APICOLTURA E MIELE TRA OPERATORI E CONTROLLI

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1 APICOLTURA E MIELE TRA OPERATORI E CONTROLLI Problematiche chimiche in apicoltura Rimini 28 marzo 2012 Giorgio Fedrizzi [email protected] Reparto di di Chimica degli Alimenti Bologna Istituto Zooprofilattico della Lombardia e Emilia Romagna

2 La P.A. è una delle più gravi e diffuse malattie delle api. Paenibacillus larvae Colonie di P. larvae forme vegetative spore

3 Distruzione delle arnie infette

4 Trattamenti con antibiotici In tutti gli stati UE non esistono farmaci registrati a base di antibiotici per le api (No MRL) L utilizzo illegale con conseguenze penali (L. 283) Molecole più usate: tetracicline (OTC), tilosina, sulfamidici, streptomicina Farmaci registrati negli USA

5 Trattamenti antibiotici

6 tilosina: Trattamenti antibiotici

7 USA Alcuni farmaci sono registrati Tempo di sospensione = 4 settimane MRL = 100 ppb Farmacoresistenza

8 Trattamenti antibiotici Com è stato fissato? PNR 2009: Fissato un limite di azione (5 ppb) per OTC, tilosina, sulfamidici

9 Trattamenti antibiotici e al commercio? Sotto tale limite il miele è considerato idoneo al consumo e non c è illecito

10 Trattamenti antibiotici e al commercio? Sotto tale limite il miele è considerato idoneo al consumo e non c è illecito

11 Trattamenti antibiotici Possibile l utilizzo in deroga Deroga = Utilizzo in via eccezionale!!! Ricettazione in deroga e compilazione registro trattamenti Qual è il tempo di sospensione?

12 Trattamenti antibiotici Tempi di sospensione di difficilissima valutazione mancanza di studi di farmacodinamica nell alveare significativi fenomeni di accumulo (cera, legno ) biologia delle api condizioni climatiche

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16 Terapia o trattamento preventivo? sulfamidici (sulfatiazolo) antibiotici (clorotetraciclina, ossitetraciclina, tetraciclina) altre sostanze (acido linoleico, oli essenziali) effetto batteriostatico/battericida temporaneo non efficaci nei confronti delle spore

17 Trattamenti antibiotici Modalità di somministrazione OTC: 1 1,5 g Miscelato in 30 g di zucchero a velo (introduzione in tovagliolo arrotolato) Diluito in ml di sciroppo zuccherino 50% Una somministrazione (ottobre)

18 Trattamenti antibiotici E una buona pratica apistica? Riduzione comparsa sintomi Riduzione presenza infezione RIDUZIONE PRESENZA SPORE PRESENZA RESIDUI

19 Bonifica materiale Disinfezione arnia Calore (forno, fiamma, paraffina) Soda caustica Raggi gamma

20 Sterilizzazione del materiale apistico radiazioni gamma radiazioni ionizzanti (Cobalto 60) azione sterilizzante (dosaggio: 25 kgy) unità di trattamento: 100x120x200h cm costi: 130,00 euro/unità

21 Rischi derivanti dall utilizzo di sostanze ad azione antibatterica presenza di infezione latente ricomparsa della malattia contaminazione del miele danni commerciali

22 RESIDUI NEL MIELE NR. CAMPIONI ANALIZZATI NR. IRREGOLARI IRREGOLARI ,30% ,80% ,80% ,20% 2010 (!) ,00% % IRREGOLARI 12,00% 10,00% 8,00% 6,00% 4,00% 2,00% (!) 0,00% IRREGOLARI

23 2009 NR. IRREGOLARI CONCENTRAZIONE MASSIMA ( g/kg) STZ 2 26 TTC 3 52 CLTTC 1 7 TILO 1 14 propoli TTC NR. IRREGOLARI CONCENTRAZIONE MASSIMA ( g/kg) TTC 6 * 667 OTTC 1 7 TILO 1 8 propoli OTC 1 38 * 1 MIELE BIOLOGICO con 223 g/kg

24 ANTIBIOTICI TOTALI 2010 TILOSINA 216 Lombardia Emilia Romagna NAS IIZZSS CRA API Autocontrollo N D / / 1 / / 2 / TOTALI 2010 STREPTOMICINA 163 Lombardia Emilia Romagna NAS IIZZSS CRA API Autocontrollo N D / / 4 7 / / / / / / /

