Tessuto di controllo: sezione di arteria, appendice ed epidermide.

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1 Artisan Elastic Stain Kit Codice AR163 Uso previsto Per uso diagnostico in vitro. Il kit Elastic Stain Kit è destinato all'uso di laboratorio per l'identificazione con microscopia ottica di fibre ossitalane, elauine e di fibre di elastina in campioni di tessuto. 1-2 Possono essere utilizzati campioni trattati con tecniche di routine (inclusi in paraffina). Il fissativo preferito è la formalina tamponata a ph neutro. L interpretazione clinica dei risultati, in presenza o in assenza di colorazione, deve avvalersi di studi morfologici eseguiti con opportuni controlli ed essere effettuata da medici qualificati nel contesto dell anamnesi clinica del paziente e di altri test diagnostici. Tutti i reagenti del kit Elastic Stain Kit sono stati preparati per un utilizzo ottimale con il sistema Artisan Staining System della Dako e non richiedono diluizione né miscelazione. Sommario e spiegazione Principio della procedura Il kit Elastic Stain Kit è utilizzato per identificare le fibre di elastina. Questa procedura è basata sul lavoro di Verhoeff 1 e utilizza le soluzioni Alcoholic Hematoxylin, Ferric Chloride e Lugol s Iodine per colorare le fibre di elastina. Per distinguere il collagene dall'elastina è aggiunta la soluzione di Van Gieson. Il kit Elastic Stain Kit è una modifica del metodo originale di Verhoeff. 2 Il kit Elastic Stain Kit è ottimizzato per l'uso con il sistema Artisan Staining System. I passaggi di lavaggio seguono tutti i passaggi di colorazione. Al termine della colorazione, i vetrini asciugati all aria vengono rimossi dallo strumento, diafanizzati in xilene o suoi derivati e montati con un mezzo di montaggio appropriato. I risultati sono interpretati utilizzando un microscopio ottico. Tessuto di controllo: sezione di arteria, appendice ed epidermide. Reagenti forniti Il kit Elastic Stain Kit è composto da quattro confezioni dispenser pronte per l'uso, contiene: Ematossilina alcolica 5% Etanolo 95% ed ematossilina 5% Cloruro ferrico 10% Cloruro ferrico in acqua deionizzata Soluzione iodata di Lugol Iodio 1% e ioduro di potassio 2% in acqua deionizzata Soluzione di Van Gieson 0,1% soluzione di Van Gieson Dako fornisce questi reagenti alla formulazione d'uso ottimale in base alle istruzioni fornite per le procedure di colorazione su sezioni tissutali preparate. Eventuali deviazioni dalle procedure di analisi suggerite possono invalidare i risultati attesi dichiarati. Materiali necessari, ma non forniti 1. Vetrini per microscopio 2. Sistema Artisan Staining System 3. Wash Solution (codice AR102) ( ) P04004IT_01/AR163/ p. 1/4

