La Membrana plasmatica Plasmalemma: sottile rivestimento, con spessore di 5 nm (50 Å), che delimita la cellula in tutti gli organismi viventi, la separa dall'ambiente esterno e ne regola gli scambi con questo. Formata in prevalenza da lipidi (fosfolipidi) viene chiamata anche "doppio strato fosfolipidico". Nella componente lipidica si vanno a collocare, con importanti funzioni fisiologiche, proteine e una piccola percentuale di glucidi (glicoproteine e glicolipidi) e di molecole di colesterolo che la stabilizzano. Negli organismi procarioti è ricoperta da un rivestimento protettivo chiamato parete cellulare, assente invece negli eucarioti:nelle cellule eucarioti vegetali essa è presente sotto forma di una parete cellulare primaria (composta principalmente da peptina) e di una parete cellulare secondaria (composta principalmente da lignina).
MODELLO A MOSAICO FLUIDO Singer e Nicolson Modello a mosaico fluido (1972 da Singer e Nicholson): il doppio strato lipidico della membrana plasmatica è allo stato di liquido-cristallino ed in esso sono immerse numerose proteine, che grazie alla fluidità della componente lipidica presentano un notevole grado di mobilità; ad esse spetta lo svolgimento della gran parte delle funzioni di membrana. Il doppio strato lipidico non ha carattere omogeneo, ma piuttosto all'interno del mosaico fluido sono presenti microdomini lipidici meno fluidi (lipid rafts Simon e Ikonen, 1997), formati principalmente da sfingolipidi e colesterolo allo stato liquido-ordinato, che funzionerebbero sia da zattere di trasporto di componenti di membrana, sia da piattaforme per la genesi di segnali intracellulari, per cui in essi sono concentrate proteine specifiche.
Fluidità della membrana cellulare Esperimento di Frye e Edidin (1970)
MODELLO A MOSAICO FLUIDO
COMPATTAMENTO DEI LIPIDI IN AMBIENTE ACQUOSO
Funzioni: Compartimentalizzazione Regolare scambi esterno /interno Inviare segnali intracellulari e fra cellule Energia Reazioni enzimatiche catalizzate da enzimi inseriti nella membrana stessa Composti reattivi separati dal resto della cellula Concentrazione reagenti
Regolazione scambi esterno /interno Permeabilità del doppio strato fosfolipidico a sostanze diverse N 2 Triptofano O 2 Benzene H 2 O Glicerolo Urea Glucosio Cl- K+ Na+ 10-1 10-2 10-4 10-6 10-8 10-10 10-12 10-14 Coefficiente di permeabilità (cm/sec)
La membrana plasmatica è una barriera selettivamente permeabile tra il citoplasma e l'ambiente extracellulare. Questa caratteristica è conseguenza della composizione lipidica e proteica della membrana. Il doppio strato fosfolipidico permette il libero passaggio, dell'acqua, di gas (O2, CO2) e di piccole molecole liposolubili (prive di carica), come ammoniaca, urea, etanolo e glicerolo, mentre specifiche proteine di trasporto assicurano il passaggio di ioni e molecole idrosolubili (elettricamente cariche). Il trasporto delle sostanze attraverso la membrana può avvenire tramite: trasporto passivo (che avviene secondo gradiente e perciò senza dispendio di energia) trasporto attivo ( che avviene contro gradiente e perciò con dispendio di energia) Si distinguono inoltre uniporto, simporto e antiporto. Nell'uniporto si ha il trasporto di un'unica specie di soluto. Nel simporto e nell'antiporto si ha il trasporto accoppiato di due diverse specie di soluti: nel simporto il trasporto dei due soluti avviene nella stessa direzione, mentre nell'antiporto avviene in direzione opposta.
Trasporto Passivo: DIFFUSIONE SEMPLICE E DIFFUSIONE FACILITATA Diffusione semplice: le sostanze passano il doppio strato fosfolipidico senza l intervento di proteine (gas come O2 e CO2, sostanze liposolubili). Diffusione facilitata: le sostanze passano la membrana grazie a proteine. Due classi di proteine sono responsabili del trasporto passivo: carriers e i canali. I carriers mediano il trasporto di glucidi, aminoacidi e nucleosidi. Una volta legato il soluto nel compartimento ad alta concentrazione, il carrier va incontro ad un cambiamento conformazionale che permette il trasferimento del soluto nel compartimento a bassa concentrazione. Nel caso dei canali, le proteine formano dei pori nella membrana plasmatica, che consentono la diffusione di ioni o di piccole molecole idrosolubili di idoneo peso molecolare e carica elettrica. Fanno parte dei canali le acquaporine, che favoriscono il passaggio di molecole di acqua. L'apertura dei canali può essere regolata da recettori (canali ROC - Receptor Operated Channels), da secondi messaggeri (canali SMOC o Second Messenger Operated Channels) o dal potenziale elettrico della membrana (canali VOC o Voltage Operated Channels), cosicché il passaggio può essere finemente modulato.
Esempio di trasporto con carrier
Esempio di trasporto con canale
Trasporto Attivo: PRIMARIO E SECONDARIO Nel trasporto attivo primario: le proteine trasportano i soluti contro gradiente, utilizzando l'energia ottenuta dall'idrolisi dell'atp (ADP+P), per cui queste proteine sono dotate di attività enzimatica (ATPasi). Le pompe trasportano ioni, mentre i trasportatori ABC (ATP-binding cassettes) trasportano un'ampia gamma di molecole, compresi glucidi, aminoacidi e ioni. Il legame dell'atp alla proteina di trasporto permette il cambiamento conformazionale necessario al trasferimento del soluto.
