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West Nile Disease N. 6 24 settembre 2008 ore 18:00 Situazione epidemiologica 24 Settembre 2008 Ad oggi sono stati segnalati 16 cavalli che hanno avuto sintomatologia clinica riferibile a West Nile disease (WND) in 11 diverse aziende (indicate con un numero progressivo). Otto di queste aziende sono localizzate nella provincia di Ferrara, due in Provincia di Bologna ed una in Provincia di Rovigo (Figura 1). In una di queste aziende era stata precedentemente segnalata una sieroconversione in un cavallo sentinella. In Tabella 1 è riportato il dettaglio del numero di capi presenti nei focolai. A ciò occorre aggiungere che campioni di uccelli selvatici (gazze, cornacchie e un piccione selvatico) raccolti in provincia di Ferrara e in polli sentinella continua a pagina 2 Figura 1. Distribuzione geografica dei sospetti focolai. FOCOLAI CLINICI CONFERMATI FOCOLAI CLINICI SOSPETTI SIEROCONVERSIONI CAVALLI POSITIVITÀ UCCELLI (polli o selvatici) West Nile Disease 1

Tabella 1. Dettaglio dei casi nei focolai. Codice Azienda N. Cavalli Presenti Altri Equidi Presenti N. Cavalli con Sintomatologia N. Cavalli morti Azienda 1 3 1 1 0 Azienda 2 63 0 3 1 Azienda 3 11 0 1 0 Azienda 4 17 0 1 0 Azienda 5 4 5 1 0 Azienda 6 47 0 1 0 Azienda 7 23 0 1 0 Azienda 8 40 0 1 0 Azienda 9 82 0 2 0 Azienda 10 N.D. 0 2 0 Azienda 11 N.D. 0 2 0 Continua da pagina 1 esaminati nell ambito del piano di sorveglianza della WND hanno dato esito positivo alla PCR (le località sono indicate sulla mappa con l indicazione selvatici e polli ). Inoltre, in 2 aziende di cavalli (identificati con lettere nella mappa) scelte come sentinelle nell ambito del Piano di sorveglianza della WND, 5 cavalli, risultati negativi al test primaverile, hanno dato esito positivo ad un campionamento effettuato nei giorni scorsi. In Figura 2, infine, sono rappresentati gli esiti delle prove sierologiche (SN) effettuate su campioni di sentinelle bovine, allo scopo di delimitare l area di infezione. Figura 2. distribuzione geografica delle sentinelle bovine esaminate per WND. West Nile Disease 2

Analisi dettagliata Continua da pagina 2 I dati anamnestici e gli esami di laboratorio hanno evidenziato: Azienda 1 (comune di Ferrara FE): è l azienda dove è stato emesso il primo sospetto. I primi sintomi sono stati riscontrati in data 20-21 Agosto. Gli esami di laboratorio hanno confermato la presenza dell infezione (sieroconversione del cavallo alla SN da 1:5 a 1:80). Tutti e 3 i cavalli presenti hanno dato esito positivo all ELISA ed alla SN. Azienda 2 (comune di Ferrara FE): in questa azienda 3 cavalli hanno mostrato in date diverse sintomatologia clinica. Un primo cavallo è entrato in azienda il giorno 2/8/08. Al suo rientro da un concorso ippico il giorno 20/8/08 ha mostrato sintomi clinici. E stato subito trasferito alla Clinica Veterinaria della Facoltà di Medicina Veterinaria di Ozzano, dove è stato dimesso pochi giorni dopo a seguito di completa remissione dei sintomi. Il cavallo è stato rintracciato presso l allevamento di origine, in Provincia di Treviso, ed è stato sottoposto a prelievo. Gli esami sierologici hanno confermato la positività del solo capo che aveva soggiornato nell azienda di Ferrara escludendo una circolazione del virus nell azienda in provincia di Treviso. Un secondo animale è entrato nell azienda in data 2/8/08, ed ha iniziato a mostrare sintomi nervosi il giorno 7/9/08. Il giorno 8/9 è stato trasferito presso la Clinica Veterinaria della Facoltà di Medicina Veterinaria. Gli esami sierologici hanno dato esito positivo (sia ELISA che SN). Un terzo cavallo ha iniziato a mostrare sintomi nervosi il giorno 12/9/08. Il giorno successivo è stato trasferito presso la Clinica Veterinaria della Facoltà di Medicina Veterinaria dove è stato soppresso per la gravità dei sintomi. Gli esiti virologici effettuati sugli organi prelevati da tale animale hanno dato esito positivo in PCR. L isolamento del virus è in corso. Alla data del 11/09/08 in azienda erano presenti 62 cavalli di cui 24 positivi all ELISA, 26 alla SN e 8 positivi alla PCR. Azienda 3 (comune di Sant Agostino FE): in data 6/9/08 uno degli 11 cavalli presenti ha iniziato a mostrare sintomi nervosi. I campioni prelevati in azienda hanno data esito positivo in ELISA ed in SN nell animale con sintomatologia, mentre altri 8 cavalli dell azienda sono positivi in ELISA (di cui 6 in SN). Gli esami virologici hanno dato esito negativo. Azienda 4 (comune di Ferrara FE): in data 11/9/08 uno dei 17 cavalli presenti ha iniziato a mostrare sintomi clinici compatibili con WND. Gli esiti di laboratorio indicano la positività sierologica in ELISA ed SN del capo in questione e di altri 14 capi presenti in azienda. Azienda 5 (comune di Tresigallo FE): azienda che detiene 4 cavalli e 5 asini. Uno dei cavalli ha iniziato a mostrare sintomi clinici in data 12/09/08. Gli esiti di laboratorio ad oggi indicano una positività sierologia all ELISA ed alla SN nel capo in questione. Azienda 6 (comune di Trecento RO): In data 15/09/08 è stato segnalato che un cavallo aveva mostrato in Agosto sintomi clinici compatibili con WND, In azienda sono presenti 47 cavalli. Gli esami di laboratorio hanno fornito esito positivo in 19 e 21 dei cavalli presenti rispettivamente all ELISA ed alla SN. Azienda 7 (comune di Ferrara FE): sintomatologia clinica è stata segnalata in un cavallo alla fine di Agosto. Gli esiti di laboratorio hanno dato esito positivo all ELISA ed alla SN nel cavallo in questione. Azienda 8 (comune di Ostellato FE): un cavallo con sintomatologia nervosa riscontrata alla visita in data 15/9/08. Gli accertamenti diagnostici al momento hanno dato esito positivo all ELISA in 4 capi prelevati (incluso quello che aveva mostrato sintomatologia) e che erano negativi ad un precedente controllo del 26/4/08. Azienda 9 (comune di Malalbergo BO): 2 cavalli con sintomatologia nervosa iniziata in data 6/9/08. I due cavalli risultano ambedue positivi all ELISA ed alla SN. Azienda 10 (comune di Bentivoglio BO): 2 cavalli con sintomatologia nervosa rilevata in data 20/9/08. Gli esami di laboratorio sono in corso. Azienda 11 (comune di Codigoro FE): in questa azienda è stata riscontrata una sieroconversione West Nile Disease 3