2 Precauzioni 1. Per uso professionale. 2. Evitare la contaminazione batterica dei reagenti, altrimenti potrebbe verificarsi un incremento della colorazione aspecifica. 3. Una volta completato il numero previsto di analisi, le confezioni dei reagenti potrebbero contenere della soluzione residua. 4. Tempi o temperature di incubazione diversi da quelli specificati possono generare risultati erronei. L utente deve convalidare qualsiasi modifica apportata alla procedura rilasciata dal produttore. 5. Le confezioni dei reagenti, non utilizzate sullo strumento, devono essere conservate in posizione verticale. 6. Conservare le confezioni dei reagenti lontano dalla luce solare diretta e da fonti di calore. 7. In generale, l'utilizzo del prodotto da parte di soggetti di età inferiore a 18 anni non è consentito. Gli utenti devono essere accuratamente informati in merito alle corrette procedure operative, alle proprietà pericolose del prodotto e alle disposizioni di sicurezza necessarie. Per ulteriori informazioni, fare riferimento alla Scheda dati di sicurezza (SDS). 8. Indossare dispositivi di protezione individuale idonei per evitare il contatto con gli occhi e con la pelle. 9. La soluzione inutilizzata deve essere smaltita in conformità alle normative locali, statali e federali. 10. La Scheda di sicurezza è disponibile su richiesta per gli operatori specializzati. Alcoholic Hematoxylin, 5%: % Ethanol, 1-5% Metanolo, 1-5% Hematoxylin H225 H302 H360 H371 H335 H336 H373 P201 P202 P281 P210 P241 P242 P243 P233 P271 P260 P270 P314 P309 + P311 P304 + P340 + P312 P301 + P312 + P330 P303 + P361 + P353 Liquido e vapori facilmente infiammabili. Nocivo se ingerito. Può nuocere alla fertilità o al feto. Può provocare danni agli organi. Può irritare le vie respiratorie. Può provocare sonnolenza o vertigini. Può provocare danni agli organi in caso di esposizione prolungata o ripetuta. Procurarsi istruzioni specifiche prima dell uso. Non manipolare prima di avere letto e compreso tutte le avvertenze. Utilizzare il dispositivo di protezione individuale richiesto. Tenere lontano da fonti di calore, superfici calde, scintille, fiamme libere o altre fonti di accensione. Non fumare. Utilizzare impianti elettrici, di ventilazione, d illuminazione e per la movimentazione dei materiali a prova di esplosione. Utilizzare solo utensili antiscintillamento. Prendere precauzioni contro le scariche elettrostatiche. Tenere il recipiente ben chiuso. Utilizzare soltanto all aperto o in luogo ben ventilato. Non respirare il vapore. Non mangiare, né bere, né fumare durante l uso. In caso di malessere, consultare un medico. IN CASO di esposizione o di malessere, contattare un CENTRO ANTIVELENI o un medico. IN CASO DI INALAZIONE: Trasportare l'infortunato all aria aperta e mantenerlo a riposo in posizione che favorisca la respirazione. Contattare un CENTRO ANTIVELENI o un medico in caso di malessere. IN CASO DI INGESTIONE: Contattare un CENTRO ANTIVELENI o un medico in caso di malessere. Sciacquare la bocca. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE (o con i capelli): togliere immediatamente tutti gli indumenti contaminati. Sciacquare la pelle/fare una doccia. ( ) P04004IT_01/AR163/ p. 2/4

3 P405 P403 P235 Conservare in luogo ben ventilato. Conservare in luogo fresco. Ferric Chloride, 10%: 5-10% tricloruro di ferro H314 P304 + P340 + P P330 + P331 P303 + P361 + P353 + P P405 Provoca gravi ustioni cutanee e gravi lesioni oculari. Indossare guanti protettivi. Fare uso di un dispositivo di protezione degli occhi o del viso. Indossare indumenti protettivi. IN CASO DI INALAZIONE: Trasportare l'infortunato all aria aperta e mantenerlo a riposo in posizione che favorisca la respirazione. Contattare immediatamente un CENTRO ANTIVELENI o un medico. IN CASO DI INGESTIONE: Contattare immediatamente un CENTRO ANTIVELENI o un medico. Sciacquare la bocca. NON provocare il vomito. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE (o con i capelli): Togliere immediatamente tutti gli indumenti contaminati. Sciacquare la pelle/fare una doccia. Lavare gli indumenti contaminati prima di indossarli nuovamente. Contattare immediatamente un CENTRO ANTIVELENI o un medico. IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: Sciacquare accuratamente per parecchi minuti. Contattare immediatamente un CENTRO ANTIVELENI o un medico. Lugol's Iodine: 1-5% Ioduro di potassio H315 H360 H370 H372 P201 P202 P281 P260 P270 P314 P307 + P311 P302 + P352 + P P363 P332 + Provoca irritazione cutanea. Può nuocere alla fertilità o al feto. Provoca danni agli organi. Provoca danni agli organi in caso di esposizione prolungata o ripetuta. Procurarsi istruzioni specifiche prima dell uso. Non manipolare prima di avere letto e compreso tutte le avvertenze. Utilizzare il dispositivo di protezione individuale richiesto. Non respirare il vapore. Non mangiare, né bere, né fumare durante l uso. In caso di malessere, consultare un medico. IN CASO di esposizione, contattare un CENTRO ANTIVELENI o un medico. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: Lavare abbondantemente con acqua e sapone. Togliere gli indumenti contaminati. Lavare gli indumenti contaminati prima di indossarli nuovamente. In caso di irritazione della pelle: consultare un medico. ( ) P04004IT_01/AR163/ p. 3/4

