Dip Sc Cl Spec Odont UNIVPM, 2 UO Ped e Neonat Osp Macerata, 3 Dip Sc Vita UNIMORE, 4 Dip Ped Univ Catania, 5 Div Ped Univ Magna Graecia
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1 Chiara Monachesi 1, Lucia Padella 1, Rita Lucia Marchesiello 1, Carlo Catassi 1, Enrico Gasparrini 2, Nicola Volpi 3, Francesca Maccari 3, Agata Fiumara 4, Daniela Concolino 5, Maria Teresa Moricca 5, Lucia Zampini 1 1 Dip Sc Cl Spec Odont UNIVPM, 2 UO Ped e Neonat Osp Macerata, 3 Dip Sc Vita UNIMORE, 4 Dip Ped Univ Catania, 5 Div Ped Univ Magna Graecia
2 Gli autori dichiarano di non aver alcun conflitto di interesse.
3 Università Politecnica delle Marche SOD di Clinica Pediatrica Azienda Osp. Univ. Ospedali riuniti di Ancona Università di Modena e Reggio Emilia Dipartimento di Biologia Animale Università di Padova Dipartimento di Salute della Donna e del Bambino Marzo 2014 Marzo 2017 Università di Catania U.O.C. di Clinica Pediatrica A.U.O Politecnico-Vittorio Emanuele Presidio G.Rodolico Centro Regionale di Pediatria Genetica e Malattie Rare Università di Catanzaro
4 Clinica Pediatrica A.U.O Politecnico Vittorio Emanuele Presidio G. Rodolico Università di Catania Centro Regionale di Pediatria Genetica e Malattie Rare Università di Catanzaro Progetto PRIN MPS - neonati Diagnosi Neonatale Neonati (n=900) Urine DMB & Elettroforesi Neonatologia Clinica Pediatrica G. Salesi Ancona GAG totali e Pattern
5 DMB test: ± 96.8 µg GAG/mg creat. Elettroforesi: 7 campioni positivi 893 pattern normale 5 DMB test
6 Caratterizzazione delle bande elettroforetiche anomale evidenziate in 7 campioni su 900 neonati analizzati in totale. + KS CS DS HS Separazione elettroforetica GAG urinari (KS=cheratan solfato, CS=condroitin solfato, DS=dermatan solfato, HS=eparan solfato).
7 1. ANALISI STRUTTURALE DEI GAG: I 7 campioni che hanno mostrato bande anomale all elettroforesi su acetato di cellulosa sono stati sottoposti ad elettroforesi su gel di agarosio dopo digestione con condroitinasi ed eparinasi. 2. RACCOLTA SECONDO CAMPIONE DI URINE: I 7 soggetti risultati positivi sono stati richiamati per la raccolta di un secondo campione di urine (circa 2mL) a distanza di almeno un mese su cui sono state eseguite: 1. Analisi quantitativa dei GAG mediante DMB test. 2. Elettroforesi su acetato di cellulosa in bario acetato per l identificazione del pattern dei GAG escreti.
8 3. RACCOLTA CAMPIONI DI MUCO VAGINALE: I 7 soggetti richiamati erano tutti di sesso femminile. Possibile interferenza causata da crisi genitale del neonato? Come descritto in letteratura, nella maggior parte dei casi compare nel 3-4 giorno di vita e si risolve entro le prime settimane. Sono pertanto stati raccolti 6 campioni di muco vaginale da neonate con diagnosi di crisi genitale su cui è stata eseguita elettroforesi su acetato di cellulosa in bario acetato per l identificazione del pattern.
9 Codice campione: DNMUCZ0207 Data di nascita: MPS II N 355/16 N1 N2 N3 N4 Campione del Dosaggio GAG DMB: 1177 µg/mg Cr Pattern elettroforetico anomalo. Patologico (?) 2 Campione ( ) Dosaggio GAG DMB: 136 µg/mg Cr Pattern elettroforetico normale.
10 Campione urina neonato falso positivo Campione muco vaginale S1 MPS I S2 Pattern elettroforetico anomalo analogo a quello evidenziato in 7 campioni di urina di neonate femmine
11 Elettroforesi su gel di agarosio dei GAG urinari di alcuni campioni falsi positivi, prima (-) e dopo (+) digestione con condroitinasi ABC ed eparinasi.
12 La normalizzazione del pattern dopo pochi mesi sul 2 campione di urine, ci ha portato ad ipotizzare che le bande anomale potrebbero essere riconducibili ad un effetto fisiologico transitorio. L analisi seguita alla digestione con enzimi specifici ha permesso di escludere la presenza di GAG patologici nei campioni di urine. Possibile presenza di glicoproteine come risposta fisiologica agli elevati livelli di estrogeni e progesterone materni trasmessi attraverso la placenta durante la gravidanza.
13 LABORATORIO MALATTIE METABOLICHE Clinica Pediatrica Prof. Carlo Catassi Dr.ssa Lucia Santoro Dr.ssa Lucia Zampini Dr.ssa Tiziana Galeazzi Dr.ssa Lucia Padella Dr.ssa Rita Lucia Marchesiello Dr.ssa Chiara Monachesi Prof. Orazio Gabrielli Prof. Giovanni V. Coppa
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CARTA DEI SERVIZI LABORATORIO MALATTIE METABOLICHE S.O.D CLINICA PEDIATRICA
0. INDICE 0. INDICE... 1 1. UBICAZIONE DEL LABORATORIO... 2 2. LO STAFF... 2 3. ATTIVITA... 3 3.1 Malattie Lisosomiali... 3 3.2 Difetti del metabolismo intermedio....3 4. MODALITA DI ACCESSO ALLE PRESTAZIONI...
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Conflitti di interesse. Gli autori dichiarano di non aver alcun conflitto di interesse.
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