HI Fotometro per l analisi degli ZUCCHERI RIDUTTORI nel vino

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1 IN CONTATTO CON HANNA INSTRUMENTS Manuale di istruzioni Per qualsiasi informazione potete contattarci ai seguenti indirizzi: Padova viale delle Industrie, Ronchi di Villafranca (PD) Tel. 049/ Fax 049/ Milano via privata Alzaia Trieste, Cesano Boscone (MI) Tel. 02/ Fax 02/ Lucca via per Corte Capecchi, Lucca (frazione arancio) Tel. 0583/ Fax 0583/ Latina via Maremmana seconda traversa sx Sabaudia (LT) Tel. 0773/ Fax 0773/ latina@hanna.it Ascoli Piceno via dell Airone San Benedetto del Tronto (AP) Tel. 0735/ Fax 0735/ ascoli@hanna.it Salerno S.S. 18 km 82, Santa Cecilia di Eboli (SA) Tel. 0828/ Fax 0828/ salerno@hanna.it Cagliari via Parigi, Assemini (CA) Tel. 070/ Fax 070/ cagliari@hanna.it Palermo via B.Mattarella, Bagheria (PA) Tel. 091/ Fax 091/ palermo@hanna.it HI Fotometro per l analisi degli ZUCCHERI RIDUTTORI nel vino Assistenza Tecnica: w w w. h a n n a. i t MAN83746IR3 11/06 w w w. h a n n a. i t

2 Gentile Cliente, grazie di aver scelto un prodotto Hanna Instruments. Legga attentamente questo manuale prima di utilizzare la strumentazione, per avere tutte le istruzioni necessarie per il corretto uso dell apparecchiatura. Per qualsiasi necessità di assistenza tecnica, può rivolgersi all'indirizzo oppure al numero verde Questo apparecchio è conforme alle direttive. INDICE ESAME PRELIMINARE... 3 DESCRIZIONE GENERALE... 4 SPECIFICHE... 5 PRECISIONE E ACCURATEZZA... 5 PRINCIPIO DI FUNZIONAMENTO... 6 ABBREVIAZIONI... 7 DESCRIZIONE DELLE FUNZIONI... 8 GUIDA AI CODICI A DISPLAY... 9 ACCORGIMENTI PER UNA MISURA ACCURATA PROCEDURA DI MISURA SOSTITUZIONE BATTERIE ACCESSORI DICHIARAZIONE DI CONFORMITÀ CE GARANZIA LETTERATURA HANNA LETTERATURA HANNA Hanna pubblica un ampia gamma di cataloghi e manuali per un altrettanto ampia gamma di applicazioni. La letteratura al momento disponibile tratta le seguenti tematiche: Trattamento acque Impianti industriali Piscine Agricoltura Industria alimentare Laboratorio e molti altri. La nostra libreria è continuamente aggiornata con nuovo materiale. Per questi ed altri cataloghi, manuali e depliant, contattate il vostro rivenditore Hanna o il più vicino centro Hanna. Per trovare l ufficio Hanna a voi più vicino visitate il nostro sito Per qualsiasi necessità di assistenza tecnica ai prodotti acquistati contattateci al oppure via assistenza@hanna.it Tutti i diritti sono riservati. La riproduzione completa o di parti non è permessa senza consenso scritto da parte del proprietario dei diritti, Hanna Instruments Inc., Woonsocket, Rhode Island, 02895, USA. Hanna Instruments si riserva il diritto di modificare il progetto, la costruzione e l'aspetto dei suoi prodotti senza alcun preavviso 19

3 DICHIARAZIONE DI CONFORMITÀ CE Raccomandazioni per gli utenti Prima di usare questi prodotti assicurarsi che siano compatibili con l'ambiente circostante. L'uso di questi strumenti può causare interferenze ad altri apparecchi elettronici, in questo caso prevedere adeguate cautele. Ogni variazione apportata dall'utente allo strumento può alterarne le caratteristiche EMC. Per la sicurezza vostra e dello strumento non usare o conservare lo strumento in ambienti pericolosi. Per evitare danni od ustioni, non effettuare misure all'interno di forni a microonde. ESAME PRELIMINARE Rimuovere lo strumento dall imballaggio ed esaminarlo attentamente per assicurarsi che non abbia subito danni durante il trasporto. Se si notano dei danni, informare immediatamente il rivenditore. Ogni strumento HI è fornito completo di: 4 cuvette con tappo Reagenti per circa 20 test (HI 83746A-0 e HI 83746B-0) HI Carbone Pipetta automatica da 200 μl con 2 puntali in plastica Pipetta automatica da 1000 μl con 2 puntali in plastica Foglio di istruzioni