25 ANTIBIOTICI TOTALI 2010 SULFAMIDICI 484 Lombardia Emilia Romagna NAS IIZZSS CRA API Autocontrollo N D / / 3 1 / / / / TOTALI 2010 TETRACICLINE 439 Lombardia Emilia Romagna NAS IIZZSS CRA API Autocontrollo N D / / / /

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28 80 70 Campioni non regolari suddivisi per piano Extrapiano Piano Sospetto Campioni non regolari suddivisi per piano Extrapiano Piano Sospetto

29 30 Campioni non regolari suddivisi per specie e piano Extrapiano Piano Sospetto Bovini Conigli Equini Latte Miele Suini Volatili da cortile 14 Campioni non regolari suddivisi per specie e piano Extrapiano Piano Sospetto Bovini Equini Latte Miele Ovini e Caprini Suini Uova Volatili da cortile

30 NUOVI ANTIBIOTICI....

31 NUOVI ANTIBIOTICI

32 NUOVI ANTIBIOTICI

33 ACCREDITAMENTO DELLE PROVE

34 MARZO 2007

35 1 TRATTAMENTO: Polvere contenente Ossitetraciclina e Tetraciclina: 1g per 4 famiglie fino al 2004 Polvere sciolta nello sciroppo zuccherino usato per alimentare le api; Alimentazione api anche con miele ottenuto dall anno precedente.

36 2 TRATTAMENTO: Polvere contenente Clortetraciclina: 1 unico trattamento nella primavera 2005 Polvere mescolata a zucchero a velo: 1 cucchiaiata sui telai, spruzzati successivamente con acqua; Dal 2006 interrotta alimentazione api anche con miele ottenuto dall anno precedente.

37 TETRACICLINE In conformità al parere del Consiglio Superiore di Sanità sulla ricerca di sostanze per le quali non sono stati previsti limiti d azione comunitari, il PNR 2009 indica come limite di rilevabilità richiesto dai laboratori di analisi per la ricerca di Tetracicline nel miele un valore pari a 5 µg/kg. Clortetraciclina (CTCC) Tetraciclina (TETRA) Ossitetraciclina (OSTE)

38 Analisi arnia: lampada di Wood lampada fluorescente caratterizzata da un vetro di colore blu scuro dovuto alla presenza di ossido di nichel. Può essere impiegata per illuminare materiali su cui una radiazione ultravioletta induce effetti di fluorescenza: consente l'emissione selettiva di luce UV di lunghezza d'onda compresa non superiore a 400 nm. λ max Tetracicline 350nm intensa fluorescenza!!!

39 Analisi arnia: CTCC 1397 µg/kg OSTE 160 µg/kg TETRA 1097 µg/kg CTCC 576 µg/kg OSTE 251 µg/kg TETRA 1232 µg/kg

40 Analisi arnia: CTCC µg/kg OSTE 743 µg/kg TETRA 2577 µg/kg

41 Analisi arnia: CTCC µg/kg TETRA 73 µg/kg CTCC 3458 µg/kg OSTE 56 µg/kg TETRA 783 µg/kg CTCC 394 µg/kg OSTE 804 µg/kg TETRA µg/kg

42 CTCC 1109 µg/kg OSTE 1278 µg/kg TETRA 366 µg/kg Analisi arnia:

43 Analisi telaio 2005: in arnia dopo ultimo trattamento con CTCC CTCC 319 µg/kg OSTE 11 µg/kg TETRA 52 µg/kg CTCC 510 µg/kg OSTE 9 µg/kg TETRA 17 µg/kg

44 Analisi telaio 2005: in arnia dopo ultimo trattamento con CTCC

45 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni Acqua di lavaggio opercoli Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa CTCC 103 µg/kg TETRA 7 µg/kg 53 µg/kg 29 µg/kg

46 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni Acqua di lavaggio opercoli Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa CTCC 75 µg/kg 46 µg/kg 59 µg/kg

47 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni Acqua di lavaggio opercoli Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa CTCC 87 µg/kg 37 µg/kg 35 µg/kg

