Scaricato da Sviluppo linfocitario
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- Regina Benedetti
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1 Sviluppo linfocitario
2 sviluppo linfocita T -Indipendente dall'antigene non-self idiotipo TCR repertorio CD3 coorecettori CD4 CD8 Cellule con TCR verso le MHC autologhe: restrizione per le molecole MHC differenziamento isotipo molecole accessori CD2 recettori per Ligandi CD28 CD154 CD45 LFA1 CD25 selezione positiva 2% Cellule specifiche verso molecole autologhe Cellule che non sviluppano recettori selezione negativa 98%
3 Lo sviluppo del linfocita T o B si produce in presenza degli antigeni self, propri, Lo sviluppo dei linfociti T è legato all' MHC autologo presente nel timo dipendente dall'ag-self
4 Sviluppo linfocitario Cellula Cellula staminale staminale ematopoietica midollo osseo Precursore Precursore eritro-mieloide comune comune Precursore Precursore linfocitario linfocitario comune comune Monocita PERIFERIA Cellula Dendritica, Macrofagi, (APC professiona Scaricato da li) ecc. Cellula Dendritica Linfociti B Linfonodi Linfociti NK Timo Timo Linfociti T
5 Lo sviluppo embrionale Timo tasca faringea 3 4 fessura branchiale canale faringo brachiale canale ectobrachiale endoderma ectoderma epitelio midollare epitelio corticale
6 T I M O organo linfatico primario
7 Lo sviluppo del Timo è necessario per lo sviluppo dei linfociti T atrofia atrofia timica timica o o atimia atimia alterazioni nell'uomo nel topo sindrome di Di George ( 22q11del) gene per il fattore T-Box1 la distruzione del timo sperimentale in età neonatale influenza la zona corticale paracorticale del linfonodo topo nudo follicolo primario Timo dipendente capsula corticale follicolo secondario centro germinativo Il Il trapianto di di timo timo in in topo topo nudo nudo ripristina lo lo sviluppo di di linfociti T
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9 Prime tappe per per la la scelta verso la la maturazione linfocitaria T : NOCTH1 > HEB/E2A NK: NOCTH1 > ID2 pdc: HEB/E2A
10 c-kit decisione B o T sviluppo stimolo dalle cellule epiteliali IL7
11 CD3 CD8 CD DP CD3 CD8 CD4 SP CD3+ CD8+ CD3+ CD4+
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16 TREC
17 Il Il gene gene delle delle regioni regioni variabili variabili del del TCR TCR è è composto composto da da numerosi numerosi tratti tratti esonici esonici Locus β Chr7 5' L V β1 n>75 = L Vβ n Chr14 Locus α δ n=50 5' L V α L V α Dβ 1 n=6 J βn C β1 n>70 J n Dβ 2 n=6 J βn 3' Cβ 2 Cα 3' n=3 Dδ n J δn L Vδ n n=3 n=3 C δ L V δ4 Locus γ Chr7 5' L V 1 n>8 = L Vn n=3 J γn C γ1 n=2 J γn Cγ 2 regione Variabile regione Costante
18 Locus 5' β Chr7 L V β1 n>75 = L Vβ n Dβ 1 n=6 J βn C β1 Dβ 2 n=6 J βn Cβ 2 3' L V β1 n-1=5 Dβ 1 J βn-1 5' n>75 = L Vβ n Dβ 1 J β6 C β1 Dβ 2 n=6 J βn Cβ 2 n>75 = L Vβ n 5' L V β1 Dβ 1 J β6 C β1 Dβ 2 J βn Cβ 2
19 DN topi trangenici inducono il blocco di sviluppo del recettore di tipo diverso
20 i i segnali segnali provenienti provenienti dalla dalla superfice superfice del del linfocita linfocita producono: producono: sopravvivenza differenziamento proliferazione esclusione esclusione allelica allelica molecole di adesione: CD4 4=super famiglia Link, lega acido ialuronico super famiglia Ig, integrine, selectine, addressine, recettore per Fattori di Crescita ckit IL7R famiglia recettori TNF pre TCR TCR
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22 I fattori Repressori deacetilazione metilazione I fattori trascrizionali silenziamento genico acetilazione accessibilità della polimerasi