per micropipetta 1 cucchiaino, 1 imbuto, filtri di carta (25 pz) Trasformatore 4 batterie alcaline 1,5V AA Panno per pulizia cuvette Manuale di istruzioni Certificato di qualità dello strumento Valigetta rigida GARANZIA Tutti gli strumenti HANNA instruments sono garantiti per due anni contro difetti di produzione o dei materiali, se vengono utilizzati per il loro scopo e secondo le istruzioni. HANNA Nord Est, distributore unico per l Italia dei prodotti HANNA instruments, declina ogni responsabilità per danni accidentali a persone o cose dovuti a negligenza o manomissioni da parte dell utente, o a mancata manutenzione prescritta, o causati da rotture o malfunzionamento. La garanzia copre unicamente la riparazione o la sostituzione dello strumento qualora il danno non sia imputabile a negligenza o ad un uso errato da parte dell operatore. Vi raccomandiamo di rendere lo strumento PORTO FRANCO al Vostro rivenditore o presso gli uffici HANNA al seguente indirizzo: HANNA Nord Est Srl viale delle Industrie Ronchi di Villafranca (PD) Tel: 049/ Fax: 049/ La riparazione sarà effettuata gratuitamente. I prodotti fuori garanzia verranno riparati solo in seguito ad accettazione da parte del cliente del preventivo fornito dal nostro servizio di assistenza tecnica, con spedizione a carico del cliente stesso. Nota:Conservare il materiale di imballaggio fino a che non si è sicuri del corretto funzionamento dello strumento. Qualsiasi prodotto difettoso deve essere restituito completo di tutte le parti nell imballaggio originale. 18 3

4 DESCRIZIONE GENERALE HI è uno strumento portatile a microprocessore che nasce dalla pluriennale esperienza Hanna nella progettazione e produzione di strumenti analitici. Grazie ad uno speciale sistema ottico basato su di una lampada a tungsteno e ad un filtro di interferenza a banda stretta, è possibile eseguire misure accurate e ripetibili. Tutti gli strumenti sono calibrati in fase di produzione. Il sistema autodiagnostico di questo strumento assicura sempre delle condizioni di misura e delle letture ai massimi livelli. L intensità della luce viene regolata automaticamente ogni volta che viene effettuato lo zero, e anche la temperatura della lampada è controllata per evitare fenomeni di sovrariscaldamento. APPLICAZIONE La determinazione della concentrazione degli zuccheri riduttori è uno dei parametri più importanti da misurare durante il processo di produzione del vino. Seguendo l aumento di tali zuccheri durante la maturazione dell uva, è possibile decidere il periodo migliore per la vendemmia. È infatti molto importante avere il più alto contenuto di zuccheri possibile che determina poi il valore commerciale dell uva. Invece durante la fermentazione alcolica, è possibile seguire la diminuzione di concentrazione degli zuccheri per valutare il completamento della fermentazione, o decidere interventi correttivi se il contenuto di zuccheri è troppo basso al fine di ottenere il grado alcolico o dolcezza desiderati. Gli zuccheri riduttori maggiormente presenti nell uva sono glucosio e fruttosio (esosi). Dopo la reazione con un tartrato cuprico alcalino (reagente di Fehling, il contenuto di zuccheri riduttori può essere determinato per via colorimetrica. Il metodo di Fehling non da una determinazione esatta ma un indice della concentrazione degli zuccheri riduttori, poichè la reazione dipende sia dalla quantità che dal tipo di zuccheri presenti. Quando il contenuto di zuccheri riduttori è noto all inizio della fermentazione, è possibile stimare il grado alcolico potenziale moltiplicando la concentrazione di zuccheri (espressi in g/l) per I fenoli interferiscono nella reazione di Fehling e quindi i vini rossi devono essere decolorati prima di effettuare l analisi. Il vino può contenere anche zuccheri riduttori non fermentabili come