48 Analisi telaio 2005: in arnia dopo ultimo trattamento con CTCC CTCC 84 µg/kg CTCC 195 µg/kg TETRA 16 µg/kg

49 Il polline è contaminato??? CTCC 0 µg/kg OSTE 0 µg/kg TETRA 0 µg/kg

50 Miele celle non opercolate: CTCC 33 µg/kg

51 Cera opercoli fusa al sole : CTCC 231 µg/kg OSTE 6 µg/kg TETRA 17 µg/kg

52 Telaio di nido più vecchio: CTCC µg/kg OSTE 321 µg/kg TETRA 3609 µg/kg CTCC 6452 µg/kg OSTE 20 µg/kg TETRA 550 µg/kg

53 Telaio di nido più vecchio: CTCC 3107 µg/kg TETRA 78 µg/kg CTCC 4889 µg/kg TETRA 76 µg/kg

54 Telaio di nido più vecchio: Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni CTCC µg/kg OSTE 16 µg/kg TETRA 1941 µg/kg Acqua di lavaggio opercoli 2864 µg/kg 155 µg/kg Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa 1629 µg/kg 95 µg/kg

55 Telaio di nido ancora più vecchio: CTCC µg/kg OSTE 484 µg/kg TETRA µg/kg CTCC 6890 µg/kg OSTE 150 µg/kg TETRA 2681 µg/kg

56 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni CTCC 2119 µg/kg OSTE 11 µg/kg TETRA 274 µg/kg Acqua di lavaggio opercoli 386 µg/kg 109 µg/kg Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa 82 µg/kg 26 µg/kg

57 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni CTCC 2070 µg/kg OSTE 52 µg/kg TETRA 293 µg/kg Acqua di lavaggio opercoli 162 µg/kg 11 µg/kg 98 µg/kg Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa 41 µg/kg 14 µg/kg

58 Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni CTCC 1478 µg/kg OSTE 12 µg/kg TETRA 452 µg/kg Acqua di lavaggio opercoli 90 µg/kg 81 µg/kg Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa 65 µg/kg 36 µg/kg

59 CTCC 259 µg/kg TETRA 49 µg/kg CTCC 277 µg/kg TETRA 54 µg/kg

60 Telaio di nido (~ 10 anni): CTCC 6229 µg/kg OSTE 478 µg/kg TETRA 1420 µg/kg CTCC 252 µg/kg TETRA 9 µg/kg CTCC 7932 µg/kg OSTE 1612 µg/kg TETRA µg/kg

61 Telaio di nido (~ 10 anni): Cera opercoli lavati con acqua in ultrasuoni CTCC 3257 µg/kg OSTE 13 µg/kg TETRA 641 µg/kg Acqua di lavaggio opercoli 437 µg/kg 42 µg/kg Miele presente nelle celle opercolate estratto attraverso una siringa 232 µg/kg 37 µg/kg

62 CTCC 49 µg/kg OSTE 35 µg/kg TETRA 20 µg/kg Telai di melario (~ 10 anni): CTCC 28 µg/kg OSTE 11 µg/kg TETRA 169 µg/kg

63 CTCC 46 µg/kg OSTE 14 µg/kg TETRA 9 µg/kg Telai di melario (~ 10 anni): CTCC 705 µg/kg OSTE 90 µg/kg TETRA 168 µg/kg

64 CTCC 8 µg/kg E se analizziamo le api??? CTCC 13 µg/kg

65 CONCLUSIONI L apicoltore aveva dichiarato 2 trattamenti: 1 ) fino al 2004 con una polvere contenente Ossitet raciclina e Tetraciclina 2 ) unico trattamento nel 2005 con una polvere cont enente Clortetraciclina ANALISI EFFETTUATE NEL 2007 A distanza di 2 dall ultimo trattamento e di almeno 3 anni dal primo trattamento residui degli antibiotici utilizzati erano ancora persistenti e ad elevate concentrazioni

66 E ORA? DAL 2007 AL 2010? DOPO 5 ANNI DALL ULTIMA SOMMINISTRAZIONE

67 CONCLUSIONI Sulla base delle analisi effettuate è possibile indicare sui telai alcuni punti di accumulo di tali antibiotici: Propoli al di sotto delle orecchiette e lungo la superficie del longarone; Celle opercolate nella parte superiore del telaio; Miele celle opercolate o aperte; E stata inoltre riscontrata una concentrazione maggiore di antibiotici nei telai di nido rispetto ai telai di melario.