Il doppio strato fosfolipidico è impermeabile agli ioni Necessità di proteine specifiche Consumo di energia per andare contro gradiente di concentrazione Pompa Sodio/potassio ATPasi
Nel trasporto attivo secondario: l'energia necessaria al trasporto di un soluto contro il suo gradiente di concentrazione non è fornita direttamente dall'atp, ma dall'esistenza di un gradiente elettrochimico del Na+ (o di H+) prodotto dalla rispettiva pompa ionica. Il trasporto attivo secondario è quindi indirettamente accoppiato ad un sistema di trasporto attivo primario, che genera il gradiente elettrochimico. Nel trasporto attivo secondario si ha, quindi, il trasporto accoppiato di due diverse specie di soluti: nel simporto il trasporto dei due soluti avviene nella stessa direzione, mentre nell'antiporto avviene in direzione opposta. Anche in questo caso il trasferimento dei soluti avviene grazie al cambiamento conformazionale della proteina trasportatrice, che è indotto dal legame dei soluti stessi.
Passaggio di molecole attraverso la membrana
Osmosi Diffusione dell acqua attraverso le membrane biologiche Le membrane biologiche sono semipermeabili
OSMOSI: particolare tipo di diffusione, movimento di solvente (acqua) attraverso una membrana semipermeabile l acqua si sposta da una regione a bassa concentrazione di soluti ad una in cui la concentrazione è più elevata PRESSIONE OSMOTICA: tendenza dell acqua pura a muoversi verso la soluzione per osmosi
Comportamento di cellule animali e vegetali in soluzioni a diversa concentrazione salina L importanza della parete rigida di cellulosa
ESOCITOSI ED ENDOCITOSI
Una giunzione cellulare, essendo il glicocalice (strato più esterno della membrana plasmatica) dotato di carica netta negativa che farebbe respingere le cellule una dall'altra, è una specializzazione di una faccia di membrana che rende possibile i processi di adesione tra due cellule. Due classi di contatti adesivi tra le cellule: Giunzioni Cellulari Prima classe composta da strutture non organizzate distribuite sulla superficie cellulare: Le calcio-indipendenti fanno uso sia di proteine transmembrana che esterne ad essa e ne esistono di tipi diversi in tessuti diversi. Le calcio-dipendenti, invece, fanno uso di tre tipologie di proteine: "caderine, integrine, selectine". Seconda classe, invece, è composta da complessi di adesione specializzati, in cui è possibile riconoscere strutture organizzate a livello funzionale. Nei vertebrati si distinguono in tre tipi: Giunzioni occludenti (tight junctions) Giunzioni comunicanti (gap junctions) Giunzioni aderenti o di ancoraggio (anchoring junctions)
Le giunzioni occludenti (giunzioni strette o tight; o Zonulae occludentes) impediscono il passaggio dei fluidi tra le cellule andando a formare attorno al perimetro cellulare una cintura continua detta zonula. Sono particolarmente presenti negli epiteli di rivestimento (es.pelle) e negli epiteli intestinali per far sì che non filtrino sostanze tra i vari ambienti. Nelle giunzioni occludenti gli spazi interstiziali sono annullati in corrispondenza dei punti nodali: punti in cui i lembi di membrana che si affrontano sono saldamente coesi. La totalità delle membrane adiacenti è percorsa da ripetute serie di tali punti, sicché i lembi di membrana appaiono anastomizzati tra loro. Le Giunzioni occludenti svolgono una funzione sigillante, uniscono le due cellule adiacenti senza lasciare interstizi, in modo che le molecole idrosolubili non filtrino facilmente tra una cellula e l'altra. Le giunzioni comunicanti (o serrate o nexus o gap) possiedono canali proteici detti connessoni, che si aprono in risposta a determinati segnali chimici quali modificazioni del ph o della concentrazione degli ioni calcio, consentendo il passaggio di ioni o molecole di basso peso molecolare (fino a 1 kda) tra due cellule. I connessoni sono presenti su entrambe le facce delle membrane cellulari formando un'unica struttura con poro centrale; le due porzioni del connessone aderiscono tra loro formando un canale che permette anche l'accoppiamento elettrico tra due cellule. In una giunzione comunicante il numero di connessoni varia da poche decine a qualche centinaio, con disposizione regolare
Le giunzioni aderenti (ancoranti, di ancoraggio) interessando sia punti di ancoraggio intercellulari che tra cellula e matrice extracellulare, forniscono un supporto strutturale ai tessuti, come ad esempio i muscoli e le cellule dell'epidermide, andando a costituire nel tessuto un dispositivo tramite cui le forze applicate si scompongono secondo tante direttrici. Tale tipo di giunzione sfrutta i filamenti actinici, differenziandosi in due tipi: le fasce di adesione (fascia adhaerens) e le zone di adesione (zonula adhaerens); le fasce d'adesione sono collegamenti che si stabiliscono tra una cellula e l'altra adiacente, grazie alle Caderine, proteine strutturali che sporgono nello spazio interstiziale delle cellule e si uniscono intersecandosi fra loro I desmosomi, o maculae adhaerentes, sono le giunzioni cellulari più conosciute perché al microscopio elettronico hanno una configurazione caratteristica. Immediatamente sotto la membrana plasmatica appare una zona marcatamente elettrondensa: essa è costituita da un addensamento di materiale proteico citoplasmatico che viene definito placca di adesione cui convergono i filamenti intermedi del citoscheletro che si legano lateralmente alla placca di adesione. Come le giunzioni aderenti, i desmosomi assolvono prevalentemente a funzioni meccaniche: grazie al decorso dei filamenti intermedi, le forze conseguenti a insulti meccanici vengono ben scaricate nel tessuto.