i pentosi che possono anch essi essere determinati con questo metodo. Contenuto tipico di zuccheri riduttori in mosto e vino Mosto mosto dolce % g/l normale % g/l in fermentazione % g/l Vino dolce % g/l semidolce % 8-25 g/l abbastanza secco % 2-8 g/l secco % 0-2 g/l 4 SOSTITUZIONE BATTERIE La sostituzione delle batterie deve essere fatta in un luogo sicuro e privo di rischi. Il simbolo lampeggiante compare quando le batterie si stanno scaricando. Quando le batterie sono completamente scariche, a display compare la scritta 0% batt e subito dopo lo strumento si spegne automaticamente. Rimuovere il coperchio del vano batterie posto sul retro dello strumento e sostituire le 4 batterie con altrettante 4 da 1.5V, facendo attenzione alla corretta polarità. Riposizionare il coperchio del vano batterie. ACCESSORI REAGENTI HI Reagenti per zuccheri riduttorit (circa 20 analisi) HI Charcoal per decolorazione del vino rosso (circa 100 analisi) ALTRI ACCESSORI HI Reattore HI Portaprovette (25 postazioni) HI Schermo di protezione HI Cuvette in vetro (4 pz) HI Pipetta automatica 200 μl HI Puntali in plastica per pipetta da 200 μl (25 pz) HI Pipetta automatica 1000 μl HI Puntali in plastcia per pipetta da 1000 μl (25 pz) HI Carta da filtro I (100 pz) HI W Tappi per cuvette (4 pz) HI Soluzione pulizia cuvette (230 ml) HI P Batterie da 1.5V AA(10 pcz HI Trasformatore da 230V a 12 Vdc 17

5 Se la concentrazione attesa di zuccheri riduttori è inferiore a 5.00 g/l rifarsi alle seguenti istruzioni. Preriscaldare il reattore Hanna HI a 105 C. Per il corretto utilizzo rifarsi al manuale di istruzioni del reattore. Si raccomanda di utilizzare lo schermo protettivo opzionale HI Non utilizzare stufe o forni a microonde. Rimuovere il tappo da 2 fiale HI 83746A-0 soluzione Fehling A. Utilizzare la micropipetta HI da 1000 μl per aggiungere esattamente 1 ml di soluzione Fehling B HI 83746B-0 ad ogni fiala. Per il corretto utilizzo della pipetta automatica seguire le relative istruzioni. campione di vino 1 ml acqua deionizzata 1 ml SPECIFICHE Scala Risoluzione Precisione Sorgente luminosa Detector Metodo Condizioni d uso Alimentazione Dimensioni Peso da 0.00 a g/l 0.25 g/l ±0.50 a g/l Lampada a tungsteno con filtro interferenziale a banda stretto a 610 nm Fotocellula in silicio Metodo di Fehling da 0 a 50 C; UR max 95% senza condensa batterie 4 x 1,5 volt AA / da 12 a 20 Vdc co trasformatore 224 x 87 x 77 mm 512 g REAGENTI RICHIESTI Codice Descrizione Quantità/test HI 83746A-0 Soluzione Fehling A 1 fiala HI 83746B-0 Soluzione Fehling B 1 ml Utilizzare la pipetta automatica HI da 1000 μl per aggiungere esattamente 1 ml (1000 μl) di campione di vino in una fiala (campione) e 1 ml di acqua deionizzata nell altra fiala (bianco). Campione Bianco REAGENTI OPZIONALI Codice Descrizione Quantità/test HI Charcoal, carbone in polvere 2 cucchiaini PRECISIONE ED ACCURATEZZA Riposizionare il tappo e capovolgere le fiale più volte per mescolare. Pulire bene le fiale con un panno morbido. Procedere con le istruzioni riportate a pagina 14 e 15. La concentrazione visualizzata a display deve essere divisa per 4 per ottenere il valore corretto in g/l di zuccheri riduttori. La precisione si riferisce alla concordanza di lettura tra una misura e l altra. La precisione è solitamente espressa come deviazione standard (SD). L accuratezza si riferisce alla vicinanza del valore misurato rispetto al valore vero. Sebbene una buona precisione suggerisca una buona accuratezza, le misure precise possono essere inaccurate. L illustrazione chiarisce queste definizioni. In laboratorio utilizzando una soluzione standard a g/l di zuccheri riduttori e un lotto rappresentativo del reagente, l operatore ottiene una deviazione standard di ±0.50 g/l. 16 5

