UNIVERSITÀ DEGLI STUDI DI TORINO
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- Leonora Coppola
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1 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ OGGETTO: Indagine sulla composizione chimica dei prodotti finiti VitaMel mediante cromatografia liquida ad alta prestazione interfacciata in serie con spettrofotometro UV- Diode Array e spettrometro di massa. Parte sperimentale. Scioglimento di 1. g di campione in 1 ml di una soluzione 3/7 acqua-metanolo. In modo da ottenere una completa solubilizzazione. Introduzione nella strumento di 1uL per la separazione cromatografica e successivo riconoscimento qualitativo dei costituenti. Tale riconoscimento qualitativo è stato operato attraverso l acquisizione dello spettro di assorbimento UV nell intervallo di lunghezze d onda tra 21 e 42 nm che ha consentito di individuare la classe chimica di appartenenza (polifenoli, esteri dell acido caffeico, flavani, flavoni, flavanoli, flavonoli etc.) e la successiva conferma in spettrometria di massa attraverso l individuazione del peso molecolare e dei principali frammenti. I risultati sono riportati nelle pagine seguenti. Si tratta dei cromatogrammi acquisiti in UV corredati dell elenco delle sostanze individuate. Nella maggior parte dei casi si tratta di sostanze non riscontrate di solito nei mieli e di chiara derivazione vegetale. Ad ulteriore conferma, nei casi di prodotti in cui vi era una consistente comunanza di piante utilizzate, sono state riportate delle sovrapposizioni dei rispettivi cromatogrammi che evidenziano la sovrapponibilità sostanziale del profilo cromatografico.
2 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ LIFE-MEL GINSENG SIBERIANO, ECHINACEA PURPUREA, UNCARIA TOMENTOSA, VACCINIUM MYILLUS, UICA DIOICA, TARAXACUM OFFICINALIS, FICUS CARICA, TRIFOLIUM PRATENSE, MORUS ALBA, CICHORIUM INTYBUS, BETA VULGARIS CICLA, INULA HELENIUM, RIBES NIGRUM, MELISSA OFFICINALIS, CALENDULA OFFICINALIS, AVENA SATIVA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LIFE_MEL_SOXLHET_NEG.D) Figura 1: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.17 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 9 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 19.9 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 26.3 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 27.5 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO)
3 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ LADY-MEL NIGHT TRIFOLIUM PRATENSE, MEDICAGO SATIVA, VITEX AGNUS-CASTUS, MATRICARIA RECUTITA, PASSIFLORA INCARNATA, HUMULUS LUPULUS, VERBENA OFFICINALIS 35 DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LADY_MEL_N_MEOH_H2_NEG.D) Figura 2: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.12 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 17.7 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 26. LUTEOLINA-2-GLUCURONIDE 27.5 QUERCETINA-ARABINOSIDE-GLUCOSIDE 29.1 LUTEOLINA-RUTINOSIDE 3.1 LUTEOLINA-GLUCURONIDE-GLUCOSIDE 31.5 RUTINA 31.7 APIGENINA-RUTINOSIDE 33.1 APIGENINA-GLUCURONIDE-ARABINOSIDE
4 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ LADY-MEL DAY TRIFOLIUM PRATENSE, MEDICAGO SATIVA, VITEX AGNUS-CASTUS, MATRICARIA RECUTITA, CALENDULA OFFICINALIS, GINSENG SIBERIANO, MENTHA X PIPERITA OFFICINALIS, SERENOA REPENS 35 DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LADY_MEL_D_MEOH_H2_NEG.D) Figura 3: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.8 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 27.5 QUERCETINA-ARABINOSIDE-GLUCOSIDE 29.1 LUTEOLINA-RUTINOSIDE 3.1 LUTEOLINA-GLUCURONIDE-GLUCOSIDE 31.5 RUTINA 31.7 APIGENINA-RUTINOSIDE 33.1 APIGENINA-GLUCURONIDE-ARABINOSIDE *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LADY_MEL_D_MEOH_H2_NEG.D) *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LADY_MEL_N_MEOH_H2_NEG.D) Figura 4: confronto dei cromatogrammi UV acquisiti a =32 nm dei campioni LADY-MEL DAY e LADY-MEL NIGHT
5 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ RELAX-MEL INULA HELENIUM, AVENA SATIVA, VITEX AGNUS-CASTUS, PASSIFLORA INCARNATA, LAVANDULA ANGUSTIFOLIA, HUMULUS LUPULUS DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\RELAX_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 5: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.9 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 26. LUTEOLINA=2GLUCURONIDE 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 29.7 CRISINA-RUTINOSIDE 34.3 FLAVONOIDE
6 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ DEFENCE-MEL GINSENG SIBERIANO, ECHINACEA PURPUREA, UNCARIA TOMENTOSA, BETA VULGARIS CICLA, MEDICAGO SATIVA, SAMBUCUS NIGRA, ECHINACEA PALLIDA, POLYGONUM AVICULARE, ECHINACEA ANGUSTIFOLIA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\DEFENCE_MEOH_H2O_NEG.D) Figura 6: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 5.46 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 6.28 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO
