché utilizzare
DettagliA COSA SERVE il CLONAGGIO del DNA?? COME FUNZIONA il CLONAGGIO del DNA? COME FUNZIONA il CLONAGGIO del DNA?
A COSA SERVE il CLONAGGIO del DNA?? CREARE COPIE IDENTICHE (= CLONI) DI UN FRAMMENTO DI DNA DIFFERENZE con la PCR: è una reazione in vivo sfrutta l apparato di replicazione del DNA della cellula ospite
DettagliMetodiche di analisi del DNA (cenni) (Ingegneria genetica)
DNA Metodiche di analisi del DNA (cenni) (Ingegneria genetica) Principali tecniche di base Enzimi di restrizione (Endonucleasi) Gel elettroforesi Ibridizzazione PCR (Polymerase Chain Reaction) Sequenziamento
DettagliIl DNA: istruzioni per la vita Bibliografia I colori della Biologia Gatti- Giusti- Anelli Ed. Pearson
Il DNA: istruzioni per la vita Bibliografia I colori della Biologia Gatti- Giusti- Anelli Ed. Pearson Una divisione equa Quando una cellula si divide, si formano due nuove cellule che contengono esattamente
DettagliFoto sopralluogo del 18 Dicembre 2007
Foto sopralluogo del 18 Dicembre 2007 Lato A pezzetto di stoffa con il gancetto non deformato rivolto verso l alto Lato B pezzetto di stoffa con il gancetto non deformato rivolto verso il basso Descrizione
DettagliLineage markers Sex-specific inherited markers
DNA Profiling e Genetica Forense Lineage markers Sex-specific inherited markers Finora abbiamo visto che i marcatori più utilizzati in genetica forense sono i loci microsatellite ma più in generale sono
DettagliSouthern blot. !Per. determinare la presenza o assenza di specifici frammenti genici. !Studio. della struttura e dell organizzazione di un gene
Southern blot!per determinare la presenza o assenza di di specifici frammenti genici!studio della struttura e dell organizzazione di di un gene Southern blot Procedura Isolare DNA genomico Digerirlo con
DettagliDNA DNA DNA Legge di complementarietà delle basi Se in un filamento è presente una T nell altro filamento deve essere presente una A. Se è presente una C nell altro ci dovrà essere una G. E possibile
DettagliTecnologia del DNA e la genomica
Tecnologia del DNA e la genomica DNA ricombinante La tecnologia del DNA ricombinante permette di unire in laboratorio il DNA di organismi diversi Permette di manipolare il DNA di un organismo allo scopo
DettagliCORSO GENOPOM PRO. Marcatori molecolari. Docente: Pasquale Termolino
CORSO GENOPOM PRO Marcatori molecolari Docente: e-mail: Pasquale Termolino termolin@unina.it Ottobre 2013 Struttura del Corso! 24 ore totali! Introduzione! Marcatori fenotipici! Marcatori biochimici! Tecniche
DettagliScientists with lab coats: Corso di laboratorio Chimico-Biologico. Dott.ssa Valeria Berton Università di Verona
Scientists with lab coats: Corso di laboratorio Chimico-Biologico Dott.ssa Valeria Berton Università di Verona Il DNA Il DNA contiene l informazione genetica di un organismo Scritta in un codice chimico
DettagliFrancesca Ceroni. Biotecnologie tradizionali. Biologia Sintetica. F. Ceroni 16/09/2010. Bressanone GNB 2010 1. 1) DNA ricombinante 2) PCR
XXIX Scuola Annuale di Bioingegneria. Bressanone, 13-17 settembre 2010 Francesca Ceroni Biotecnologie tradizionali 1) DNA ricombinante 2) PCR 3) Sequenziamento automatizzato Biologia Sintetica 4) Approccio
DettagliFONDO DI PEREQUAZIONE 2002
- 1 - FONDO DI PEREQUAZIONE 2002 Camera di commercio di Torino In collaborazione con CO.AL.VI.(Consorzio di Tutela della Razza Bovina Piemontese) Laboratorio della Camera di Commercio CARATTERIZZAZIONE
DettagliDifferenti tipi di PCR
Differenti tipi di PCR Colony PCR Nested PCR Multiplex PCR AFLP PCR Hot start PCR In situ PCR Inverse PCR Asymmetric PCR Long PCR Long accurate PCR Reverse transcriptase PCR Allele Specific PCR Real time
DettagliStrumenti della Genetica Molecolare Umana (3) Capitoli 6-7-8
Strumenti della Genetica Molecolare Umana (3) Capitoli 6-7-8 Piccolo test: trova al differenza Gel 2 Gel 1 Gel 1. digestione DNA genomico Gel 2. Digestione inserto cloni genomici BANCHE DI DNA RICOMBINANTE
DettagliLa reazione a catena della polimerasi (PCR) di Ofelia Leone e Vincenzo Mandarino
La reazione a catena della polimerasi (PCR) di Ofelia Leone e Vincenzo Mandarino La Polymerase Chain Reaction (PCR) o reazione di amplificazione a catena è una tecnica che permette di amplificare una specifica
DettagliSperimenta il BIOLAB
Sperimenta il BIOLAB I numeri del BIOLAB Il Maserati porta annualmente al CusMiBio circa 200 alunni dalla 2^ alla 5^ Liceo Scientifico tecnologico per fare 2-3 laboratori di Genetica, Citologia e Biologia
DettagliRELAZIONE TECNICA. Indagini Biologico-Molecolari per Accertamento di Paternità