6 PRINCIPI DI FUNZIONAMENTO L assorbimento della luce è un tipico fenomeno di interazione tra radiazione elettromagnetica e materia. Quando un fascio di luce attraversa una sostanza, parte della radiazione può essere assorbita da atomi, molecole. Nel caso di solo assorbimento, la frazione di luce assorbita dipende sia dalla lunghezza del cammino ottico attraverso la materia e dalle caratteristiche chimico fisiche della sostanza secondo la legge di Lambert-Beer: -log I/I o = ε λ c d o A = ε λ c d dove: -log I/I o = Assorbanza (A) I o = intensità del fascio di luce incidente I = intensità del fascio di luce dopo l assorbimento ε λ = coefficiente di estinzione molare alla lunghezza d onda λ c = concentrazione molare della sostanza d = cammino ottico attraverso il campione In questo modo la concentrazione "c" può essere calcolata dall assorbanza della sostanza una volta noti gli altri fattori. L analisi chimica fotometrica si basa sulla possibilità di sviluppare, attraverso una reazione chimica specifica tra campione e reagenti, un composto che assorba. Dato che l assorbimento di un composto dipende strettamente dalla lunghezza d onda del fascio di luce incidente, è possibile selezionare una larghezza di banda spettrale ristretta per centrare l appropriata lunghezza d onda ed ottimizzare le misure. Il sistema ottico degli strumenti Hanna serie HI è basato su di una speciale lampada in tungsteno miniaturizzata e su di un filtro interferenziale a banda stretta per garantire ottime prestazioni e risultati affidabili. Premere il tasto ZERO e ---- lampeggia a display. Dopo alcuni secondi il display visualizza Lo strumento è azzerato e pronto per le misure. Rimuovere la fiala del bianco. Inserire la fiala del campione nello strumento. Nota: non agitare o capovolgere la fiala per non creare torbidità. Premere il tasto READ e a display compare ---- durante la misura. Lo strumento visualizza direttamente la concentrazione in g/l (ppt) di zuccheri riduttori a display. Se la concentrazione di zuccheri riduttori è inferiore a 5 g/l, si raccomanda di ripetere l analisi seguendo le istruzioni riportate a pagina 16. La concentrazione visualizzata a display dovrà poi essere divisa per 4 per ottenere il valore corretto in g/l di zuccheri riduttori. Campione Nota Nell analisi dei mosti, per convertire il valore degli zuccheri riduttori da g/l a percentuale, moltiplicare la lettura per 0.1. es. 12.5g/l x 0.1=1.25%. Per calcolare il potenziale grado alcolico moltiplicare la lettura di zuccheri (g/l) per es. 175g/l x 0.06=10.5% vol (grado alcolico potenziale) 6 15

7 Inserire le fiale nel reattore e scaldarle per 7 minuti a 105 C. Nota: per ottenere risultati più accurati, si raccomanda di utilizzare il timer preprogrammato dello strumento, e di rimuovere le fiale dal reattore esattamente dopo 7 minuti. Accendere lo strumento premendo il tasto ON/OFF e premere il tasto TIMER per attivare il conto alla rovescia di 7 minuti. Alla fine del periodo di digestione spegnere il reattore, posizionare con cura le fiale nel portaprovette e attendere 10 minuti. Attenzione: maneggiare le fiale con cura in quanto molto calde. Nota: se il campione appare marrone/arancio invece che blu, diluire il campione di vino e ripetere la procedura. La lampada, regolata da un microprocessore, emette una radiazione che viene prima condizionata e poi direzionata verso il campione contenuto nella cuvetta. Il cammino ottico è fissato dal diametro della cuvetta. La radiazione viene poi filtrata per ottenere una larghezza di banda spettrale ridotta, risultante in un fascio di luce di intensità I o o I. La cella fotoelettrica riceve la radiazione I non assorbita dal campione e la converte in corrente elettrica, producendo un potenziale dell ordine dei mv. Il microprocessore converte questo potenziale nell unità di misura desiderata e la visualizza a display. Le