QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A in Wine. Manuale d uso. Cat. # OTA-WINE

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Felice Valle
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1 QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A in Wine Cat. # OTA-WINE Manuale d uso Via San Geminiano, San Prospero (MO)- Italy : : : immunolab@generon.it : 0

2 1 Matrice analizzabile Il kit QuickTox è validato su vino. Il test fornisce risultati quantitativi nel range 0,4-3 ppb. L analisi deve essere condotta usando il software QuickScan in modalità di lettura dei segnali e il foglio di calcolo dedicato "GENERON-Ochratoxin-A". 2 Contenuto del kit Tubo contenente 50 strip QuickTox* 50 bicchierini (sacchetto blu) 100 puntali (sacchetto trasparente) 120 ml di Extraction Buffer for Wine (Cod.# OTA-EBW) Buffer DB3 * Le strip sono sensibili all umidità pertanto si consiglia di conservarle all interno del tubo ben chiuso (il tappo contiene silice disseccante). Evitare di piegare le strip in quanto questo compromette il normale flusso delle soluzioni. Generon può fornire anche tutti i materiali non presenti nel kit ma necessari ad eseguire l analisi (incubatore GX12458, provette per reazione ACC2510). 3 Principio del Test I campioni di vino frizzante devono essere degassati per rimuovere biossido di carbonio. Ciascun campione deve essere estratto con Extraction Buffer for Wine. L estratto ottenuto deve essere immediatamente diluito con Buffer DB3 per eseguire il test a 22 C. Ogni QuickTox Strip ha un tampone assorbente a ciascuna estremità e la freccia indica il lato della strip da inserire nel bicchierino per la reazione. Il campione migra attraverso la strip. Dopo 10 minuti di corsa effettuare la lettura con il QuickScan. I segnali SI devono essere inseriti nel foglio di calcolo "GENERON-Ochratoxin-A" per ottenere i risultai quantitativi. 4 Preparazione del Campione Nota: I campioni devono essere testati immediatamente dopo l estrazione. Assicurarsi che i campioni di vino, le strip, l Extraction Buffer for Wine e il Buffer DB3 siano a temperatura ambiente (20-25 C). Campionamento Prelevare, dopo aver agitato vigorosamente, un campione rappresentativo in accordo con il suo piano di campionamento. È comunque raccomandato prelevare almeno 750 ml di campione. [1] Manuale d uso - QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A - Rev. 8-20/06/2017

Degassamento (se il campione è vino frizzante) Trasferire 20 ml di campione in un tubo da centrifuga da 50 ml e agitare vigorosamente a mano per 30 secondi; aprire il tubo per rimuovere biossido di

3 Degassamento (se il campione è vino frizzante) Trasferire 20 ml di campione in un tubo da centrifuga da 50 ml e agitare vigorosamente a mano per 30 secondi; aprire il tubo per rimuovere biossido di carbonio. Ripetere 3 volte. Estrazione del campione Trasferire 5 ml di vino degassato in un tubo da centrifuga da 15ml o da 50ml. Nel puntale della pipetta non devono essere presenti bolle; in caso contrario ripetere lo step di degassamento. Agitare per 20 secondi l Extraction Buffer for Wine. Aggiungere 2 ml di Extraction Buffer for Wine nel tubo da centrifuga contenente il vino degassato. Chiudere il tubo e agitare vigorosamente a mano per 30 secondi. Filtrare il campione con carta da filtro o, in alternativa, centrifugare per 5 minuti a 2000 g e prelevare il surnatante. Diluire il campione con Buffer DB3 Settare l incubatore (GX12458) a 22 C Inserire la provetta per la reazione (ACC2510) nell incubatore Con un puntale trasferire 50 μl di Buffer DB3 nella provetta Con un nuovo puntale, prelevare 200 μl di campione e aggiungerlo alla provetta contenente il Buffer DB3; mescolare bene con la pipetta prelevando e rilasciando la soluzione nel puntale Acclimatare 2 minuti a 22 C NOTA: I campioni non accuratamente mescolati e/o pipettati influenzeranno negativamente i risultati del test. Dopo aggiunta del campione, il volume finale nel contenitore di reazione deve essere di 250 μl. Non riutilizzare campioni diluiti. Usare sempre un nuovo bicchierino/provetta e due nuovi puntali per ogni test. 5 Esecuzione del QuickTox Strip Test 1. Mettere la strip nel bicchierino contenente Buffer DB3 e campione estratto. La freccia all estremità della strip indica il lato da inserire nel bicchierino. 2. Attendere 10 minuti. 3. Tagliare immediatamente e buttare l estremità della strip coperta dal nastro con la freccia. 4. Inserire la strip nel QuickScan per la lettura. [2] Manuale d uso - QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A - Rev. 8-20/06/2017

