Azienda USL di Modena Dipartimento di Patologia Clinica Unità Operativa Citopatologia Ospedale di Mirandola e Finale E. Direttore Raisi O.

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1 Azienda USL di Modena Dipartimento di Patologia Clinica Unità Operativa Citopatologia Ospedale di Mirandola e Finale E. Direttore Raisi O.

2 Il ruolo del Pap test Lo screening delle lesioni intraepiteliali della cervice uterina, attraverso il Paptest convenzionale, ha permesso di ridurre del 70-80% la mortalità per carcinoma del collo, tuttavia, la sensibilità del Pap-test resta migliorabile.

3 Citologia Convenzionale Si stima che la percentuale dei falsi negativi sia compresa fra il 5% e il 30% - errori di campionamento - errori di interpretazione. Con la citologia convenzionale solo una parte delle cellule prelevate viene strisciata sul vetrino, il resto delle cellule viene gettato insieme al dispositivo di prelievo.

4 Citologia in fase liquida Liquide Based Cytology (LBC) La citologia in fase liquida (Thin Prep) migliora la rappresentatività del preparato e la qualità dell analisi citologica. Tecnologia approvata dalla F.D.A. nel 1996.

5 VANTAGGI Standardizzazione dei campioni ottenuti Diminuzione degli inadeguati (3,1% vs 1,8% ) Aumento della sensibilità con aumento delle lesioni CIN 2+ Riduzione dei tempi di lettura ed aumento della produttività Possibilità di indagini ancillari Lettura computer assistita

6 SVANTAGGI Riaddestramento del citopatologo Aumento iniziale degli ASCUS Costo

7 LBC Citologia in fase liquida Citologia Convenzionale Monostrato di cellule (3,5 cm²) Sovrapposizione delle cellule (12,5 cm²)

8 LETTERATURA Molti studi documentano la più alta frequenza diagnostica di SIL riscontrata con la LBC rispetto al convenzionale. In particolare Arbyn (2004) osserva che il rapporto ThinPrep / Convenzionale è pari a 1.72 per HSIL+. Studio pubblicato da Schorge e coll. (Cancer Cytopathol) 2002; 96: ) ha dimostrato che Il ThinPrep PaTest è più sensibile nell individuazione dell adenocarcinoma cervicale ed endometriale rispetto allo striscio convenzionale.

9 LAB. CITOPATOLOGIA MIRANDOLA CASI POSITIVI INADEGUATI N CASI % CITOLOGIA FASE LIQUIDA (LBC) % CITOLOGIA CONVENZIONALE AGC\AIS CTM H-SIL ASC-H L-SIL ASCUS

10 LBC: Descrizione del sistema Prelievo ginecologico: utilizza il Cervex- Brush o la spatola di plastica e il Cytobrush Lo strumento di prelievo va immerso e ruotato efficacemente nel contenitore con liquido preservante (PreservCyt) Gettare il dispositivo di prelievo e chiudere il contenitore fino alle tacche di riferimento Attaccare sul barattolo l etichetta con il Barcode

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12 Soluzione PreservCyt Soluzione tamponata a base di metanolo Da 15 a 30 C per due anni (senza campione cellulare) Da 4 a 37 C per sei settimane (con il campione cellu lare) Ideale per la conservazione di acidi nucleici e proteine. Il DNA è stabile a temperatura ambiente per diversi anni, ciò permette studi molecolari retrospettivi e ricerca di HPV RNA stabile a temperatura ambiente per tre settimane Potere di inattivazione vs batteri e virus15 minuti Raccomandata dai migliori produttori di biologia molecolare: Digene Hybrid Capture II MTM CINtecTM P16INK4a Gen-Probe Aptima Roche Amplicor HPV

13 LBC: Descrizione del sistema Inviare il flacone e la scheda di accompagnamento al Laboratorio di Citopatologia Processo di preparazione del campione: 1) filtro che ruotando disperde sangue, detriti e muco; 2) raccolta delle cellule sul filtro con flusso controllato dal software del sistema; 3) trasferimento delle cellule sul vetrino (spot); 4) fissazione e colorazione.

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15 TP 3000 T 3000 aperto

16 Il processo ThinPrep Dispersione e risospensione Raccolta delle cellule Trasferimento sul vetrino

17 Convenzionale ThinPrep

18 Il vetrino ThinPrep

19 Lo screening richiede capacità di individuazione e di classificazione Dove sono le cellule di interesse diagnostico? Questa cellula è normale o anormale?

20 Razionale L incidenza di anomalie varia dal 5 al 7% La stragrande maggioranza dei pap test sono negativi ed incontrare campi ottici con cellule atipiche è un evento raro In queste circostanze è difficile mantenere un livello di attenzione elevato. L affaticamento può essere una delle cause di errori diagnostici. La progressiva riduzione del numero dei citologi rende importante un uso efficiente di questa categoria. Questa tecnologia ha il potenziale per migliorare la job satisfaction e la performance in questa importante area della medicina preventiva

21 Thin Prep Imaging System Il sistema assiste in modo interattivo il citologo nella lettura e nella diagnosi dei preparati ThinPrep Pap Test La diagnosi finale deve rimanere una responsabilità del Citologo e del Patologo. Migliora la produttività dello screening in quanto l automazione indirizza i citologi sulle aree più importanti del vetrino risparmiando tempo sui casi negativi

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23 Review Scope

24 L algoritmo OCS: Optical Cellular Selection E noto che le cellule anormali presentano nuclei più grandi contenenti copie extra di DNA Per identificare le cellule sospette da sottoporre al citologo l algoritmo OCS cerca gli oggetti più grandi e più scuri Normale Elimina i nuclei sovrapposti (troppo grandi e troppo scuri) Cerca i nuclei in clusters in quanto potrebbero essere cellule endometriali e/o endocervicali Anormale

25 Zona target Objects of Interest

26 Microscopio Integrated Imager

27 CONCLUSIONI Una pubblicazione di Dziura et al. (Acta Cytologica 2006) ha evidenziato la migliore performance del ThinPrep Imaging System nei confronti della lettura ThinPrep manuale nella individuazione delle lesioni squamose intraepiteliali di basso e di alto grado. La correlazione istologica ha dimostrato che questo incremento significativo è legato all individuazione di vera patologia e non ad un incremento di falsi positivi citologici Nelle conclusioni l Autore afferma che il ThinPrep Imaging System integra il cervello del computer con quello del citologo, creando un sistema interattivo in cui ogni cervello si occupa di ciò che sa fare meglio.

28 Grazie per l attenzione

29 CSC (%) LBC (%) Fase di Screening Casi Costo unitari o ( ) Costo totale Casi Costo Unitari o ( ) Costo totale Differenza LBC vs CSC (%) Prelievo e Trasporto (con Vial) , , , , % Richiamo per inadeguato 430 0,80 344, ,80 104, % Preparazione del test , , , , % Lettura del test , , , , % Colposcopia (con invito e biopsia) , , , % TOTALE , ,00 COSTO PER DONNA (10.000) 22,93 23,88 +4,2 % COSTO PER LESIONI CIN2+ (50) 3.822, ,00 +4,2 %