4 P405 Attenzione Van Gieson s Solution: 1-5% 2,4,6-trinitrophenol H315 H317 P261 P272 P302 + P352 + P P363 P333 + Provoca irritazione cutanea. Può provocare una reazione allergica cutanea. Evitare di respirare il vapore. Gli indumenti da lavoro contaminati non devono essere portati fuori dal luogo di lavoro. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: Lavare abbondantemente con acqua e sapone. Togliere gli indumenti contaminati. Lavare gli indumenti contaminati prima di indossarli nuovamente. In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. Conservazione Procedura dello strumento / procedura di colorazione Ciascun componente deve essere conservato alla temperatura indicata sull'etichetta. Non utilizzare dopo la data di scadenza. Se i reagenti sono conservati in condizioni diverse da quelle specificate, le loro condizioni dovranno essere verificate dall'utente. Non sono stati osservati segni evidenti che suggeriscano l'instabilità di questo prodotto, pertanto, per tale verifica, analizzare come controllo un tessuto adeguato. Qualora si ottenga una colorazione imprevista che non sia giustificata da un cambiamento delle procedure di laboratorio o da un'errata conservazione, contattare l'assistenza tecnica della Dako. Commenti introduttivi Per le instruzioni dettagliate fare riferimento al Manuale dell'operatore Artisan. Caricamento delle confezioni reagente Prima di iniziare la colorazione, caricare le confezioni reagente, controllando che non vi siano perdite. Quando si usa un nuovo kit e prima della procedura iniziale di colorazione della giornata, controllare il caricamento di ogni confezione reagente. 1. Su un asciugamano di carta, se presente, rimuovere il tappo di spedizione rosso o nero dal sistema dispenser della confezione reagente abbassandolo delicatamente. 2. Per caricare una confezione reagente, quando è la prima ricevuta, tenerla con il sistema dispenser rivolto verso il basso e colpirla lateralmente per 2-3 volte con per liberare le bolle d'aria che potrebbero essere intrappolate nel sistema. 3. Comprimere completamente e rilasciare lo stantuffo per 3-4 volte in rapida successione, assorbendo con attenzione il liquido fuoriuscito con l'asciugamano di carta, la garza assorbente o materiale simile fino a ottenere un flusso costante. 4. Evitare di dispensare un'eccessiva quantità di reagente durante il caricamento. Questo può determinare la perdita del reagente, portando all'esaurimento della confezione reagente prima di aver eseguito il numero di analisi previste. 5. Prima di ogni uso, le confezioni reagente possono essere caricate 1-2 volte, controllando che il flusso sia costante. 6. Tenere la confezione reagente con una mano, far scivolare la guida per il montaggio sul retro della confezione reagente nelle fessure sul carosello dei reagenti fino al completo posizionamento della confezione. ( ) P04004IT_01/AR163/ p. 4/4

5 Procedura Per la procedura dettagliata consigliata, consultare la sezione Rapporti delle procedure nel software dell host Artisan. A completamento della colorazione, i vetrini saranno asciutti. Immergerli in xilene o un suo derivato e montarli in modo permanente. Interpretazione della colorazione Caratteristiche di performance Fibre di elastina:...nero Nuclei:...blu-nero Collagene:...rosso Altri elementi tissutali:...giallo Riproducibilità La riproducibilità intra-esecuzione del 100% è stata determinata colorando 12 vetrini che contengono lo stesso tessuto di controllo su uno strumento. La riproducibilità inter-esecuzione del 100% è stata determinata colorando 12 vetrini che contengono lo stesso tessuto di controllo su tre diversi strumenti. Eventuali problemi e risoluzione Riferimenti bibliografici Fare riferimento alla sezione Eventuali problemi e risoluzione del Manuale dell'operatore Artisan o contattare l'assistenza tecnica. 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Churukian CJ. Manual of the Special Stains Laboratory, Department of Pathology and Laboratory Medicine, University of Rochester Medical Center, Rochester, New York, 1997 Edition 05/15 ( ) P04004IT_01/AR163/ p. 5/4