continua da pagina 3 in 2 cavalli già testati in data 9/4/08 con esito negativo e che hanno dato esito positivo all ELISA ed alla SN in data 15/9/08. Altri 2 cavalli hanno iniziato a mostrare sintomatologia clinica compatibile a partire dal giorno 20/9/08. Definizione di caso di WND nel cavallo Caso sospetto di WND: equidi con atassia locomotoria o morte improvvisa in zona infetta oppure almeno due dei seguenti sintomi: Movimenti in circolo Debolezza arti posteriori Aziende sentinella con sieroconversioni in cavalli Incapacità a mantenere la stazione quadrupedale Paralisi/paresi agli arti Fascicolazioni muscolari Azienda A (comune di Lagosanto): un cavallo esaminato in data 24/4/08 con esito negativo è stato esaminato nuovamente in data 16/9/08 è ha dato esito positivo all ELISA ed alla SN. Azienda B (comune di Argenta): 2 cavalli già testati con esito negativo in data 2/4/08 sono risultati positivi all ELISA e alla SN in data 15/9/08. Deficit propriocettivi Cecità Ptosi labbro inferiore, o paresi/paralisi dei muscoli labiali o facciali Digrignamento dei denti Deve essere considerato come sospetto di West Nile anche un risultato sierologico positivo ad un test di screening in assenza di sintomatologia clinica nell'animale. Conferma La conferma del sospetto diagnostico avviene quando il campione prelevato dall animale sospetto risulta positivo ad uno dei seguenti esami di laboratorio effettuati dal CESME (Centro di Referenza Nazionale per le malattie Esotiche) RT-PCR su siero, sangue con EDTA, liquido cefalo rachidiano o tessuti nervosi ELISA diretta da sangue o organo Isolamento virale da sangue con EDTA o tessuti nervosi. ELISA-IgM da siero SN positiva oppure quando si evidenzia una positivizzazione all ELISA IgG o SN in un secondo prelievo effettuato a distanza di 7 gg, o un incremento di 2 log del titolo anticorpale tra due campioni di siero prelevati a distanza di almeno 3 settimane. West Nile Disease 4

Cosa fare in caso di sospetto In caso di sospetto il veterinario curante libero professionista deve: a) comunicare immediatamente all Azienda USL competente il caso riscontrato, b) prelevare comunque due campioni di sangue usando due provette: o provetta senza anticoagulante per l esame sierologico l effettuazione dei test diagnostici. In caso di positività i referenti diagnostici sono inviati al richiedente, al servizio veterinario della Regione di competenza e alla Direzione Generale della Sanità Animale e del Farmaco Veterinario. In caso di morte improvvisa degli equini il veterinario curante libero professionista dovrà informare le autorità competenti che provvederanno ad effettuare la necroscopia e i prelievi del caso. Per l isolamento del virus della West Nile gli organi di elezione sono il midollo allungato, il midollo spinale ed il liquido cefalorachidiano. o provetta con EDTA per i test virologici c) provvedere direttamente alla consegna del campione all'izs competente per territorio riportando sulla richiesta la corretta identificazione dell animale e dell azienda in cui l animale è detenuto, utilizzando le schede previste dal Decreto 29 Novembre 2007 del Ministero della Salute. I campioni sono inviati immediatamente al CESME per COME INVIARE I CAMPIONI Occorre attenersi alle disposizioni contenute nel Piano di sorveglianza della WND (decreto del Ministero della Salute 29 novembre 2007, GURI del 12.2.2008 L 36) e nella circolare del Ministero della Salute n. 3 del 8.5.2003, disponibile al seguente indirizzo http://www.izs.it/images/stories/ministero%20della%20salute%20-%20circolare%208%20magg.pdf. CONTATTI C ENTRO S TUDI M ALATTIE E SOTICHE (CESME) Centro Nazionale di Referenza per lo studio e l accertamento delle malattie esotiche degli animali riconosciuto con Decreto Ministeriale del 2 Maggio 1991. Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell'abruzzo e del Molise G. Caporale, Campo Boario, 64100 Teramo. Responsabile: Dott.ssa Rossella Lelli r.lelli@izs.it Tel: 0861 332230 Fax: 0861 332251 West Nile Disease 5