68 PUNTI DI ACCUMULO

69 PNR 2009 Buone pratiche di prelievo: Per il miele è previsto il prelievo di telaini di melario, direttamente dall arnia presso l allevamento MODALITA DI CAMPIONAMENTO DIRETTAMENTE SUL CAMPO

70 DISTRIBUZIONE DEGLI ANTIBIOTICI ALL'INTERNO DEI MATURATORI

71 2 MATURATORI ACCIAIO INOX CAPACITA' 200 L APERTURA A GHIGLIOTTINA SULLA PARTE INFERIORE SIGILLI TEMPERATURA AMBIENTE 25 C NO FONTI DI CALORE NO LUCE SOLARE DIRETTA 2 SETTIMANE DI RIPOSO

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73 13 strati campionati Ogni strato in doppio (rosso-blu) Ogni strato identificato (1, 2..., 13) Differenza di colore tra 1 e 2

74 dimensioni e forma simile al primo miele differente per: densità (più denso) colore (non trasparente) presenza di impurità. netta separazione tra gli strati Una iniziale disomogeneità si è rivelata essere una netta separazione della struttura del miele

75 Un area (A) molto densa e chiara; Un area granulosa e disomogenea (B); Un area più scura e trasparente (C). A B C

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78 AL MOMENTO DEL PRELIEVO NETTA SEPARAZIONE DI FASI DEL MIELE DOPO CIRCA 15 GIORNI DAL PRELIEVO

79 Concentrazioni di Tilosina nel primo maturatore S U P 15 c m Prelievo lato blu Prelievo lato rosso str a to d e l p r e l i e v o 30 c m 45 c m 60 c m 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 concentrazioni (µg / Kg)

80 Concentrazioni di Tilosina nel secondo maturatore S U P Prelievo lato blu Prelievo lato rosso 15 c m str a to d e l p r e l i e v o 30 c m 45 c m 60 c m 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 concentrazioni (µg / Kg)

81 PRIMO MATURATORE SECONDO MATURATORE STRATO BLU ROSSO BLU ROSSO SUP 3,8 1,9 0,5 0,3 5 cm 1,0 1,4 0,3 0,3 10 cm 1,1 1,4 0,7 0,4 15 cm 1,3 1,4 0,7 0,8 20 cm 1,3 1,4 2,3 0,9 25 cm 1,3 1,2 2,7 2,0 30 cm 1,4 1,5 3,2 2,1 35 cm 1,4 1,2 2,8 2,4 40 cm 1,1 1,5 2,2 2,1 45 cm 1,2 1,2 2,5 2,3 50 cm 1,4 1,4 2,7 2,5 55 cm 1,1 1,5 2,7 2,4 60 cm 1,3 1,4 2,0 2,3

82 A B C CONCENTRAZIONI DI TILOSINA NEI CAMPIONI A - B - C A B C 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 (µg/kg)

83 PRIMO MATURATORE strati d el p relievo SUP 5 cm 10 cm 15 cm 20 cm 25 cm 30 cm 35 cm 40 cm 45 cm 50 cm 55 cm 60 cm Acidità Libera 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 meq / Kg

84 SECONDO MATURATORE SUP 5 cm 10 cm 15 cm 20 cm Acidità Libera strati del prelievo 25 cm 30 cm 35 cm 40 cm 45 cm 50 cm 55 cm 60 cm 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 meq / Kg

85 PERCENTUALE DI UMIDITA' strati d el p relievo SUP 5 cm 10 cm 15 cm 20 cm 25 cm 30 cm 35 cm 40 cm 45 cm 50 cm 55 cm 60 cm 14,0 14,5 15,0 15,5 16,0 16,5 17,0 17,5 18,0 18,5 19,0 % PRIMO MATURATORE SECONDO MATURATORE

86 SUP 5 cm 10 cm 15 cm 20 cm 25 cm 30 cm 35 cm 40 cm 45 cm 50 cm 55 cm 60 cm Acidità Libera I Acidità Libera II umidità I umidità II

87 CONCLUSIONI PRELIEVO DI MIELE MEDIANTE APERTURA DEL RUBINETTO INFERIORE SVUOTAMENTO COMPLETO O QUASI PER OMOGENARE LA MATRICE DA CAMPIONARE CAROTAGGI CON STRUMENTAZIONI VARIE STRATIFICAZIONE DEI RESIDUI DI TILOSINA

88 PROBLEMA NEONICOTINOIDI QUANTI SONO COME/QUANDO VENGONO IMPIEGATI DOSI D IMPIEGO STABILITA

89 PROBLEMA NEONICOTINOIDI MORIA DELLE API Intervento SVET Indagine epidemiologica-ambientale Analisi api morte congelate Analisi vegetali Scheda intervento raccolta dati

90 PROBLEMA NEONICOTINOIDI Attività extra-pnr 2012 Miele di melario in arnie critiche Campionamento + analisi neonicotinoidi Intervento SVET Indagine epidemiologica-ambientale Analisi altre tipologie di miele Analisi polline Scheda intervento

91 GRAZIE PER L ATTENZIONE