7 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ INFLU-MEL GINSENG SIBERIANO, ECHINACEA PURPUREA, UNCARIA TOMENTOSA, BETA VULGARIS CICLA, MEDICAGO SATIVA, SAMBUCUS NIGRA, ECHINACEA PALLIDA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\VIR_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 7: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 4.88 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 6.12 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 8.99 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\DEFENCE_MEOH_H2O_NEG.D) *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\VIR_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 8: confronto dei cromatogrammi UV acquisiti a =32 nm dei campioni DEFENCE-MEL e INFLU-MEL
8 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ POTENT-MEL GINSENG SIBERIANO, INULA HELENIUM, ANGELICA ATROPURPUREA, ARALIA RACEMOSA, VITEX AGNUS- CASTUS, SCHISANDRA CHINENSIS, PANAX GINSENG, SERENOA REPENS, PLANTAGO IMPOANTI, LEPIDIUM MEYENII, TRIBULUS TERRESTRIS, VITIS VINIFERA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\POTENT_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 9: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.19 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 17.7 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO
9 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ ENERGY-MEL GINSENG SIBERIANO, INULA HELENIUM, ARALIA RACEMOSA, PLANTAGO MAJOR, ANGELICA ATROPURPUREA, VITEX AGNUS-CASTUS, SCHISANDRA CHINENSIS, PANAX GINSENG 12 DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\ENERGY_MEL_MEOH_H2O_NEG.D) Figura 1: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.7 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 17.7 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\POTENT_MEL_MEOH_H2_NEG.D) *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\ENERGY_MEL_MEOH_H2O_NEG.D) Figura 11: confronto dei cromatogrammi UV acquisiti a =32 nm dei campioni POTENT-MEL e ENERGY-MEL
10 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ GASTRO-MEL LAURUS NOBILIS, SALVIA OFFICINALI, ANGELICA ATROPURPUREA, HYDRANGEA ARBORESCENS, OPUNTIA FICUS-INDICA, MEDICAGO SATIVA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\GASTRO_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 12: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 6.1 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 29.2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 34.9 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 42.8 FLAVANO 51.3 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 52 CRISINA 53.2 PINOCEMBRINA 53.6 GALANGINA 64.1 PINOSTROBINA
11 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ CLEAR-MEL PLANTAGO MAJOR, SAMBUCUS NIGRA, POLYGONUM AVICULARE, PINUS SYLVESTRIS, POULACA OLERACEA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\CLEAR_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 13: cromatogramma UV acquisito a =32 nm DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\CLEAR_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 14: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 4.48 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 35.6 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO
12 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ LARINGO-MEL BETA VULGARIS CICLA, MELISSA OFFICINALIS, CALENDULA OFFICINALIS, LAURUS NOBILIS, SAMBUCUS NIGRA, ORIGANUM MAJORANA, FOENICULUM VOLGARE DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LARYNGO_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 15: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 4.48 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 6.14 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 35.6 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\CLEAR_MEL_MEOH_H2_NEG.D) *DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\LARYNGO_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 16: confronto dei cromatogrammi UV acquisiti a =32 nm dei campioni CLEAR-MEL e LARYNGO-MEL
13 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ BRONCO-MEL LAURUS NOBILIS, SALVIA OFFICINALIS, PLANTAGO MAJOR, SAMBUCUS NIGRA, MATRICARIA RECUTITA, EUCALYPTUS GLOBULUS, ROSMARINUS OFFICINALIS DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\BRONCHO_MEOH_H2_NEG.D) Figura 17: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 4.5 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 6.1 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 8.99 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 23.4 APIGENINA-C-GLICOSILATA (IN 6 E 8) 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 35.6 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO
14 Via P. Giuria, TORINO (ITALIA) Tel. 11/ Fax 11/ MAG-MEL BETA VULGARIS CICLA, AVENA SATIVA, MEDICAGO SATIVA, PUNICA GRANATUM, JUNGLAS REGIA, PETROSELIUM CRISPUM, PHASEOLUS VULGARIS, CERATONIA SILIQUA DAD1 B, Sig=32,4 Ref=4,1 (MIELE_ISRAELIANO_NEG_9SET13\MAGNE_MEL_MEOH_H2_NEG.D) Figura 18: cromatogramma UV acquisito a =32 nm 4.88 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 6.12 POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) POLIFENOLO (DERIVATO ACIDO BENZOICO) 2 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.1 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 21.7 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 23.4 APIGENINA C GLICOSILATA (IN 6 E 8) 26.5 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO 35.6 ESTERE DELL ACIDO CAFFEICO
UNIVERSITÀ DEGLI STUDI DI TORINO
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