IL LABORATORIO NELL ACCERTAMENTO DI TOSSICODIPENDENZA

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1 IL LABORATORIO NELL ACCERTAMENTO DI TOSSICODIPENDENZA Alberto Dall Aglio Azienda USL di Parma Laboratorio Analisi P.O. Vaio - Fidenza CHE FA IL LABORATORIO? 1:ACCETTA I CAMPIONI BIOLOGICI PERVENUTI 2:EFFETTUA IL/I TESTS RICHIESTI (ANALISI SU MATRICI BIOLOGICHE DI PROVENIENZA UMANA) 3:CONSERVA,IN CASO DI POSITIVITA I CAMPIONI BIOLOGICI 1

2 ACCETTAZIONE CAMPIONI 1:La responsabilita della richiesta di esami tossicologici e pertinenza del medico richiedente 2:l attivazione della catena di custodia per la garanzia dell autenticita dei campioni(normalmente 3) e la loro inviolabilita (sigilli) e del servizio richiedente 3:Al laboratorio spetta verificare e certificare la rispondenza dei primi 2 punti Catena di custodia Documentazione accompagnante il campione e che riporta notizie su modalita di prelievo,trasporto e conservazione.in particolar modo,il modulo deve consentire di ricostruire l iter del prelevato fin dalla raccolta seguendo le date e firme del personale che lo ha preso in carico di volta in volta 2

3 ANALISI TEST DI PRIMO LIVELLO(SCREENING) Servono esclusivamente ad escludere i campioni negativi(conc.<cut-off indicato dalla ditta produttrice.metodiche immunochimiche senza valore medico-legale) TEST DI CONFERMA Metodiche cromatografiche + Spettrometria di massa Sostanze da dosare (Screening) OPPIACEI METADONE BUPRENORFINA CANNABINOIDI COCAINA BENZODIAZEPINE AMFETAMINE ETANOLO 3

4 Matrici biologiche-screening 1 Urina:La piu usata. Consente di analizzare le sostanze e i metaboliti anche diversi giorni dopo l assunzione(fino ad un mese) 2 Sangue: Dimostra esposizione recente,richiede consenso informato del paziente.e utilizzata per uso forense in infrazioni dell art.186 e 187 del codice stradale 3 Matrice cheratinica(capelli): Positiva anche a diversi mesi dopo l assunzione.l utilizzo richiede personale esperto Test di screening Vantaggi: Utilizzo matrice urinaria senza pretrattamento(sangue per dosaggio etanolo) Automatizzabili(risposta rapida) Esclusione dei negativi Risultati espressi in termini qualitativi o semi-quantitativi(di facile interpretazione?) 4

5 Test di screening Limiti: Aspecifici:non rilevano la sostanza ma solo la categoria di appartenenza(es. la presenza di oppiacei non specifica se la sostanza e morfina,eroina o codeina) Possibili falsi positivi per sostanze interferenti Solo uso clinico epidemiologico Inutilizzabili per rivelare sostanze di nuova introduzione Test di screening Sostanze classificate droghe non rilevabili con indagini di 1 livello: Mcpp: piperazina assimilabile all ecstasy GHB:gammaidrossibutirrico(droga stupro) Levamisole :antiparassitario associato a cocaina JWH:cannabinoidi sintetici KHAT:alcaloide ad azione stimolante Fentanyl :oppiode analgesico sostituto dell eroina 5

6 TEST DI CONFERMA Servono a verificare la presenza di eventuali falsi positivi nei test iniziali Caratteristiche: Specificita per il singolo analita Limiti di rilevabilita inferiori ai cut-off dei test preliminari Principi chimico fisici diversi dai test di primo livello Utilizzabili in ambito tossicologico-forense TEST di Conferma Metodi definitivi,quando a metodiche ad alta capacita separativa(cromatografia) vengono associate metodiche altamente specifiche(spettrometria di massa) Non automatizzabili: necessitano spesso di interventi di pretrattamento del campione La loro esecuzione richiede personale dedicato ed esperto 6

7 Conservazione del campione La durata del periodo di conservazione del campione(in congelatore) e regolata dall organizzazione interna del laboratorio compatibilmente coi tempi di risposta dello stesso In genere e sufficiente un periodo di 90gg. Per consentire all utenza un eventuale richiesta di ricontrollo In laboratori di esclusiva indagine tossicologica il periodo di conservazione puo avere la durata di un anno Tipologia del lab. Di tossicologia Laboratorio di 1 livello(solo screening) Tipo di analisi:quali- e/o semiquantitativa Matrici biologiche:urina,plasma,(capelli?) Sostanze ricercate:elencate in diapositiva 5 Metodiche:immunochimiche Cut-off:del produttore del kit utilizzato Controllo di qualita :obbligatorio,interno ed esterno Catena di custodia:prevista se vengono testati campioni a valenza medico-legale 7

8 Tipologia del laboratorio di tossicologia Laboratorio di 2 livello:che esegue anche analisi di conferma: Tipo di analisi:c.s. con conferma gc-ms del 1 livello Matrici biologiche:c.s. con possibile conferma su qualunque matrice Sostanze ricercate:c.s. con conferma e quantificazione(piu altre sostanze di recente introduzione) Metodiche:immunochimiche,gc-ms per conferme tossicologicheforensi(continua..) Tipologia del laboratorio di tossicologia Secondo livello: Cut-off:previsti solo per i test di primo livello.il limite di rilevabilita del test di conferma deve essere di almeno un ordine di grandezza inferiore rispetto al cut-off del test iniziale Controllo di qualita :documentato con partecipazione a VEQ in grado di identificare e quantificare il singolo analita Catena di custodia:tassativa 8

9 Conclusioni Il laboratorio ha il compito di accertare o escludere tossicodipenza mediante: 1 verifica del rispetto delle procedure di prelievo campione 2 analisi dello stesso secondo procedure standardizzate e validate,sottoposte a controllo di qualita,per ridurre al minimo eventuali errori 3 il rispetto del singolo,comunicando i risultati in tempi utili,permettendo allo stesso di avviare procedure di tutela 9