operazioni di misura si dividono in due fasi principali: l azzeramento dello strumento prima e la misura poi. La cuvetta gioca un ruolo molto importante in quanto è un elemento del sistema ottico e necessita di particolari attenzioni. È molto importante che le cuvette utilizzate per l azzeramento e per la misura siano otticamente identiche in modo da fornire le stesse condizioni di misura. Dove non sia possibile avere due cuvette otticamente identiche si consiglia di utilizzare la stessa cuvetta per entrambe le operazioni. La superficie della cuvetta deve essere pulita e priva di graffi in modo da evitare interferenze dovute a riflessi o assorbimenti indesiderati della luce. Si raccomanda di non toccare le pareti delle cuvette con le dita. Infine, per mantenere le stesse condizioni sia durante la fase di azzeramento che di misura, è necessario tappare le cuvette per evitare possibili contaminazioni. Dopo 10 minuti capovolgere le fiale 2 volte per miscelare. Attendere poi 30 minuti perché le fiale si raffreddino a temperatura ambiente. Nota: questa operazione è necessaria per recuperare il liquido condensato dopo il riscaldamento. Accendere lo strumento premendo il tasto ON/OFF. Quando il display visualizza ---, lo strumento è pronto. Bianco ABBREVIAZIONI C: F: g/l: ml: μl: LCD: gradi Celsius gradi Fahrenheit grammi per litro. g/l è equivalente a ppt (parti per migliaia) millilitro microlitro display a cristalli liquidi Posizionare la fiala del bianco nello strumento. 14 7

8 DESCRIZIONE DELLE FUNZIONI DESCRIZIONE STRUMENTO FRONTE 1) Coperchio 2) Porta cuvetta 3) Display a cristalli liquidi 4) Tasto ON/OFF, per accendere/spegnere lo strumento 5) Tasto ZERO, per azzerare 6) Tasto TIMER, per attivare il conto alla rovescia 7) Tasto READ, per eseguire la misura 8) Alimentazione MISURAZIONI Nota: un singolo campione di bianco può essere utilizzato per più di una volta; il bianco è stabile per una settimana se conservato a temperatura ambiente e al buio. Utilizzare sempre lo stesso lotto di reagenti per bianco e campione. Per delle misure più accurate preparare un bianco per ogni nuovo set di misure. Note: se la concentrazione attesa di zuccheri riduttori è superiore a g/l (per esempio nelle analisi dei mosti), si raccomanda di diluire il campione 4 o 5 volte con acqua. se la concentrazione attesa di zuccheri riduttori è inferiore a 5.00 g/l, rifarsi alle istruzioni riportate a pagina 16. Preriscaldare il reattore Hanna HI a 105 C. Per il corretto uso del reattore vedere il relativo foglio di istruzioni. Si raccomanda di utilizzare lo schermo protettivo HI Non utilizzare stufe o forni a microonde. Rimuovere il tappo da due fiale di soluzione Fehling A HI 83746A-0. RETRO DESCRIZIONE DISPLAY Utilizzare la micropipetta HI da 1000 μl per aggiungere esattamente 1 ml di soluzione Fehling B HI 83746B-0 ad ogni fiala. Per il corretto utilizzo della pipetta automatica seguire le relative istruzioni. campione di vino acqua deionizzata 1) Display primario 2) Icona batteria: compare quando la batteria è quasi scarica 3) Icona clessidra: compare durante il conto alla rovescia 4) Informazione stato strumento 5) Unità di misura 6) Indicatore stato della lampada 7) Display secondario Utilizzare la pipetta automatica HI da 200 μl per aggiungere esattamente 200 μl di campione di vino in una fiala (campione) e 200 μl di acqua deionizzata nell altra fiala (bianco). Riposizionare il tappo e capovolgere le fiale più volte per mescolare. Pulire bene le fiale con un panno morbido. Campione Bianco 8 13