RELAZIONE TECNICA Indagini Biologico-Molecolari per Accertamento di Paternità PROSPETTO RIASSUNTIVO DELL'ANALISI ANALISI INDAGINE DI PATERNITA' PERSONE SOTTOPOSTE AL TEST QUESITO Campione Biologico Tampone
DettagliPCR. PCR o reazione di polimerizzazione a catena. Amplificazione esponenziale di DNA. Puo amplificare un tratto di DNA per piu di 1 milione di volte
PCR Prof.ssa Flavia Frabetti PCR o reazione di polimerizzazione a catena Fine anni 80 Amplificazione esponenziale di DNA. Puo amplificare un tratto di DNA per piu di 1 milione di volte Permette di estrarre
DettagliLo studio delle varie conformazioni del DNA
Lo studio delle varie conformazioni del DNA Separazione dei topoisomeri Molecole di DNA ccc di una uguale lunghezza e composizione in basi, ma diverso Lk, sono dette topoisomeri. I topoisomeri possono
DettagliLezione 3. Genoma umano come esempio di genoma eucariote
Lezione 3 Genoma umano come esempio di genoma eucariote Schema della lezione Sommario degli elementi contenuti in un genoma eucariote Variabilità: dove si trova e come si definisce I grandi progetti internazionali
DettagliRegione del Veneto - POR FESR BANDO PER IL SOSTEGNO A PROGETTI DI RICERCA CHE PREVEDONO L IMPIEGO DI RICERCATORI
MESSA A PUNTO DI UNA PROCEDURA DIAGNOSTICO MOLECOLARE PER L INDIVIDUAZIONE DELLA PREDISPOSIZIONE GENETICA ALL ALLERGIA ALLE ARACHIDI ED ALLA FRUTTA SECCA IN GENERALE Regione del Veneto - POR FESR 2014-2020
DettagliRetrovirus e DNA ricombinante. Lezioni d'autore di Paola Vinesi
Retrovirus e DNA ricombinante Lezioni d'autore di Paola Vinesi I RETROVIRUS (I) Come tutti i virus, i retrovirus sono parassiti endocellulari obbligati che infettano le cellule rilasciando in esse il proprio
DettagliAMPLIFICAZIONE IN VITRO DEL DNA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI (PCR)
AMPLIFICAZIONE IN VITRO DEL DNA REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI (PCR) PCR: reazione polimerasica a catena Inventata da Kary Mullis negli anni 80 (premio Nobel 1993) Serve per ottenere una grande quantita
DettagliBIOLOGIA Parte Prima
BIOLOGIA Parte Prima Introduzione alla biologia forense: definizione e finalità Attività analitica di laboratorio condotta, secondo precise linee guida internazionali, su tracce di natura biologica repertate
Dettaglivenerdì 4 maggio 2012
Centro Università di Milano-Scuola per la diffusione delle Bioscienze e delle Biotecnologie Attività per studenti Sperimenta il BioLab Una settimana da ricercatore Apprendisti ricercatori Concorso: Una
DettagliTest con punteggio 0.5
Cognome e Nome Associazione Onlus Lesina (FG) Venerdi 12 Ottobre 2007 Test con punteggio 0.5 1. Un gene è 6. La coppia di cromosomi XY potrebbe essere quella di chi? una proteina il piano di costruzione
DettagliJay Phelan, Maria Cristina Pignocchino. Scopriamo la biologia
Jay Phelan, Maria Cristina Pignocchino Scopriamo la biologia Capitolo 6 Il DNA in azione 3 1. Il DNA è il materiale genetico Il DNA è composto da una sequenza di nucleotidi. Ogni nucleotide comprende:
DettagliREPLICAZIONE DEI GENOMI A DNA
REPLICAZIONE DEI GENOMI A DNA LA REPLICAZIONE DEL DNA SERVE A PERPETUARE L INFORMAZIONE GENICA FIGURA 12.26 GENES VII FIGURA 13.1 GENOMI II FIGURA 13.2 GENOMI II NEL 1958 MESELSON E STAHL DIMOSTRANO CHE
DettagliMarcatori genetici delle piante
Marcatori genetici delle piante Marcatore genetico: locus genico che identifica univocamente una regione cromosomica Polimorfismo genetico: Presenza di varianti alleliche per un dato locus (gene o marcatore)
DettagliPolymerase Chain Reaction
Polymerase Chain Reaction La reazione a catena della polimerasi (in inglese: Polymerase Chain Reaction), comunemente nota con l'acronimo PCR, è una tecnica di biologia molecolare che consente la moltiplicazione
DettagliApplicazioni di genetica forense. Applicazioni di genetica forense. Margini di errore e limiti delle analisi del DNA.
www.aifo-italia.it Applicazioni di genetica forense Applicazioni di genetica forense Margini di errore e limiti delle analisi del DNA relatore: dott. Ugo Ricci Dirigente Biologo, Specialista in Genetica
DettagliParte I I principi fondamentali della clonazione dei geni e dell analisi del DNA
6746 BROWN Iniziali I-XIV 13-04-2007 11:57 Pagina VII Indice Parte I I principi fondamentali della clonazione dei geni e dell analisi del DNA Capitolo 1 L importanza della clonazione dei geni e dell analisi
DettagliPolimorfismi del DNA e loro applicazioni
Polimorfismi del DNA e loro applicazioni WWW.FISIOKINESITERAPIA.BIZ Lo sviluppo dei marcatori genetici nell uomo TIPO DI MARCATORE N DI LOCI CARATTERISTICHE Gruppi sanguigni ~ 20 Può esserci bisogno di
Dettagli