6 Lettura con il QuickScan Note: per la lettura il software QuickScan deve essere in modalità di lettura dei segnali. In caso di dubbi, contattare Generon S.p.A. (immunolab@generon.it).

Inserire le strip nel carrello con il codice a barre rivolto verso il basso e vicino all impugnatura. Inserire Il carrello nel lettore e leggere le strip cliccando su "Read Test".

Inserire manualmente i valori REF indicati nel Certificato di Qualità (fornito nel kit) nelle celle arancioni.

I risultati in ppb vengono calcolati automaticamente nella colonna corrispondente.

4 6 Lettura con il QuickScan Note: per la lettura il software QuickScan deve essere in modalità di lettura dei segnali. In caso di dubbi, contattare Generon S.p.A. Le istruzioni per l utilizzo del sistema QuickScan sono fornite con lo strumento e sono disponibili sul sito Inserire le strip nel carrello con il codice a barre rivolto verso il basso e vicino all impugnatura. Inserire Il carrello nel lettore e leggere le strip cliccando su "Read Test". È ora possibile vedere i valori SI nelle celle corrispondenti. Leggere il valore SI 7 Calcolo dei Risultati Per il calcolo dei risultati usare il foglio di calcolo "GENERON-Ochratoxin-A". 1. Inserire manualmente i valori REF indicati nel Certificato di Qualità (fornito nel kit) nelle celle arancioni. Questi valori sono lotto-specifici e non possono, quindi, essere utilizzati con lotti diversi. 2. Inserire manualmente i valori SI ottenuti dalla lettura dei campioni nelle celle gialle. 3. I risultati in ppb vengono calcolati automaticamente nella colonna corrispondente. Inserire I valori REF indicati nel CQ Inserire I valori SI dei campioni Vedere i risultati del test I risultati sono riportati nell intervallo da 0,4 a 3 ppb. Risultati inferiori a 0,4 ppb sono riportati come <0,4" e risultati maggiori di 3 ppb sono riportati come "> 3 ppb". 8 Conservazione del kit Il QuickTox Kit deve essere conservato a 2-8 C. La scadenza è indicata sulla scatola del kit. L esposizione prolungata ad alte temperature può influenzare negativamente i test. [3] Manuale d uso - QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A - Rev. 8-20/06/2017

5 9 Dichiarazione di non responsabilità Generon S.p.A. non si assume responsabilità di alcun tipo, esplicite o implicite, eccetto garantire che i materiali di cui i propri prodotti si compongono sono di qualità standard. In caso di materiale difettoso, Generon S.p.A. si impegna a fornire un prodotto sostitutivo. Generon S.p.A. non è tenuta a rispondere per qualunque danno, inclusi danni speciali o consequenziali o spese che derivano direttamente o indirettamente dall uso di questo prodotto. L acquirente può duplicare questo documento, in tutto o in parte, solo per scopi interni, a condizione che questa nota venga riportata in tutte le copie. Nella duplicazione l acquirente si impegna a compiere ogni ragionevole sforzo per impedire l'uso non autorizzato e la distribuzione delle informazioni sulla proprietà. [4] Manuale d uso - QuickTox TM Kit for QuickScan Ochratoxin-A - Rev. 8-20/06/2017

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