23 Selezione Selezione positiva positiva topo irradiato MHC a cellule midollo donatore eterozigote MHC axb sviluppa cellule T con TCR ristretto MHC a rispondono solo verso antigeni su APC MHC a topo nudo MHC axb trapiantato con timo MHC a rispondono solo verso antigeni su APC MHC a Selezione dovuta a cellule del TIMO
24 Restrizione per per MHC avviene nello nello sviluppo timico trapianto di cellule midollo MHC a in topi MHC b non avranno una risposta corretta verso le APC le APC derivano dal midollo APC a selezione positiva = restrizione per MHC coincidono nello sviluppo timico
25 topo MHC axb topo MHC a midollo MHC axb Le Le cellule cellule derivate derivate dal dal midollo midollo sono sono capaci capaci di di promuovere promuovere la la selezione negativa topo MHC a topo MHC axb topo MHC b topo MHC a APC MHC axb trapianto cute topo MHC axb topo MHC b trapianto tollerato topo MHC a APC MHC axb
26 le le cellule cellule timiche timiche promuovono la la selezione selezione negativa negativa dei dei Linfociti Linfociti CD4+ CD4+ Deossiguanosina Deossiguanosina Uccide Uccide cellule cellule originate originate del del midollo midollo osseo osseo
27 restrizione restrizione per per classe classe MHC MHC dovuta dovuta a a cellule cellule del del TIMO TIMO In In coltura coltura cellule timiche anti-cd8 T linf.cd4&cd8 T CD4 CD8 In In coltura coltura cellule timiche anti-cd4 T linf.cd4&cd8 T CD8 CD4 A Kruisbeck
28 TOPI TOPI KNOCKOUT CD8-4- CD8+ 4+ CD8+ CD4+ MHCI MHCII WT TOPO TOPO TRANSGENICO TCR H-2 k H-2d H-2 k CD8+ 4+ CD8+
29 H von Boehemer & P Kisielow, Science, 1990
30 ipotesi ipotesi dell'avidità dell'avidità ipotesi ipotesi del del segnale segnale diverso diverso culture culture d'organo d'organo timico timico fetale fetale +peptidi +peptidi timo da topi con difetti TAP TCR PEPTIDE MHC CD4/ CD8 TCR pept A MHC pept A TCR pept A MHC pept B in eccesso TCR pept A MHC solo
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34 Una via per il differenziamento B-cell e i fattori microambientali richiesti nel midollo osseo Haematopoietic stem cells (HSCs) haematopoietic multipotential progenitors (MPPs) Lymphoid-primed multipotential progenitors (LMPPs)
35 CD44 Ac. Ialuronico
36 CXCL12 (also known as SDF1 and PBSF) CXCL12 is CXC-chemokine receptor 4 (CXCR4)
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42 feto proliferazione linfociti B CD5+ CD72 neonato linfociti B CD5- adulto NFkB MHC II DR MHC II DR CD 10, CD40, CD38 NFkB NFkB MHC II DR MHC II DR CD 10, CD40, CD40, CD38, CD20 CD38, CD20, CD21 CD40, CD38, CD20, CD21 linfociti B convenzionali
43 proprietà B-1 B-2 Inizio produzione feto Dopo la nascita Flessibilità giunzionale tipo N poche estesa Repertorio V ristretto vario localizzazione Cavità(Peritoneo,pleura ) Organi linfoidi rinnovo auto-rigenerazione Dal midollo Produzione spontanea di Ig Alta Bassa Isotipi di Ig secreti IgM >>>IgG IgG IgA IgE > IgM Risposta ai polisaccaridi Sì non certa Agli antigeni proteici Non certa Sì Cooperazione con i T linfociti No Ipermutazione somatica Assente o bassa Alta Memoria Assente o bassa Sì Sì
44 Esclusione Esclusioneallelica allelica-idiotipica -idiotipica Editing Editingrecettore recettorecoinvolge coinvolgeiitratti trattidelle dellecatene catenekappa Kappaee Lambda Lambda Evasione Evasionealle alledelezione delezioneclonale clonale
45 Locus H box promotore box intensificatore n>200 = n>20 n>6 5' D n J n L V 1 P L V n P D 1 3' C espressione proteine regolatrici P P n>20 5' L V 1 P L V n P D 1 D n mrna J n mrna E 3' C riaggiamento DJ P P 5' L V 1 P L V n P D 1 mrna J 2 E J n mrna C 3' riaggiamento V-DJ V-DJ 5' P L V 1 P L V n D 1 J 2 J n mrna E C
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