9 PROCEDURA DI MISURA PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PER VINI ROSSI Per rimuovere le interferenze date dai fenoli, i campioni di vino rosso devono essere trattati con carbone attivo. GUIDA AI CODICI A DISPLAY Questa schermata compare per alcuni secondi ogni volta che viene acceso lo strumento. Riempire una cuvetta con 10 ml di vino rosso. Aggiungere 2 cucchiaini di carbone decolorante HI alla cuvetta. Tappare la cuvetta e agitare vigorosamente per 2 minuti. Lasciare riposare poi per 3 minuti. Piegare il filtro di carta 2 volte come riportato in figura. Formare un cono ed inserirlo nell imbuto. x2 Queste schermate indicano il tipo di alimentazione: Line (se è collegato un alimentatore esterno) o il livello di batteria. Indica che lo strumento è pronto per operare ed è in attesa del prossimo comando (Timer o Zero). Dopo aver premuto il tasto Timer, compare il simbolo della clessidra lampeggiante ed inizia il conto alla rovescia di 7 minuti. A display compare anche il simbolo Zero lampeggiante se prima non è stato eseguito l azzeramento. Alla fine del conto alla rovescia un segnale acustico avvisa l operatore. Indica che lo strumento sta eseguendo l azzeramento. L intensità della luce viene automaticamente regolata (funzione di autocalibrazione) se necessario. Lo strumento è stato azzerato e si può effettuare la misura. Filtrare il vino trattato in una cuvetta vuota. Questo è il campione di vino. Nota: se il campione risulta ancora colorato ripetere l operazione. Indica che lo strumento sta eseguendo la misura. La batteria si sta scaricando e deve essere sostituita. 12 9

10 Indica che le batterie sono scariche ed è necessario sostituirle. Dopo la comparsa di questo messaggio, lo strumento si spegne automaticamente. Sostituire le batterie e riaccendere lo strumento. ACCORGIMENTI PER UNA MISURA ACCURATA Le istruzioni di seguito riportate dovrebbero essere seguite con attenzione durante la misura per ottenere la massima accuratezza. MESSAGGI DI ERRORE Lo strumento ha perso la configurazione. Contattare il proprio rivenditore o il più vicino centro assistenza Hanna. a) durante l azzeramento: Light high : la luce per eseguire la misura è eccessiva. Verificare la preparazione della cuvetta dello zero. Per dosare il campione di vino e il reagente, si raccomanda di utilizzare le pipette automatiche Hanna HI (200 μl) e HI (1000 μl). Per l utilizzo corretto di queste pipette, seguire quanto riportato nel foglio di istruzioni allegato. Tutti i tempi di reazione sono riferiti a temperature di 20 C. Come regola generale, tali tempi devono essere raddoppiati se si lavora a 10 C e dimezzati lavorando a 30 C (86 F). Pipetta automatica Hanna Light low : la luce per eseguire la misura non è sufficiente. Verificare la preparazione della cuvetta dello zero. No Light : la lampada non sta funzionando correttamente. Contattare il proprio rivenditore o il più vicino centro assistenza Hanna. b) durante la misura: Inverted : le cuvette dello zero e del campione sono state invertite. Il campione assorbe meno luce dello zero di riferimento. Verificare la procedura di preparazione del campione. Il valore massimo di concentrazione lampeggiante indica la condizione di fuori scala. La concentrazione del campione è superiore all intervallo programmato: diluire il campione e misurare nuovamente. 10 UTILIZZO DELLE FIALE Non inserire mai le fiale calde nello strumento, altrimenti si può danneggiare il porta provette. Per evitare la perdita di reagenti e ottenere i risultati più accurati possibile, si raccomanda di chiudere bene le fiale dopo l aggiunta del reagente e del campione. Quando la fila viene posta all interno dello strumento, questa deve essere asciutta, pulita e priva di impronte. Pulirla con cura con il panno HI o un analogo panno morbido. DIGESTIONE Si consiglia di utilizzare lo schermo protettivo opzionale HI Per il corretto utilizzo del reattore, vedere il relativo foglio di istruzioni. Alla fine del periodo di digestione le fiale sono molto calde: lasciarle raffreddare a temperatura ambiente sul porta provette opzionale HI